Андреа Вінхенбах, дисертація, ФУ Берлін
Випробування необхідності живих мікробів для сприяння гідролізу кишкової лактози мікробною Я-галактозидазою кисломолочних продуктів на моделі гнотобіотичного міні-свиня Göttinger
Дослідження для визначення того, чи потрібні життєздатні мікроорганізми під час кишкового лактозного гідролізу кисломолочних продуктів мікробною Я-галактозидазою з використанням гнотобіотичних міні-свиней Геттінген
Резюме
Найпоширенішою причиною непереносимості молока у всьому світі є відсутність кишкової Я-галактозидази, що призводить до мальабсорбції лактози. Через вміст мікробних Я-галактозидаз кисломолочні продукти набагато краще переносяться лактозними мальабсорбентами, ніж неферментоване молоко.
Метою роботи було сприяти з’ясуванню питання про те, чи гідроліз кишкової лактози мікробними Я-галактозидазами з кисломолочних продуктів пов’язаний з наявністю в продукті живих мікробів і чи здатні ці мікроби, що надходять з молочним продуктом, знаходитися в шлунково-кишковому тракті -Трактика переїзду. З цією метою проводили експерименти з годуванням кисломолочними продуктами, які не містили вбитих або живих лактобактерій, на міні-свинях гнотобіотиків та щурах ноготобіотиків.
У попередніх тестах досліджено вплив часу зберігання та проходження шлунка in vitro на лактобактерії та їх активність Я-галактозидази, а також рівень активності кишкової Я-галактозидази в різних відділах тонкої кишки досліджуваних тварин.
У експерименті з годуванням 6 тваринам обох видів давали 3 різні дієти кисломолочного продукту з однаковим вмістом лактози (40 г/л) протягом 2 тижнів кожному. Перша дієта не містила лактобактерій, друга g-радіація вбила, а третя живі лактобактерії. Останні дві дієти містили однакову активність Я-галактозидази (приблизно 400 МО/л), у першій дієті активності не було. Щоб покрити щоденні потреби в енергії та поживних речовинах, тваринам давали прикорм без лактози та галактозидази.
Вплив трьох пробних дієт на гідроліз кишкової лактози визначався у обох видів тварин за допомогою балансу орофкальної лактози, у випадку експерименту на свинях, додатково скоригованого значеннями невсмоктуючого маркера. На додаток до балансу лактози був зареєстрований баланс орофдкальної Я-галактозидази. Для того, щоб дослідити адгезійну поведінку лактобактерій, мікроби протягом короткого часу під час пробної дієти піддавались живим мікробам, а кількість мікроорганізмів у фекаліях тварин визначали протягом усього періоду.
Отримані наступні результати:
Кількість лактози, що виділяється з калом, була високою у свиней та щурів під час першої пробної дієти і різко впала під час наступних двох пробних дієт. Були статистично значущі відмінності між кількістю лактози у фекаліях при дієті 2 у порівнянні з дієтою 3, як це було у випадку з дієтою 1, але вони були дещо меншими, ніж у обох дієт (3 і 2) для дієти 1. Цей результат у свиней не було змінено навіть після посилання на значення маркера. Було встановлено, що засвоюваність лактози у дієті 1 була значно нижчою, ніж у дієті 2 та 3. Перетравність лактози у дієтах 2 та 3 не суттєво відрізнялася.
Активність Я-галактозидази, яку можна виявити в калі, суперечила лактозі. Під час дієти 1 були виміряні найменші кількості або взагалі відсутність активності Я-галактозидази; при дієті 2 вона зростала, щоб досягти найвищого значення під час дієти 3. Відмінності між усіма трьома дієтами були статистично значущими.
Введений штам лактобактерій не зміг назавжди закріпитися в тонкому кишечнику гнотобіотичних міні-свиней і щурів; він зник через кілька днів після припинення прийому всередину.
З цих результатів можна зробити наступний висновок:
Кишковий гідроліз лактози після прийому кисломолочних продуктів був найвищим, коли мікробний акт-галактозидаза потрапляла в організм з дієтою, і мало значення, чи живі лактобактерії, чи вони були вбиті; кишковий гідроліз лактози був трохи вищим на дієті з живими лактобактеріями, ніж на дієті з убитими. Важливо, щоб фермент, захищений оболонкою лактобактерій, міг пережити шлунковий прохід, не руйнуючись шлунковою кислотою та протеазами. Це було чітко показано в тестах in vitro, щоб перевірити, чи може шлунковий прохід вижити. Цей захист забезпечують (вбиті) лактобактерії, оброблені g-променями майже так само, як і живі лактобактерії. Поки клітинна мембрана мікробів ціла, для сприяння гідролізу кишкової лактози не важливо, щоб мікроби були життєздатними.
Зміст
Ви можете завантажити всю дисертацію як заархівований файл tar або як zip-файл.
Клацнувши на заголовки розділів, ви можете завантажити розділ у форматі PDF: