Асоціація BVD із синдромом PDda psdacine

Асоціація BVD із синдромом PDD у Psitaccine

Вперше опубліковано: 9 травня 2016 р

Редакційна група: MEDICHUB MEDIA

Анотація

Провентрикулярна дилатаційна хвороба (PDD) - це запальне захворювання птахів, яке переважно вражає вегетативні нерви верхніх та середніх відділів шлунково-кишкового тракту. Загальна кількість птахів 54, що належать до різних видів (6 Amazona aestiva, 1 Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, 1 Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, 1 Pionis menstruus, 2 Pionites leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula eupatria) були включені в дослідження. Під час скринінгу методами ПЛР на наявність ABV виявлено 47 заражених тварин, які отримали позитивні результати в аналізах. Інші птахи були негативними в цих аналізах. Також було відмічено рясну присутність бродильних дріжджів у різних органах заражених папуг.

Резюме

Розширена хвороба шлуночків (PDD) - це запальний стан, який вражає птахів у вегетативних нервах верхніх та середніх відділів шлунково-кишкового тракту, у пацієнтів, як правило, спостерігаються дисфункції шлунково-кишкового тракту, такі як дисфагія, регургітація та наявність неперетравленої їжі в калі. 54 псатичні птахи, що належать до різних видів (6 Amazona aestiva, 1 Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, 1 Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, 1 Pionis menstruus, 2 Pioes leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula aupatria) були предметами цього дослідження. Методи ПЛР-скринінгу для визначення присутності пташиного борнавірусу (AVV) виявили 47 випадків позитивної інфекції. Решта випробовуваних показали негативний результат. Також в різних органах заражених папуг спостерігається велика кількість бродильних дріжджів.

Дослідження показали, що існує кілька генотипів вірусу, які в основному вражають певні види папуг та викликають різну картину ураження та еволюцію. На сьогоднішній день дослідження ще не з'ясували частоти кожного генотипу в популяціях папуг і не змогли чітко розрізнити певний генотип від певних видів папуг. Статистичні дослідження порівняно важко провести, оскільки було встановлено, що один і той же генотип може бути виділений з різних видів (особливо у господарствах з кількома видами папуг, вірус передається незалежно від генотипу до будь-якого виду), і в багатьох випадках два або більше генотипів виділено від однієї особини. Крім того, лабораторний аналіз виявляє наявність вірусу (у багатьох випадках результат видається як позитивний борнавірус) без посилання на генотип.

Лабораторний аналіз проводиться або для того, щоб виявити наявність та ідентифікацію вірусу, або для того, щоб виявити специфічні антитіла. На сьогодні підтверджуючий діагноз позитивного пташиного борнавірусу проводиться за допомогою ПЛР-аналізу, який виявляє наявність вірусу в біологічних зразках, але не підтверджує статус захворювання. У багатьох перевірених папуг (різних видів) було виявлено позитивний борнавірус, але без клінічної та шкірної картини. Крім того, ПЛР-аналіз виявляє вірус без встановлення точного генотипу виявленого вірусу. Визначення антитіл та титру антитіл показує, що імунна система птиці реагує на вірус, що потрапив в організм. Хоча було висловлено гіпотезу, що високий титр антитіл передбачає інфекцію та спробу організму знищити вірус, клінічні дослідження показали, що позитивні папуги з дуже високим титром антитіл мають найвищий ризик розвитку PDD антитіло не було діагностовано PDD навіть через кілька місяців, протягом яких у птиці не було негативно).

У багатьох людей розвиваються PDD або нервові та травні симптоми. На цьому етапі діагноз можна поставити на основі аналізів крові (позитивна ПЛР на пташиний борнавірус або специфічні противірусні антитіла). Клінічний діагноз PDD важко встановити на основі симптомів, оскільки багато симптомів виникає при багатьох інших інфекційних, паразитарних або метаболічних захворюваннях. Діагноз PDD підтверджується на основі специфічних уражень органів травлення (особливо провентрикулярних), доповнених гістологічними дослідженнями на зразках, взятих із провентрикулусу, піпетки, нирок, головного та спинного мозку.

Ми провели дослідження, яке включало 54 пситацини таксономічно класифікованих видів у різних родах: 6 Amazona aestiva, Amazona ventralis, 7 Ara ararauna, 4 Ara macao, 12 Psittacus erithacus, 2 Cacatua galerita, Cacatua alba, 2 Cacatua sulphureus, один Pionis менструальний, 2 Pionites leucogaster, 11 Psittacula krameri, 5 Psittacula eupatria. Розподіл за статтю становив 31 чоловік та 23 жінки. Вік коливався від менш ніж 1 року до 17 років, будучи невідомим та важким для оцінки для 7 птахів. З загальної кількості птахів, включених у це дослідження, 9 було направлено на розтин, взяті біологічні проби після забою, тоді як 12 інших птахів були зібрані шляхом біопсії. У всіх птахів були клінічні ознаки PDD, прояви яких були зосереджені на шлунково-кишковому тракті (зниження маси тіла, діарея, неперетравлена їжа в калі або розширений провентрикулус), у деяких птахів також спостерігалися симптоми після ураження нервової системи (тремор, атаксія або судоми).

Діагноз був встановлений за допомогою ПЛР. Стандарт ПЛР, що містить SDC з цільовою послідовністю C, отримували клонуванням цільової послідовності у вектор, використовуючи набір для клонування подвійного промотору Topo TA, дотримуючись інструкцій виробника. Генетичний матеріал витягували за допомогою набору для міні-підготовки SNAP відповідно до інструкцій виробника. Концентрацію генетичного матеріалу визначали спектрофотометрією, використовуючи пристрій РНК/ДНК Gene Quant II, і РНК використовували як шаблон для аналізу ПЛР SDC-C для підтвердження присутності послідовності SDC C для C. jejuni. Стандарти були отримані з препаратів, що містять від 1,2 до 1,2 x 108 еквівалентів геному на 3 мкл стандартного генетичного матеріалу, які зберігали при -20 o C, розморожували та заморожували максимум три рази перед використанням. ПЛР-праймери та зразки (CJTP2) були розроблені за допомогою програмного забезпечення Primer Express для націлювання на конкретну область.

Для аналізу генетичного матеріалу, очищеного методом RT-PCR, його екстрагували реактивом для приготування зразків, згідно з інструкціями виробника. Кількість (1 мл) зразка, підготовленого і включеного в розчинник, центрифугували при 16000 х г протягом 10 хвилин для осідання біологічних частинок, а супернатант ретельно відсмоктували і видаляли. Зразки ще раз центрифугували при 16000 x g протягом 1 хвилини, всі залишки супернатанту видаляли і залишок ресуспендували в 200 мкл реагенту для приготування зразків шляхом сильної гомогенізації. Суспензії нагрівали, плаваючи на водяній бані протягом 10 хвилин; Зразки видаляли і давали охолонути до кімнатної температури протягом 2 хвилин, а потім знову центрифугували при 16000 х g протягом 2 хвилин. Кількість 50 мкл супернатанту додавали до 50 мкл розчинника для молекулярної біології, і розведений зразок генетичного матеріалу використовували як стандарт для аналізу RT-PCR...

Синдром PDD та неявний ABV були безпосередньо пов’язані із летальністю для 34 випадків. Виживання було зафіксовано, коли клінічні ознаки папуг зникли або навіть зникли, і вони вижили щонайменше місяць після подання в офіс. Скринінг стандартними методами для випадків розтину виявив, що всі заражені птахами, і позитивно позначив проведені тести, а саме: Ara ararauna, 2 Psittacus erithacus, Cacatua galerita, Amazona ventralis, Amazona aestiva, 4 Psittacula krameri.

Також спостерігалася рясна присутність ферментаційних мікроорганізмів у різних органах папуг, включених у дослідження. З загальної кількості птахів із складною патологією травлення дев’ять померли незабаром після прибуття в клініку через важкі симптоми. Наявні органи цих тварин відбирали для мікробіологічного дослідження та ПЛР-аналізу. У більшості випадків вірус був виявлений у більшості органів хворих птахів, включаючи мозок, печінку, нирки, серце та легені. Зразки калу, зібрані з усіх клінічних випадків, були позитивними лише у 24 птахів. Гомогенати із зібраних органів та біологічних зразків додавали в різні культури клітин птахів та ссавців. На 7, 10 та 14 день після зараження культури обстежували на предмет характерних змін. Експерименти на культурах клітин птахів і ссавців виявили напрочуд широкий спектр органів і типів клітин, в яких розвивається вірус, показуючи, що він не надає переваги клітинам центральної та периферичної нервової системи.

Мікроорганізми ферментації досліджували для всіх птахів з типовими клінічними ознаками PDD, включеними у дослідження, щоб порівняти та порівняно інтерпретувати можливості, за якими клінічний діагноз виявляє PDD, але результати ПЛР є негативними ABV, оскільки можлива еволюція захворювання внаслідок розвитку дріжджів. або інші ферментативні мікроорганізми, які можуть викликати подібне захворювання. Отримані результати дозволяють припустити, що існує колективний інфекційний фактор передачі, і передача може відбуватися через шлунково-кишковий тракт або дихальні шляхи.

Пташиний борнавірус підтверджено як основний етіологічний агент ПДД у папуг.
Заражені птахи, навіть якщо вони не мають клінічних ознак, становлять резервуар вірусу, забезпечуючи періодичну елімінацію вірусу через кал.
Аналіз біологічних зразків, відібраних у птахів, може виявити позитивні борнавіруси, які можуть розвинути клінічні ознаки (включаючи PDD) або можуть залишатися клінічно здоровими.
Інкубаційний період порівняно короткий - від 12-14 днів до 30 днів.
Діагностика PDD дозволяє встановити терапевтичний курс, заснований головним чином на протизапальних препаратах (нестероїдах), які в більшості випадків забезпечують миттєве припинення або уповільнення захворювання.
Прогноз завжди несприятливий.