Чому еритроцити слід видаляти перед зберіганням пуповинної крові
З початку розробки поля лабораторії, які переробляють пуповинну кров для зберігання, розпочали видалення плазми (виснаження плазми) та еритроцитів (виснаження еритроцитів) перед кріоконсервуванням концентрату, що містить стовбурові клітини.
Основною причиною плазмового кліренсу було зменшення обсягу кінцевої одиниці, щоб полегшити кріогенацію. Плазма містить білки, але не стовбурові клітини, тому вона не потрібна для терапії трансплантації.
Так само еритроцити не допомагають під час трансплантації, тому вони також не потрібні. Насправді, наявність еритроцитів під час трансплантації може бути небезпечним з кількох причин. По-перше, навіть коли пацієнт та донор мають "ідеальну" сумісність, відповідно мають однакову типологію HLA (людський лейкоцитарний антиген), вони можуть мати різні групи крові. У таких випадках, якщо еритроцити донора вводять пацієнту, вони можуть спричинити «побічні ефекти». Ці реакції можна мінімізувати шляхом зволоження пацієнта.
Найважливіша причина, чому еритроцити небезпечні для пацієнта, полягає в тому, що вони, як правило, не переживають процесу розморожування, щоб бути використаними. Під час кріоконсервації червоні клітини лізуються - клітинна мембрана розривається, вміст клітини, включаючи гемоглобін, переповнюється. Ці компоненти можуть погіршити стан пацієнтів, впливаючи на функцію нирок, з ускладненнями, які можуть призвести до летального результату.
З усіх перерахованих вище причин видалення еритроцитів з пуповинної крові перед кріоконсервацією стало стандартною практикою серед державних та приватних банків стовбурових клітин.
В даний час більшість автоматизованих систем обробки, що використовуються в лабораторіях банків стовбурових клітин у всьому світі, виконують виснаження (елімінацію) плазми та еритроцитів з хорошим відновленням стовбурових клітин та попередників, необхідних для трансплантації (ядерні клітини та CD34 +). Часткове виснаження еритроцитів спричинює значно меншу їх присутність в опрацьованих одиницях, ніж у свіжозібраній пуповинній крові (цільній), тому колір кінцевого продукту - рожевий або світло-червоний, а не темно-червоний, як колір крові під час збору.
Єдиним аргументом для того, щоб не виснажувати еритроцити перед зберіганням пуповинної крові, є те, що деякі клітини можуть бути втрачені під час центрифугування - етапу, необхідного для відокремлення різних компонентів крові. Однак більшість клітин є гранулоцитами, а не родоначальниками, і вони не потрібні для щеплення. З іншого боку, якщо еритроцити не видаляються з пуповинної крові перед зберіганням, їх потрібно видалити шляхом «промивання» після кріоконсервації та розморожування, навіть перед використанням. Цей етап промивання - ще одна можливість втратити клітини.
Пацієнтам набагато складніше використовувати одиниці пуповинної крові, у яких не видаляються еритроцити. Коли криогенна одиниця розморожується, еритроцити руйнуються. Медична література повідомляє про серйозні реакції у випадках, коли ці одиниці вводили без розведення або промивання. Сучасні рекомендації Національної програми донорського мозку НЕ дозволяють використовувати одиниці цільної крові, не промиваючи їх або, принаймні, розбавляючи.
Промивання одиниць цільної пуповинної крові після їх розморожування є технічним завданням. Вільний гемоглобін і клітинний сміття, що виділяються при розриві мембран еритроцитів, ускладнюють розрізнення ядерних клітин (включаючи стовбурові клітини), які хочуть зберегти лабораторні фахівці, та залишковий «супернатант», який необхідно видалити. Поділ різних типів клітин після розморожування є складнішим, оскільки є більші втрати клітин, ніж при обробці свіжозібраної пуповинної крові. До того ж, тести після відлиги на оцінці одиниць важко інтерпретувати.
На закінчення, через проблеми, спричинені обробкою цільної крові після кріоконсервації та розморожування, як у банках стовбурових клітин, так і в терапевтичних центрах - нинішні стандарти передбачають обробку для часткового виснаження еритроцитів та кліренсу плазми перед кріоконсервацією. Крім того, всі державні банки, ліцензовані FDA (Food and Drug Administration), переробляють пуповинну кров для видалення еритроцитів і плазми перед кріоконсервуванням концентрату стовбурових клітин.
- Barker JN, Byam C, Scaradavou A. Як я лікую: відбір та придбання неспоріднених трансплантатів пуповинної крові. Кров 2011; 117: 2332-2339
- Barker JN, Scaradavou A. Суперечка про одиниці пуповинної крові, заповнених еритроцитами. Кров 2011; 118: 480 [Лист до крові; Відповідь]
- Рекомендації NMDP щодо підготовки одиниць пуповинної крові, наповнених еритроцитами, для інфузії, протокол NMDP IND 10-CBA, версія 7.0
