Електрофорез білків, електрофорез шляхом імунофіксації - зрозуміти тест; Ваші результати

Білки є важливими будівельними елементами всіх клітин і тканин. Вони утворюють структурну частину більшості органів і складають ферменти та гормони, що регулюють різні функції в організмі. Рідини в організмі містять багато різних білків, які виконують найрізноманітніші функції, такі як транспортування поживних речовин, виведення токсинів, регулювання обмінних процесів та захист від загарбників. Електрофорез білків - метод розділення цих білків на основі їх розміру та електричного заряду.

Коли білки в рідинах тіла розділяються електрофорезом, вони утворюють характерний малюнок смуг різної ширини та інтенсивності, що відображає суміш присутніх білків. Цей мотив розділений на п’ять фракцій, які називаються альбуміном, альфа 1, альфа 2, бета та гаммою. У деяких випадках бета-фракцію поділяють на бета-1 і бета-2.

Альбумін, який виробляється в печінці, становить близько 60% білка в крові. «Глобуліни» - це збірний термін, який використовується для позначення білків, відмінних від альбуміну. За винятком імуноглобулінів та деяких білків комплементу, більшість глобулінів також виробляються в печінці.

Електрофорез імунофіксації (ЕІФ) - метод, який використовується для виявлення аномальних смуг, виявлених при електрофорезі білків сироватки, сечі або ліквору (ЦСЖ), для визначення типу антитіл (імуноглобулінів).

Основні білки плазми та їх функції перелічені відповідно до їх електрофоретичної групи (видимої смуги, до якої вони належать) у таблиці нижче під назвою "Білкові групи".

Електрофорез білка зазвичай проводять на зразках сироватки (рідка частина крові) та сечі. Зразок крові отримують шляхом введення голки у вену на руці. Зразки сечі можна відбирати вчасно і випадковим чином (у будь-який несподіваний час) або збирати протягом 24 годин. Спинномозкова рідина (ЦСЖ) збирається через люмбальну пункцію (введення голки в хребет для збору ліквору).

Для цих тестів не потрібна підготовка.

Електрофорез білків використовується для виявлення присутності аномальних білків, виявлення відсутності нормальних білків та визначення того, чи присутні певні групи білків в аномально високих або низьких кількостях у крові або інших рідинах організму.

Білки виконують в організмі кілька дій, включаючи транспортування поживних речовин, виведення токсинів, регулювання обмінних процесів та захист від загарбників.

Електрофорез білків розділяє білки залежно від їх розміру та електричного заряду. Це формує характерний малюнок смуг різної ширини та інтенсивності в штучному середовищі та відображає суміш білків, що містяться в досліджуваній рідині організму. Мотив розділений на п’ять фракцій, які називаються альбуміном, альфа 1, альфа 2, бета та гамма. У деяких випадках бета-фракцію поділяють на бета-1 і бета-2.

Електрофорез імунофіксації (EIF) може бути використаний, якщо необхідно, для більш точного виявлення аномальних смуг та визначення типу антитіл (імуноглобулінів).

Зміни в звичному вигляді шаблонів можуть допомогти діагностувати стан. Наявність відхилень у електрофоретичному зразку білка рідко має остаточне діагностичне значення. Швидше, це дає підказку. Потім, на основі цього підказки, зазвичай роблять подальші тести, щоб спробувати визначити природу основного захворювання.

Подальші тести можуть включати, наприклад, альбумін, імуноелектрофорез, легкі ланцюги, що не містять сироватки, кількісні імуноглобуліни, альфа-1 антитрипсин або кріоглобуліни.

Електрофорез білка може бути призначений для моніторингу ненормальних результатів в інших лабораторних тестах або для первинної оцінки симптомів людини. Після діагностування захворювання або стану через регулярні проміжки часу можна призначати електрофорез, щоб контролювати хід захворювання та ефективність лікування. Нижче наведено кілька прикладів обставин, коли може вимагатися електрофорез.

Електрофорез у сироватці крові може бути замовлений:

Для моніторингу ненормальних результатів інших лабораторних досліджень, таких як загальний білок та/або альбумін у крові, білок у сечі (збільшення), вміст кальцію в сироватці крові (збільшення) або (низький) вміст білих кров'яних клітин та еритроцитів
Коли симптоми свідчать про запальний стан, аутоімунне захворювання, гостру або хронічну інфекцію, розлад нирок або печінки або стан, що призводить до втрати білка
Коли медичний працівник оцінює різні симптоми, що свідчать про множинну мієлому, такі як біль у кістках, анемія, втома, незрозумілі переломи або рецидивуючі інфекції, щоб виявити наявність характерної смуги (моноклональний імуноглобулін) у бета-або гамма-області; якщо спостерігається чітка смуга, її ідентичність як моноклонального імуноглобуліну зазвичай підтверджується електрофорезом шляхом імунофіксації.
Для моніторингу лікування множинної мієломи, щоб побачити, чи зменшується моноклональна смуга або повністю зникає під час лікування

Може бути запропонований електрофорез білка в сечі:

Коли білка в сечі більше норми, слід визначити джерело цього ненормального збільшення; за його допомогою можна визначити, чи витікають білки з плазми крові (що свідчить про порушення функції нирок), чи аномальні білки походять з іншого джерела (наприклад, рак плазматичних клітин, наприклад, множинна мієлома).
При підозрі на множинну мієлому визначити, чи просочуються в сечу моноклональні імуноглобуліни або фрагменти моноклонального імуноглобуліну; якщо спостерігається гостра смуга, що нагадує моноклональний білок, його ідентичність зазвичай підтверджується електрофорезом шляхом імунофіксації.

Електрофорез білків у LCF може вимагатись:

Шукати характерні смуги розсіяного склерозу; наявність декількох різних смуг у лікворі (не присутній у сироватці крові) позначається як "олігоклональні смуги". Більшість людей з розсіяним склерозом, як і інші запальні захворювання мозку, мають такі олігоклональні смуги.
Для оцінки людей з головними болями або іншими неврологічними симптомами щодо певних білків, що свідчать про запалення або інфекцію

Електрофорез шляхом імунофіксації може вимагатись:

Коли аномальна смуга, що передбачає моноклональний імуноглобулін, спостерігається в електрофоретичному режимі сироватки або сечі

Електрофорез білків надає медичному працівнику приблизну оцінку кількості кожної білкової фракції та вказує на наявність будь-яких аномальних білків. Інтерес електрофорезу шляхом імунофіксації полягає в ідентифікації певного типу імуноглобуліну. Лабораторний звіт може містити інтерпретацію результатів.

Електрофорез у сироватці крові

Певні стани або захворювання можуть бути пов'язані зі зменшенням або збільшенням різних білків сироватки, як показано нижче.

Електрофорез сечі

Зазвичай сеча містить дуже мало білка. Як правило, значна кількість білка демонструє одну з трьох основних закономірностей.

Як правило, клубочки блокують потрапляння білка в сечу. Коли клубочки пошкоджені, альбумін та інші білки плазми можуть витікати і виявлятися в сечі.
Як правило, дуже маленькі білки можуть проходити через клубочки, але вони захоплюються канальцями і не залишаються в сечі. Коли канальці пошкоджені, ці білки з’являться в сечі.
Деякі інші дрібні білки зазвичай не містяться у значній кількості в сироватці крові, наприклад, вільні легкі ланцюги, міоглобін та гемоглобін. Присутні в сироватці, вони можуть проходити через клубочки і з’являтися в сечі.

Електрофорез ліквору

Наявність множинних смуг в гамма-області (олігоклональних смуг), яких немає в сироватці крові, свідчить про розсіяний склероз.
Наявність поліклональних імуноглобулінів (антитіл, що виробляються та секретуються багатьма плазматичними клітинами) більше, ніж зазвичай, свідчить про інфекцію.

Електрофорез шляхом імунофіксації

Ідентифікує тип білків імуноглобуліну, присутніх у моноклональних смугах електрофоретичного малюнка білків; Зазвичай імунофіксація визначає наявність важкого ланцюга (IgG, IgM або IgA) та легкого ланцюга (каппа або лямбда) (для отримання додаткової інформації щодо цієї теми див. "Часті запитання № 3").

Вакцини, введені за попередні шість місяців, можуть збільшити імуноглобуліни, як і деякі ліки, наприклад, фенітоїн (дилантин), прокаїнамід, оральні контрацептиви, метадон та терапевтичні гамма-глобуліни.

ASA, бікарбонати, хлорпромазин (торазин), кортикостероїди та неоміцин можуть впливати на результати білкового електрофорезу.

Так, його можна використовувати будь-коли, коли ви хочете розділити молекули. Наприклад, електрофорез ДНК використовується для вивчення генетичного складу рослин, тварин та людей.

Не обов'язково. Виробництво моноклональних білків найчастіше зумовлене моноклональною гаммопатією невизначеного значення (GMSI). У більшості людей з ІМГТ спостерігаються легкі захворювання, але їх слід продовжувати регулярно контролювати за допомогою електрофорезу білка в сироватці крові, або іноді за допомогою вільного тестування легких ланцюгів, залежно від виробленого моноклонального білка. Деякі з цих людей можуть перейти до розсіяної мієломи через кілька років.

Імуноглобуліни - це молекули, що складаються з чотирьох білкових ланцюгів: двох однакових легких ланцюгів, або легких ланцюгів каппа, або лямбда, і двох однакових важких ланцюгів, яких існує кілька типів. Ці білки виробляються плазматичними клітинами в кістковому мозку. Певна плазматична клітина виробляє лише один тип імуноглобуліну. Він використовує білкові ланцюги як будівельні блоки для збирання імуноглобулінів, які є антитілами, спрямованими на різні конкретні загрози для організму. Ланцюги, які використовуються для утворення імуноглобулінів, називаються "пов'язаними з імуноглобулінами". Зазвичай спостерігається невеликий надлишок продукованих ланцюгів каппа та лямбда. Низький рівень цих "вільних" легких ланцюгів можна виявити в крові та сечі за допомогою тесту "вільний легкий ланцюг", який дозволяє оцінити взаємозв'язок між вільними легкими ланцюгами каппа та лямбда. Для отримання додаткової інформації з цього питання, будь ласка, дивіться статтю "Легкі ланцюги без сироватки".

Це легкий ланцюг вільного імуноглобуліну, що міститься в сечі.

Термін "Тамм-Горсфелл" відноситься до глікопротеїну, який зазвичай присутній у сечі. Його частіше називають «уромодуліном». Він виробляється нирками і є найбільш поширеним білком у нормальній сечі.