Парвалбумін при кожній його швидкості; Https - Новини про алергію

Понеділок, 12 липня 2010 р. Доктор Ален Тіллей 3932 візити

Вважається, що 95% людей з алергією на рибу реагують на парвальбумін. Однак клінічна чутливість відрізняється від риби до риби. Люксембурзькі автори цього дослідження намагалися виміряти рівень парвальбуміну у найбільш часто споживаної риби. Висновки ведуть до обговорення кількісного аспекту, якісного аспекту тощо.

aЛабораторія імуногенетики та алергології, CRP-Santé, і
bУніверситет імунології та алергології, Центр лікарні Люксембургу, Люксембург

в Int Arch Allergy Immunol 2010; 153: 359-366 (DOI: 10.1159/000316346)

Контекст:

Незважаючи на те, що 95% пацієнтів з алергією на рибу мають сенсибілізацію до парвальбуміну, головного рибного алергену, клінічні реакції у різних видів риб різняться за симптомами, інтенсивністю та частотою.

Мета:

Це дослідження мало на меті кількісно визначити рівні парвальбуміну в лососі (Salmo salar), форелі (Salvelinus fontinalis), трісці (Gadus morhua), коропі (Cyprinus carpio), скумбрії (Scomber scombrus), оселедці (Clupea harengus)), окуні (Sebastes) marinus) та тунця (Thunnus albacares).

Методи:

Кожен зразок тканини, необроблений, приготований або оброблений, пройшов екстракцію білка.
Екстракти м’язів риби відокремлювали SDS-PAGE, а вміст парвальбуміну оцінювали кількісно визначаючи денситометричні смуги.
Окремі антисироватки отримували імунізацією мишей BALB/c проти очищеного парвалбуміну, отриманого із семи видів риб.
Вміст парвальбуміну визначали кількісно в рибі, свіжій або обробленій (маринованій, копченій, соленій або консервованій) та у розчинах для шкірних тестів (SPT) методом ІФА із застосуванням відповідної антисироватки для виявлення та парвалбуміну, очищеного як стандарт.
Рішення для прик-тесту надійшли від ALK, Мадрид, Іспанія, Allerbio, Varennes en Argonne France, Allergopharma, Reinbek Germany, HAL Harlem Holland, Stallergènes Antony France.

Результати:

SDS-PAGE вимірював вміст парвальбуміну в м’язах, який становив менше 0,5 мг на грам тканини скумбрії, 0,5–2 мг для лосося та форелі та більше 2 мг для тріски, коропа, окуня та оселедця.
За допомогою ІФА вміст парвальбуміну варіювався від менш ніж 0,05 мг для тунця, від 0,3 до 0,7 мг для скумбрії, від 1 до 2,5 мг для лосося, форелі та тріски та більше 2,5 мг на грам сирих м’язів для коропа, оселедця та червоної риби.
Вміст парвальбуміну в оброблених зразках (варених/комерційних) був на 20-60% нижчим.
Вміст алергену у зразках розчинів для SPT коливався від 20 до 70 мкг/мл парвальбуміну.
Криві, проведені в ІФА з видоспецифічними антипарвальбуміновими сироватками, чітко продемонстрували різницю в чутливості антитіл.
У 14 зразках розчину для випробування шкіри концентрація білка становила від 320 до 2270 мкг/мл та від 20 до 70 мкг/мл для парвальбуміну.
У розчині для тунця SPT не було виявлено парвальбуміну.

Висновок:

Вміст парвальбуміну у найбільш часто вживаних видів риб значно варіюється.
Різниця варіюється від декількох разів до ста разів більше.
Це слід враховувати під час проведення дієтичних випробувань та консультування пацієнтів з алергією на рибу.

Парвальбуміни - це білки з низькою молекулярною масою близько 12 кДа.

Найвідомішим є тріска, яка була першим молекулярним алергеном, що характеризується, це Gad c 1.

Існує два типи парвальбуміну - альфа та бета-парвальбумін.

Для альфа гомологія з Cyp c 1 (бета-парвальбумін коропа) становить 50-60%, для бета-парвалбуміну ідентичність між ними не дуже сильна і коливається від 60 до 90%.

В даний час бета-парвальбумін вважається основним алергеном у рибі.

Зверніть увагу, що парвалбумін не є однорідним, ні між рибами, ні в межах однієї і тієї ж риби.

Таким чином, вміст парвальбуміну порівняно низький у червоних м’язах порівняно з білими м’язами.

Парвальбумін також міститься в інших органах в менших кількостях, таких як ЦНС, нирки та залози.

Таким чином, це дослідження демонструє всю зацікавленість у своїй меті дізнатися рівень парвальбуміну у найбільш часто вживаної риби.

Вміст парвальбуміну в м’язах вимірюють за допомогою SDS-PAGE, пов’язаного з кількісним визначенням денситометричних смуг у мг на грам, та ІФА знову в мг на грам.

Однак цей метод ІФА дозволяє виявляти парвалбумін із більшою чутливістю та більшою точністю у зразках, що особливо корисно для кількісного визначення розчинів для шкірних тестів, де він становить близько мкг/мл.

Загалом, у свіжій рибі рівень парвальбуміну значно знижується в такому порядку: оселедець> короп> краснопірка> лосось/форель> тріска> скумбрія> тунець.

Таким чином, ці результати добре узгоджуються з попереднім дослідженням 2005 року, в якому скумбрія та тунець були найменш алергенними.

Таким чином, вміст парвальбуміну помітно різниться серед риб, які найчастіше споживаються.

Ця різниця у вмісті та епітопних відмінностях специфічного IgE парвальбуміну, безсумнівно, сприяє мінливості клінічної реактивності залежно від сортів риб.

Всі ці кількісні та якісні елементи повинні бути враховані при інтерпретації провокаційних тестів та рекомендаціях пацієнтам з алергією на рибу.

Нарешті, вміст парвальбуміну різний у різних комерційних екстрактах риби, що спонукає нас до власних тестів.