Системний коронавіроз у тхорів (Mustela putorius) користь гістологічного аналізу та
C. Лапрі
лабораторія Vet-Histo, 11 біс, бульвар Міремонт, 13008 Марсель, Франція
Дж. Дюбой
лабораторія Vet-Histo, 11 біс, бульвар Міремонт, 13008 Марсель, Франція
Дж. Мартінес
b Histologia I Anatomia Patologica, Facultat de Veterinaria, Universitat Autonoma de Barcelona, Беллатерра, 08193 Барселона, Іспанія
резюме
Контекст
Описаний новий коронавіроз у тхорів, особливо в Іспанії та США, індукований коронавірусом 1-ї групи, близьким до коронавірусу, відповідального за ензоотичний катаральний ентерит, і викликає гістологічні ураження, подібні до інфекційних перитонітів котів (FIP) у котів. видів.
Мета
Продемонструйте вірусне походження важких піогранулематозних уражень у лімфоїдних або вісцеральних тканинах трьох тхорів.
Методи
Гістологічний та імуногістохімічний аналіз уражень, отриманих у лабораторії після розтинів або дослідницьких лапаротомій, проведених ветеринарами.
Результати
Гістологічний аналіз виявляє багатоцентрове піогранулематозне запалення, переважно вражаючи черевні лімфатичні вузли та різні органи черевної порожнини. Імуногістохімічний аналіз дозволяє продемонструвати вірусні антигени коронавірусу у внутрішньомакрофагічному положенні в межах гангліозних піогранулематозних уражень.
Висновок
Ці три випадки мультицентричного піогранулематозного запалення зумовлені коронавірозом, який має багато точок схожості з FIP.
Анотація
Передумови
Хвороба, що нагадує котячий інфекційний перитоніт (FIP), нещодавно була визнана у тхорів, переважно в США та Іспанії. Ця хвороба зумовлена коронавірусом 1-ї групи, тісно пов’язаним з кишково-кишковим коронавірусом.
Об’єктивна
Продемонструвати вірусне походження важких піогранулематозних лімфоїдних та вісцеральних уражень у трьох тхорів.
Методи
Гістопатологія та імуногістохімія уражень, отриманих у нашій лабораторії.
Результати
Сильне піогранулематозне запалення спостерігалося в черевних лімфатичних вузлах та в різних органах. Позитивне мічення антигену коронавірусу було продемонстровано в макрофагах у піогранулематозних ураженнях за допомогою імуногістохімії.
Висновок
Три випадки важкого розповсюдженого піогранулематозного запалення були спричинені коронавірусом, що спричинило системний коронавіроз у тхора з високою схожістю з FIP.
Вступ
Коронавіруси - це одноланцюгові РНК-огинаючі віруси позитивної полярності. Під час електронної мікроскопії вірусні частинки мають поверхневі випинання, надаючи їм вигляд «коронки» (корона, латинською мовою), що було використано для назви цих вірусів [1]. Класифікація як коронавірус є результатом тестів на серологічні реакції та аналізу послідовності геномів. Родина Coronaviridae поділяється на три групи. Група 1 (коровавірус собак [CCV], кишково-кишковий коронавірус [FeCoV] та котячий інфекційний перитоніт [FIPV], вірус трансмісивного гастроентериту свиней та свинячий респіраторний вірус) і група 2 (що містять, серед інших, коронячий вірус великої рогатої худоби, вірус мишачого гепатиту, вірус сіалодакриоаденіту щурів). ) включають віруси, що вражають ссавців.
Група 3 складається з вірусів, які, як відомо, є виключно пташиними (вірус пташиного інфекційного бронхіту, коронавірус індички) [2] .
Коронавірус, який викликає епідемію важкого гострого респіраторного синдрому (ГРВІ) у людини, передається людям, ймовірно, під циветою в масці (Paguma larvata), належить до нової групи [3], [4] .
У домашніх хижих тварин коронавіруси можуть призвести або до пауцисимптомних захворювань органів травлення, або до розвитку системних захворювань, які завжди мають смертельний результат у котів. Цей системний варіант називається PIF у котячих видів і розвивається через мутацію вірусу FECV до FIPV, що виникає випадковим чином через помилки реплікації вірусу в ентероциті [5]. Нещодавно у собак були описані важкі ураження вісцеральних органів, пов'язані з мутантами CCV та смертельним ентеритом через CCV [6], [7].
У тхорів описані дві хвороби, спричинені коронавірусами: ГРВІ та катаральний епізоотичний ентерит [2]. ГРВІ передавались тхорам експериментально, і на сьогоднішній день ми не знаємо про природні інфекції. Вірус, що міститься в дихальних, сечових та шлунково-кишкових шляхах, спричиняє серйозне ураження легенів. Катаральний епізоотичний ентерит спричинений кишковим коронавірусом. Симптоми відповідають неспецифічним ознакам травлення, таким як діарея. Ураження травні, а вірус виділяється із слини, стільця та ентероцитів, але не з лімфоїдної системи. Нещодавно у тхорів повідомлялося про стан, подібний до розвитку FIP [8] .
Ця стаття повідомляє про цей системний коронавіроз у трьох тхорів.
Опис справ
Трьом тхорам вік від десяти до 13 місяців. Вони мають подібні у всьому світі симптоми, що розвиваються протягом декількох місяців, з втратою ваги, депресією, іноді хронічною діареєю. У двох випадках спостерігається лихоманка. У черевної порожнини у всіх цих тхорів відчутна маса, що у двох випадках викликало лапаротомію після ультразвукового дослідження, щоб взяти гістологічні зразки. Ці два тхори були евтаназовані під час лапаротомії першого, через чотири місяці через погіршення стану та відсутність реакції на симптоматичне лікування другого. Третій тхір був евтаназований без дослідницької лапаротомії та розкритий.
Двоє тхорів жили разом з іншими, у яких ще не було ознак хвороби, а один з тхорів жив із здоровою кішкою. Ці тхори були придбані в зоомагазині, їм було кілька місяців. Два тхори були з однакової породи.
Жодного аналізу крові та аналізів на Алеутську хворобу не проводили.
Гістологічні зразки зчитуються двома патологоанатомами лабораторії після звичайної технічної обробки.
Результати
При розтині брижові вузли збільшені, до 4 см в діаметрі, і пунктировані білими вузликами діаметром від декількох міліметрів до 2 см, також помітними в печінці, селезінці, нирках, брижовій жировій тканині (рис. 1 ).
Піогранулематозний перитоніт (серозна кишка) та мезентеріальний піогранулематозний лімфаденіт.
Гістологічний аналіз виявляє у всіх трьох випадках запалення піогранулематозного характеру, змішуючи нейтрофіли та макрофаги, розташовані в гангліях (рис. 2) та брижі (випадки 1 та 2), кишечнику, підшлунковій залозі, нирках та селезінці ( випадок 3). Цей запальний інфільтрат іноді утворює сформовані піогранулеми, які відповідають невеликим колекціям нейтрофілів, оточених макрофагами (рис. 3).
Лімфовузол переробляється шляхом злиття піогранульоми. Пляма гемалун-еозин, низьке збільшення (× 100).
Утворена піогранульома, колекція нейтрофілів у центрі та коронці макрофагів. Пляма гемалун-еозин, велике збільшення (× 400).
Жодних судинних уражень, подібних до васкуліту, не спостерігається, але піогранульоми іноді тісно прикріплюються до судинних відділів.
Додаткові плями, спрямовані на виділення показаних патогенних елементів, залишались негативними, зокрема PAS, що дозволяє ідентифікувати мікотичні елементи, та модифікована пляма Зіля Fite Faraco, спрямована на демонстрацію присутності можливих мікобактерій.
Імуногістохімічний аналіз, проведений на наших трьох випадках у службі патологічної анатомії Автономного університету Барселони, використовує моноклональне антитіло FCV3-70 (Custom Monoclonal Internationals, Західний Сакраменто, Каліфорнія, США) згідно з імуногістохімічною методикою. [9], включаючи негативний та позитивний контроль. Ця методика дозволяє продемонструвати внутрішньомакрофагічне фарбування, яке відповідає парі система антитіло - фарбування, що розпізнає присутність вірусних антигенів коронавірусу в макрофагах (рис. 4).
Імуногістохімія: макрофагове цитоплазматичне фарбування вірусного антигену (коронавірусу). Велике збільшення (× 200).
Обговорення
У літературі описуються випадки системного коронавірусу у тхорів у США та Іспанії [2], [8], [10]. Наскільки нам відомо, це перші випадки, про які повідомлялося у Франції.
Системні захворювання, спричинені мутантами коронавірусу, тісно пов’язаними з кишковим коронавірусом господаря, були описані у котів з ФІП та нещодавно у собак [6], [7]. Вісцеральні коронавіруси, спричинені мутованими коронавірусами, не обов’язково пов’язаними з кишковим коронавірусом, також були зареєстровані в інших видів, таких як миші, свині та люди (початок ГРВІ). Тому не дивно, що тхори, схильні до кишкових коронавірусів, також піддаються мутаціям цього типу вірусу, що призводить до появи високопатогенного мутанта, що спричиняє системні пошкодження. Тхори з епізоотичним катаральним ентеритом молоді, і, ймовірно, як це трапляється у котів, забруднення фекалій постійною інфекцією у осіб, що переносять вірус, сприяє появі системної форми коронавірусу [2]. .
У котів появі FIP може сприяти спільнота, яка забезпечує русло для інтенсивної циркуляції кишкових коронавірусів і, таким чином, збільшує ризик мутації форми FIPV. Той факт, що два тхори в дослідженні походили з одного племінного вирощування, перш ніж були придбані різними зоомагазинами, а потім власниками, також може припустити роль спільноти, яка сприяє можливій мутації кишкового коронавірусу до його високопатогенної форми.
Багато паралелей можна провести між FIP та системним коронавірозом у тхорів: молодий вік початку захворювання, який, згідно з літературою, становить 11 місяців, як у цій серії випадків, хронічний, виснажливий перебіг, що призводить до дуже рідкісних винятків, до природною смертю або евтаназією через дуже погіршений загальний стан та невдачу симптоматичного лікування.
Як і у випадку з FIP, клінічні ознаки неспецифічні: симптоми зазвичай прогресують протягом двох місяців і включають втрату ваги, відчутну внутрішньочеревну масу (що відповідає брижовому лімфатичному вузлу), млявість, анорексію і рідше блювоту, сплено- або нефромгалію, виділення з носа, периферична аденомегалія або зелена зеля. Нервові ознаки були зареєстровані у двох випадках і відповідають парезу задніх кінцівок або атаксії. Лихоманка реєструється приблизно в третині випадків. Перебіг у більшості випадків смертельний [2]. У цих трьох випадках виявляються симптоми, які в основному ідентичні вже описаним, головним чином втрата ваги, зниження загального стану та відчутна маса живота.
У цьому дослідженні гематологічний аналіз не проводився. Тенденції, що спостерігаються в інших повідомленнях про випадки, підкреслюють неспецифічні гематологічні та біохімічні зміни, пов’язані із стійким запаленням, з лейкоцитозом, анемією та тромбоцитопенією, які можуть бути подібними до тих, що спостерігаються у FIP. Лейкоцитоз може бути вторинним у порівнянні з підвищеним набором лейкоцитів у місцях ураження з компенсаторною гіперпродукцією. Анемія може бути зумовлена хронічним характером захворювання (нерегенеративна анемія) або можливим порушенням всмоктування вітаміну В12 через запалення кишечника (тоді регенеративна анемія). Тромбоцитопенія може бути викликана надмірним вживанням тромбоцитів, пов’язаних з ДВЗ-інфекцією, пов’язаною з васкулітом. Найбільш поширеною патологією була гіперпротеїнемія, яка приписується гіперглобулінемії (поліклональна гаммопатія), що також нагадує FIP. Інші описані випадки показали при виконанні негативні тести на Алеутську хворобу [2] .
Макро- та мікроскопічні ураження, очевидно, є найбільш вражаючою точкою схожості між цими двома системними коронавірусами, а також послужили закликом до пошуку коронавірусу в генезі цих уражень у тхорів [8]. .
Білуваті вузлики, що спостерігаються макроскопічно, нагадують про «суху форму» ПІФ і гістологічно реагують на піогранульоми різних розмірів, іноді некротичні та зі змінним вмістом нейтрофілів. Такі піогранулематозні ураження також можуть бути наслідком мікобактеріозу або нокардіозу, і випадки, включені в це дослідження, показали негативні ураження модифікованої плями Ціля (Fite Faraco), що дозволяє ідентифікувати ці бактерії.
При системному коронавірозі тхора також описані ураження васкуліту. У цьому дослідженні ці судинні ураження не можна було ідентифікувати; що може бути пов’язано із пізньою діагностикою в органах, сильно перероблених цим піогранулематозним запаленням, яке може приховати первинні ураження судин, як це спостерігалося в деяких дослідженнях [10] .
При ФІП основним ураженням є васкуліт, спричинений дією інфікованих та активованих моноцитів крові, які пошкоджують судинні стінки. Ця активація індукує підвищену здатність адгезії до клітин ендотелію та інших моноцитів через цитокіни. Секреція моноцитами ферменту, металопротеїнази В, також бере участь у пошкодженні судин, ініціюючи деградацію колагену IV, складаючи судинний базальний шар [11]. Потім це судинне пошкодження призводить до утворення ангіоцентричних гранульом або піогранульом або розташованих на периферії пошкоджених судинних відділів. При системному коронавірозі тхора імуногістохімічний аналіз показує результати, подібні до тих, що спостерігалися під час ФІП з міченням вірусних антигенів у клітинах макрофагів [2], [8], [10], тому можливо, що механізм появи уражень подібний до такого описані у котів.
Попередні дослідження довели методом ПЛР-набору, що задіяний вірус не є котячим коронавірусом. Однак поява цієї хвороби у тхорів свідчить про мутацію коронавірусу, що спричиняє епізоотичний катаральний ентерит, як це має місце у котів з мутацією кишкового коронавірусу, що викликає FIP; мутований вірус, що набуває тропізму для макрофагів і здатність до реплікації в макрофагах або моноцитах [2] .
Висновок
Ця стаття підкреслює важливість гістології для діагностики цього стану. Як і у випадку з PIF, гістологія залишається наріжним каменем діагностики цього вірусу, і серологічне виявлення антитіл може бути важко інтерпретувати, як це відбувається у котів, видів, у яких він не дозволяє диференціювати антитіла. Спрямований проти кишкового коронавірусу ті, що спрямовані проти його варіанту FIPV [12] .
Також цікаво виявити нові коронавіруси тварин, які в певних випадках можуть становити зоонозний ризик, як під час епідемії ГРВІ у 2002 та 2003 рр., Спричиненої передачею циветти людям від мутованого варіанту коронавірусу, природний водосховище - це кажани [13], [14] .
Конфлікт інтересів
Дякую
Автори хотіли б подякувати докторам Байолю та Романі з ветеринарної клініки Гранд Літтораль у Марселі (13016) та докторам Спільмонту та Моле з ветеринарної клініки в Карну (13470) за довіру, яку вони нам надали у розслідуванні цих випадків. а також пані Фаб'єн Клемен за її технічну допомогу.