Тема. Визначення певних біохімічних показників у нащадків щурів, що харчуються в їдальні кафетерію, збагаченою 5% оливковою олією
Народно-Демократична Республіка Алжир Міністерство вищої освіти та наукових досліджень Абу Бекр Белкаїд Університет Тлемцен Факультет природокористування та наук про Землю та Всесвіт Відділ біології Лабораторія фізіології, фізіопатології та біохімії харчування Дисертація з метою отримання ступеня магістра в біології Варіант: "Клітинна патофізіологія" Тема Визначення певних біохімічних показників у нащадків щурів, які отримують дієту в кафетерії, збагачену 5% оливковою олією Представлено: Mlle DABO IGOZO Maryline Sirena Astrid журі у складі: Президент: Мадам МЕРЗУК Хафіда, професор, У. Тлемсен Експерт: Мадам БУАНАНЕ Саміра Лектор, У. Тлемсен Експерт: Мадам ЛУКІДІ Б Лектор, У. Тлемсен Промоутер: Мадам БАБА АХМЕД Фатіма Зора Лектор, У. Тлемцен Навчальний рік: 20 12 2013

СПИСОК СКОРОЧЕНЬ AG: Жирні кислоти AGL: Вільні жирні кислоти ATGL: Жирна тригліцеридна ліпаза або десутрин КТ: Загальний холестерин ЛПВЩ: Ліпопротеїни високої щільності (Ліпопротеїни високої щільності) IDL: Ліпопротеїни проміжної щільності (Індекс посередницької щільності BMI: BMI Лецитин-холестерин-ацилтрансфераза ЛПНЩ: Ліпопротеїни низької щільності LHS: Гормоночутлива ліпаза LPL: Ліпопротеїн-ліпаза MG: Жир нм: Нанометр PT: Загальний білок TA: Жирова тканина TG: Тригліцериди TT: Розмір туру
Список малюнків Частина 1: Поточний стан з цього приводу Рисунок n 1: Загальна структура ліпопротеїну. 8 Рисунок n 2: Регуляція ліпідного обміну при AT. 9 Рисунок 3: Шлях мобілізації триацилгліцерину в адипоцитах. 10 Рисунок 4: Модифікація вуглеводно-ліпідного обміну у вагітних із нормальною вагою. 12 Рисунок 5: Вплив ожиріння та споживання дієти з високим вмістом жиру вагітними жінками на потомство. 13 Рисунок 6: Характеристика середземноморської дієти. 17 Рисунок 7: Метаболізм основних ПНЖК. 20 Частина 2: Експериментальна частина (результати та інтерпретація) Рисунок n 1: Вага тіла контрольних та експериментальних щурів (потомства). 34 Рисунок 2: Біохімічні показники у контрольних та експериментальних щурів (нащадків). 36 Рисунок 3: Активність LCAT (нмоль/мл/год), ліпопротеїнової ліпази LPL (нмоль/хв/г жирової тканини) та гормоночутливої ліпази LHS (нмоль/хв/г жирової тканини) у контрольних та експериментальних щурів (потомство на D30). 38
Список таблиць Частина 1: Поточний стан з цього питання Таблиця n 1: Класифікація дорослих за ІМТ. 4 Таблиця 2: Різні типи оливкової олії первинної та рафінованої та їх кислотна кількість. 14 Таблиця n 3: Основні компоненти немиленої речовини. 16 Таблиця 4: П’ять генів ожиріння у гризунів. 23 Додаток Таблиця А1: Вага тіла контрольних та експериментальних щурів (потомства). 52 Таблиця А2: Біохімічні показники у контрольних та експериментальних щурів (потомства). 52 Таблиця A3: Активність LCAT (нмоль/мл/год) у контрольних та експериментальних щурів (потомство) на D 30. 53 Таблиця A4: Активність ліпопротеїнової ліпази LPL (нмоль/хв/г жирової тканини) у контрольних та дослідних щурів (потомство). Таблиця A5: Активність гормоночутливої LHS-ліпази (нмоль/хв/г жирової тканини) у контрольних та експериментальних щурів (потомство). 53
Короткий вступ. 0 СУЧАСНИЙ СТАТУС ТЕМИ. 3 1. Ожиріння. 4 1.1. Класифікація ожиріння. 4 1.2. Поширеність ожиріння. 5 1.2.1. В світі . 5 1.2.2. В Африці. 6 1.2.3. В Алжирі. 6 1.3. Патофізіологія. 6 1.3.1. Ліпідний обмін. 6 1.3.2. Причина патології. 10 1.4. Ожиріння матері та його вплив на дітей. 11 1.4.1. Модифікація вуглеводно-ліпідного обміну під час вагітності та порушення функцій у разі надмірної ваги та ожиріння. 11 1.4.2. Ожиріння у вагітних. 12 1.4.3. Наслідки у дітей. 12 2. Оливкова олія. 14 2.1. Загальні. 14 2.2. Різні види оливкової олії. 14 2.3. Склад оливкової олії. 15 2.4. Оливкова олія і середземноморська дієта. 16 2.5. Оливкова олія в Алжирі. 17 2.6. Вплив оливкової олії. 18 2.6.1. Про здоров’я загалом. 18 2.6.2. Вплив на ожиріння. 18 2.6.2.1. Жирні кислоти. 3. Моделі на тваринах, що використовуються в дослідженнях ожиріння. 22 3.1. Загальні. 22 3.2. Генетично ожиріні моделі. 22 3.3. Моделі, в яких ожиріння викликається дієтами. 23 МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ. 26 1. Експериментальний протокол. 27 2. Жертви та зразки крові. 28
ПОТОЧНИЙ СТАТУС ЗА ТЕМОЮ
Поточний стан предмета Рисунок 1: Загальна структура ліпопротеїну (взято з Reynal-Ljutovac et al., 2011). Після їжі надлишки вуглеводів перетворюються в жирні кислоти в печінці, і вони зберігаються в жировій тканині. У періоди голодування або фізичних навантажень запаси тригліцеридів ТА погіршуються завдяки ЛГС, а ФА, що виділяються, використовуються такими тканинами, як печінка та м’язи. Регуляція ліпідного обміну знаходиться під контролем багатьох гормонів, які або сприятимуть ліпогенезу (інсулін), або сприятимуть ліполізу (глюкагон, катехоламіни тощо) за наступним механізмом: 8
Поточний стан суб'єкта Адреналін Норадреналін + AC Адипоцит R ATP Глюкагон TSH ACTH - + 5 AMP PKA-i AMPc PKA-P β-lhs α-lhs Інсулін + Фосфатаза TG + R AGL + 2-MAG AGL Кровообіг Рисунок 2: Регулювання метаболізм ліпідів при AT (розроблений після пояснень, взятих у Lafontan та Langin, 1998); ТТГ: тиреотропний гормон; АКТГ: Адренокортикотропний гормон; AC: аденилатциклаза; β-lhs: гормоночутлива форма ліпази β, неактивна; α-lhs: Гормоночутлива ліпаза форма α, активна; АТФ: аденозинтрифосфат; ТАМП: циклічний аденозинмонофосфат; GLA: вільна жирна кислота; 2-MAG: 2-моноацилгліцерин. 9
Сучасний стан цього питання Хоча тривалий час LHS вважався ключовим ферментом у регуляції шляху ліполізу, недавнє відкриття тригліцерид-ліпази адипоцитів (ATGL) або Денутрину дозволило краще зрозуміти це явище. описується як гідролітичний каскад, що включає 3 різні ліпази згідно з діаграмою: Рисунок 3: Шлях мобілізації триацилгліцеринів в адипоцитах (Rosenthal and Glew, 2009): У TA перший етап гідролізу TAG забезпечується l ATGL, який гідролізує складний ефір в C1, вивільняючи AGL і DAG. LHS, який має сильну спорідненість до DAG, гідролізує складний ефірний зв'язок у С3, вивільняючи AGL і 2-MAG; остання потім ізомеризується в 1-MAG, а потім гідролізується моногліцеридом ліпазою, виділяючи AGL і гліцерин. 1.3.2. Причина патології: Ожиріння виникає внаслідок дисбалансу енергетичного балансу, тобто через дисбаланс між споживанням їжі та витратами, представленим основним метаболізмом та фізичною активністю, вторинним до збільшення споживання (переїдання) або зменшення витрат ( сидячий спосіб життя) або навіть їх поєднання. Дійсно, 10
Сучасний стан резистентності до інсуліну - це параметри, які відіграють ключову роль у розвитку ожиріння та метаболічних захворювань у дитячому віці (Frias and Grove, 2012). Вважається, що висока інсулінорезистентність, що спостерігається при надмірній вазі та ожирінні, сприяє високій гіперглікемії та гіпертригліцеридемії, що схильні до макросомії плода та ожиріння у дітей (Herring and Oken, 2011). Рисунок 5: Вплив ожиріння та споживання дієти з високим вмістом жиру вагітними жінками на потомство (взято з Frias and Grove, 2012). 13
Сучасний стан справ з цього питання 2.3. Склад оливкової олії: Взагалі кажучи, оливкова олія складається з двох фракцій: фракції гліцеридів, яка становить більшість оливкової олії (
98%) з явним переважанням олеїнової кислоти, яка є мононенасиченою жирною кислотою (55-83%), дуже низькою часткою насичених жирів, представлених пальмітиновою та стеариновою кислотами (8-14%) та прийнятним відсотком поліненасичених жирів ( 4-20%), з яких 3,5 - 20% лінолевої кислоти та до 1,5% лінолевої кислоти; Так звана неомилювана фракція (2%), що складається з різних елементів, які відіграють дуже важливу роль як у ароматі, так і у властивостях, що приписуються цій олії. Основні складові цієї фракції наведені в таблиці 2.2. Склад кожного з цих елементів в оливковій олії залежить не тільки від виду олії, але й від інших параметрів, таких як використовуваний сільськогосподарський процес, регіон, висота над рівнем моря, період збирання та процес видобутку (Cinquanta et al., 1997). 15
Поточний стан з цього приводу Таблиця 2.2: Основні складові неомиленого (розроблені згідно з поясненнями Wallee, 2012 та Kiritsakis, 1999) Основні представники Частка 97% стеринів, стерини яких Бета-ситостерин складають 10-15% немилених вуглеводнів сквалену 30-50% немилених токоферолів α, β, γ, δ 150-600 ppm Вітаміни D, E та провітамін A - Хлорофіл, пігменти Феофітин та - каротиноїди Тирозин та фенольні сполуки Гідрокситирозин - Ароматичні сполуки Гексанал, E2 Гексанал 250-300 ppm Ефект S протистоїть всмоктуванню холестерину в кишечнику Відповідає за аромат і аромат HO Профілактика згіркнення HO Антиоксидантна дія Відповідає за колір HO Відповідає за стійкість HO при дуже високих температурах, але також терпкий смак Відповідає за смак масла; використовується для оцінки якості масла 2.4. Оливкова олія та середземноморська дієта: оливкова олія займає важливе місце в раціоні середземноморського типу, де вона є основним джерелом жиру (Trichopoulou and Lagiou, 1997; Palma and 16
Поточний стан предмету Паділла, 2012). Як результат, багато наукових досліджень зосереджувались на поживності оливкової олії, щоб зрозуміти механізми дії, які можуть пояснити ці спостереження. Цей режим харчування характеризується наступним чином: 3. Структурований раціон (3 основні прийоми їжі) та сприятливий. 1. Продукти харчування: Зернові, фрукти та овочі, бобові, риба, ряжанка, оливкова олія. Середземноморська дієта 2. Будова їжі навколо рослин: овочі та бобові становлять серце їжі, риба та м’ясо (дуже мало!) Використовуються для додання смаку. Рисунок 2.1: Характеристика середземноморської дієти (розроблена за поясненнями Пальми та Паділли, 2012). 2.5. Оливкова олія в Алжирі Алжир є основним виробником оливкової олії. У цій країні, як і в інших країнах Північної Африки та середземноморських країн, ми спостерігаємо збільшення споживаних кілокарій (Алжир: + 82%, Туніс: + 58%, Єгипет: + 51%, Марокко: + 47%) (Пальма та Паділла, 2012). 17
Поточний стан з цього питання Рисунок 2.2: Метаболізм основних жирових кислот. 20