Тому приготуйте сольовий розчин, забуференний фосфатом
PBS, або сольовий розчин, забуференний фосфатом, є буферним розчином, який є особливо цінним, оскільки імітує концентрацію іонів, осмолярність та рН рідин людського організму. Іншими словами, він є ізотонічним для людських розчинів, тому при біологічних, медичних або біохімічних дослідженнях він рідше спричиняє пошкодження клітин, токсичність або небажані опади.
Хімічний склад PBS
Існує кілька рецептів приготування розчину PBS. Основний розчин містить воду, гідрофосфат натрію та хлорид натрію. Деякі препарати містять хлористий калій і дигідрофосфат калію. ЕДТА також можна додавати в препарат для клітин, щоб запобігти скупченню.
Фосфатно-сольовий розчин не ідеально підходить для використання в розчинах, що містять двовалентні катіони (Fe 2+, Zn 2+), оскільки можуть виникати опади. Однак деякі розчини PBS містять кальцій або магній. Також майте на увазі, фосфат може пригнічувати ферментативні реакції. Будьте особливо обережні з цим потенційним мінусом, працюючи з ДНК. Хоча PBS є чудовим для фізіологічних наук, майте на увазі, що фосфат може осідати у зразку, забуференному PBS, якщо зразок змішати з етанолом.
Типовий хімічний склад 1X PBS має кінцеву концентрацію 10 мМ PO 4 3-, 137 мМ NaCl і 2,7 мМ KCl. Ось кінцева концентрація реагентів у розчині:
| NaCl | 137 | 8,0 |
| KCl | 2.7 | 0,2 |
| Na 2 HPO 4 | 10 | 1.42 |
| KH 2 PO 4 | 1.8 | 0,24 |
Протокол отримання фосфатно-сольового розчину
Залежно від вашої мети, ви можете зробити 1X, 5X або 10X PBS. Багато людей просто купують буферні таблетки PBS, розчиняють їх у дистильованій воді та за необхідності регулюють рН соляною кислотою або гідроксидом натрію. Однак легко зробити рішення з нуля. Ось рецепти 1Х та 10Х сольового розчину, забуференного фосфатом: