UPR 9025 Ферментативний ліполіз
Квітень 1998 - n ° 27
UPR 9025: Ферментативний ліполіз
UPR 9025 в основному присвячений розробці "міжфазної ензимології" та вивченню структурно-функціональних ліпаз рослин, підшлункової залози та шлунку. Інтерес цього дослідження підкреслюється тим фактом, що більша частина ферментативних реакцій in vivo відбувається на рівні біологічних мембран, тобто на межі розділу.
Цей UPR 9025 складається з 4 дослідницьких груп, присвячених вивченню ліпаз, які можна визначити як карбоксильні естерази, що каталізують гідроліз довголанцюгових ацилгліцеринів:
- Ферментативний ліполіз рослин.
Встановлено, що ліполітичні ферменти відповідають за мобілізацію ліпідних резервів, що зумовлює розвиток олійних насіння під час проростання. Таким чином, представляється необхідним проаналізувати спосіб дії цих ферментів та регуляцію їх активності, щоб зрозуміти механізми росту рослини. Іншим аспектом цього дослідження є збереження насіння. Дійсно, накопичення продуктів гідролізу знецінює жири, що містяться в олійних насінні, і зменшує їх схожість.
Ця група вивчає ліпази та фосфоліпази, очищені від насіння (соняшник та рицина), а також листя (капуста) або культури клітин (соя).
- Кінетика, будова та функція ліполітичних ферментів.
Цю команду цікавлять структурно-функціональні взаємозв'язки в системі підшлункової залози ліпаза/коліпаза. Вона визначила тривимірну структуру цього комплексу підшлункової залози у присутності змішаних міцел жовчних солей та фосфоліпідів. Хоча явище міжфазної активації вважається оригінальною кінетичною характеристикою сімейства так званих класичних справжніх ліпаз, панкреатична ліпаза морської свинки цього явища не проявляє. Його каталітична активність на емульсії трибутирину не залежить від присутності жовчних солей і коліпаз. Крім того, ліпаза морської свинки настільки ж активна на фосфоліпіди, як і на тригліцериди, що використовуються в якості субстратів.
Ще однією галуззю досліджень, в якій ця команда спеціалізувалась, є розробка автоматичного тензіометра для безперервного вимірювання міжфазних напружень рідина/рідина або газ/рідина. Цей метод дає можливість постійно контролювати дію ліпази.
- Імунохімія ліполітичних ферментів.
Ця галузь досліджень стосується імунологічного аспекту (використання моноклональних та поліклональних антитіл) структурно-функціональних взаємовідносин травної, шлункової та підшлункової ліпаз. Команда розробила імуноферментний аналіз ELISA, наприклад, для вимірювання рівня ліпази в рідинах організму та для визначення поверхневої щільності ферментів, поглинених мономолекулярними ліпідними плівками. Оригінальність ліпазомокислотної ліпази полягає в тому, що вона гідролізує складні ефіри холестерину так само ефективно, як і тригліцериди. Визначення структурних, кінетичних та фізіологічних характеристик цього ферменту, як видається, є одним із завдань цієї роботи.
- Інженерія ліполітичних ферментів травного тракту.
Цю групу цікавлять механізми дії ліполітичних ферментів (шлункової та підшлункової ліпаз). Для визначення структурних доменів, що беруть участь у поглинанні на межі розділу ліпід-вода, специфічність субстрату або можливе зв'язування кофактора складають цілі дослідження.
Третинна структура попередньопенальних ліпаз залишається невідомою. Ця група експресувала цей білок у кишковій паличці за допомогою системи MAL E у розчинній формі. В даний час здійснюється експресія цього білка системою бакуловірусу в клітинах комах. В даний час група працює над характеристикою ізоферменту шлункової ліпази людини.
Також вивчаються білки підшлункової залози RP1 та RP2. Команда присвячена ролі амфіпатичного компонента у розпізнаванні ліпідного інтерфейсу та специфічності субстрату щодо тригліцеридів та/або фосфоліпідів.
Промислове застосування ліпаз
Дія ліпаз відбувається в повсякденному житті. Дійсно, наприклад, для додання смаку так званим сирам із італійським ароматом, ліпази в даний час замінюють сичужний фермент (екстракт ферментів з органів попередніх тварин, таких як баранина, козеня). Різні смаки походять від специфічності ферментів, які діють на жир у молоці.
Миючі засоби - ще одна сфера, де дія ліпаз є дуже корисною. Дійсно, ці ферменти беруть участь у виведенні жирових плям (80% діючих миючих засобів містять ліпази).
Було проведено багато досліджень з метою пошуку препарату для боротьби з ожирінням без використання нейролептичних препаратів. Таблетки проти ліпази Орлістат (тетрагідроліпстатин: THL), інгібітор травних ліпаз, виявляється новим перспективним новим препаратом проти ожиріння. "Роль THL полягає в наступному: травні ліпази розщеплюють жир і жири до мила та моногліцеридів, які будуть всмоктуватися кишечником. Якщо ми блокуємо каталітичну дію цих травних ліпаз за допомогою THL, жири не будуть повністю руйнуватися і будуть тому евакуювали в кінці травного тракту. Клінічне дослідження проводилось у США протягом 2 років на 4000 людей із ожирінням (вагою від 120 до 150 кг). В середньому вони втратили близько 10% маси тіла, взявши одну капсули з кожним прийомом їжі протягом року. Від 50 до 70% харчового жиру більше не засвоюється. Однак у разі передозування можуть виникати такі побічні ефекти, як жирова діарея ", - говорить Роберт Вергер, директор UPR 9025.
THL, виявлений систематичним скринінгом компанією Hoffmann La Roche, вже продається в США, а незабаром потрапить у Францію. На даний час цей препарат призначається за рецептом і призначений лише для людей із ожирінням.
Вивчення ліпаз є спеціальністю марсельських лабораторій. Дійсно, ці дослідники набували досвіду більше сорока років, тому що на той час виробники мила в Марселі просили П'єра Деснуеля розробити школу вчителів та дослідників, що спеціалізуються на вивченні ферментів, що розкладають жирні речовини. "В даний час дослідники UPR 9025 вивчають in vivo та in vitro механізм дії молекули THL на ліпазу у співпраці з компанією Hoffmann La Roche. Ця співпраця, здійснена три роки тому, триватиме до 2000 року", підтверджує Р. Вергер.