З Інституту харчових наук - PDF скачати безкоштовно
Інститут харчових наук Вплив надмірного споживання вітаміну Е на антиоксидантний статус та чутливість до гемолізу еритроцитів з різними жирами в раціоні на тваринних щурах Сільськогосподарський факультет Університету Мартіна Лютера Галле-Віттенберг (декан: проф. Д-р habil. W. Мербах) як дисертація на здобуття вченого ступеня доктора наук про харчування (доктор троф.) Представлена дипломом-трофологом, яка народилася 7 березня 1976 р. Діаною Фладер у Нордхаузені Рецензент: проф. Д-р Мербах хабіл. К. Едер П.Д. хабіл. М. Брандш Проф. Д-р хабіл. Захист Г. Флаховського: 9.12.2002 Галле/Заале 2002 урна: nbn: de: gbv: 3-000004327 [http://nbn-resolving.de/urn/resolver.pl?urn=nbn%3ade%3agbv%3a3 -000004327]

Перелік таблиць та рисунків VII Таблиця 32 Склад жирних кислот фракції фосфатидилхоліну печінки 60 у першому експерименті Таблиця 33 Склад жирних кислот мембрани еритроцитів 62 Рисунок № Титульна сторінка Рисунок 1 Кінетика окислення ліпопротеїдів низької щільності при 234 нм 19
Список таблиць і рисунків VIII Список скорочень AIN aqua dest. ß-HMG-Co A редуктаза BSA BSTFA Cu-Zn-SOD DGE ДНК δ E EC EC-SOD EDTA FAME FID GC-MS GSH GSH-Px GSSG G-6-P-DH Hb Hb-Hp комплекс Hp HDL ВЕРХ IE KGW LDL Американський інститут харчування дистильована вода ß-3-гідрокси-3-метил-глутарі-кофермент A-редуктаза бичачий сироватковий альбумін біс (триметилсилил) трифторацетамід мідь-цинк, що містить супероксиддисмутазу Німецьке суспільство з питань дезоксирибонуклеїнової кислоти номенклатура) позаклітинна супероксиддисмутаза етилендіамінтетраоцтової кислоти метилові ефіри жирних кислот (жирних кислот метилові ефіри) полум'яно-іонізаційний детектор газової хроматографії мас-спектрометрії глутатіон глутатіонпероксидази окисленого глутатіону глюкозо-6-фосфат-дегідрогенази високоефективна гемоглобіну (високої щільності рідини) lipoglobin-високої продуктивності lipoglobin, високопродуктивний ліпо-фосфат-високоефективної рідинної ліпо-phrotography (високоефективної рідинної lipoglobin) високоефективна гемоглобіну рідини ліпо-phrotography (високоефективної рідинної ліпо-phrotography) висока продуктивність, висока продуктивність, високоефективної рідинної lipoglobin, гемоглобін Одиниці (1 МО вітаміну Е = 1 мг DL-α-токоферилу етат = 0,67 мг RRR-α-токоферол) ваги тіла ліпопротеїдів низької щільності
Список таблиць і рисунків IX LDH MetHb meqo 2 MDA Mn-SOD mrna MUFA n-6 жирні кислоти n-3 жирні кислоти NaCl NAD + NADH + NADPH NADPH оксидаза NADP + p PBS PC PE PH-GSH-Px POZ P/S PUFA SFA SIM-СОД ТБКРС TBA ТЕП TMB УФ-сек лактатдегідрогенази метгемоглобіну мілліеквівалентов активного кисню Малоновий диальдегид Марганець-яке містить супероксиддисмутази Messanger рибонуклеїнової кислоти мононенасичені жирні кислоти (мононенасичені жирні кислоти) омега-6-жирних кислот омега-6-жирні кислоти-нікотинамід-зменшену нікотин-dinotamide-дінуклеотід-нікотин-дінуклеотідних-дінуклеотід-нікотинамід-adenidic кислотно-дінуклеотід розчину омега-3-окислений-нікотин-дінуклеотід-дінуклеотід відновлений нікотинамід-аденін-динуклеотид-фосфат нікотинамід-аденін-динуклеотид-фосфат-оксидаза окисленого нікотинамід-аденін-динуклеотид-фосфат рівень значущості фосфатно-сольовий буферний розчин (забуферений фосфат фізіологічний розчин) фосфатидилхолин фосфатіділетаноламін пероксидаза пероксидаза насиченого жирні кислоти/фосфатіділетаноламін-пероксидаза-пероксидаза-насичена-фосфатіділетаноламін ) поліненасичені Жирні кислоти (Поліненасичені жирні кислоти) Насичені жирні кислоти (Насичені жирні кислоти) Відібраний іонний моніторинг Супероксиддисмутаза Тіобарбітурова кислота Реагуючі речовини Тіобарбітурова кислота 1,1,3,3- Тетраетоксипропан 3-, 3`-, 5-, 5`-тестітраміновий тетрам
Перелік таблиць та рисунків X Ліпопротеїни 7-ß-OH-холестерину ЛПНЩ-ліпопротеїди дуже низької щільності 7-ß-гідроксихолестерин
Вступ 3 Перекисне окислення ліпідів слід дослідити, щоб мати можливість продемонструвати можливі прооксидаційні ефекти надмірного споживання вітаміну Е in vivo. Оскільки еритроцити дуже чутливі до окисного стресу, слід також дослідити вплив надмірного споживання вітаміну Е на гемолітичну чутливість еритроцитів. Оскільки дієтичний жир також впливає на окислювальні процеси, було обрано два різні дієтичні жири. Можливі прооксидаційні ефекти добавок з високим вмістом вітаміну Е посилюються за рахунок дієтичного жиру з високим вмістом ПНЖК. Тому лососеву олію було вибрано як дієтичний жир, оскільки лососева олія має високу частку дуже ненасичених омега-3 (n-3) пуфи, які дуже чутливі до окислення (MALIS et al. 1990, ZSIGMOND et al. 1990, SAITO і NAKATSUGAWA 1994, CHIANG та TSAI 1995, VALK та HORNSTRA 2000). Крім того, сало використовували як жир з високим вмістом насичених жирних кислот (SFA) і низьким вмістом n-3 PUFA. При використанні сала можна очікувати менше окисних процесів, ніж при використанні олії лосося.
Матеріал та методи 7 Таблиця 4: Вміст целюлози та вітаміну Е в дієтах Дієта групи L/S 100 L/S 500 L/S 1000 L/S 3000 L/S10 000 Целюлоза 49,9 49,5 49 47 40 [г/кг дієти] Вітамін Е 1 [г/кг дієти] 0,1 0,5 1 3 10 1 Вітамін Е був доданий у вигляді DL-α-токоферилацетату. Склади мінеральних та вітамінних добавок наведені у таблицях 5 та 6 відповідно відноситься до. Таблиця 5: Склад мінеральних добавок Компонент Концентрація Кількість елементів [г/кг дієта] Карбонат кальцію (36% кальцію) 8,44 Фосфат дикальцію (17,5% фосфату, 22% кальцію) 8,92 Хлорид калію (52,4% калію, 47, 2% хлорид) 6,87 оксид магнію (50% магнію) 1,014 карбонат натрію (27% натрію) 3,774 мікроелементи [дієта мг/кг] сульфат заліза (30% заліза) 116 оксид цинку (79% цинку) 38 оксид марганцю (62% марганцю) 16 мідний купорос (25% міді) 24 Кальцій йодат (62% йод) 0,32 Селеніт натрію (45% селен) 0,33 Таблиця 6: Склад компонента вітамінної добавки вітамін А (5000 МО/г) вітамін D 3 (5000 МО/г) вітамін K (510 мг/г) тіамін (1000 мг/г) рибофлавін (800 мг/г) піридоксин (1000 мг/г) біотин (20 мг/г) пантотенова кислота (1000 мг/г) нікотинова кислота (990 мг/г) вітамін B 12 (1000 мкг/г) фолієвої кислоти (1000 мг/г) холіну хлорид МО: концентрація міжнародних одиниць [на кг дієти] 4000 МО 1000 МО 0,75 мг 5 мг 6 мг 6 мг 0,2 мг 15 мг 30 мг 0, 25 мг 2 мг 1000 мг
Матеріал та методи 19 1.200 максимальна концентрація спряжених дієнів 1.100 1.000 0.900 екстинкція 0.800 0.700 0.600 0.500 0.400 Час затримки 0.300 0 20 40 60 80100120140180 200220260260280300320340360340400420440460480500 час за хв. Рис. 1: Кінетика окислення ліпопротеїдів низької щільності при 234 нм 2.3.6 Визначення маркерів перекисного окислення ліпідів 2.3.6.1 Концентрація речовин, що реагують на тіобарбітурову кислоту. Виявлення вторинного продукту перекисного окиснення ліпідів малондіальдегіду (MDA) або TBARS проводили за одним методом модифіковано з CONTI та співавт. (1991). Принцип тесту TBA заснований на комплексному утворенні двох молекул тіобарбітурової кислоти (TBA) з однією молекулою MDA при нагріванні при кислому значенні pH (HALLIWELL and GUTTERIDGE 1988). Цей комплекс MDA-TBA поглинає світло при 542 нм. Однак це утворення комплексу не є специфічним для MDA, оскільки інші альдегіди, цукри та жовчні пігменти також можуть реагувати з TBA (HALLIWELL and GUTTERIDGE 1988). 750 мкл реагенту TBA піпетували в 100 мкл зразка або стандарту. Після цього проводилася інкубація при 95 ° С протягом 60 хвилин. Потім TBARS екстрагували 3 мл н-бутанолу і визначали спектрофотометрично (Ultrospec 2000) при 542 нм.