Клітинна адгезія - людина - харчування - навколишнє середовище
Принцип моделі потоку
Вербування та активація цих лейкоцитів є багатоступеневим процесом, включаючи прокатку,
(A) Препарат HUVEC, отриманий з вен пуповини; (B) проточна камера та система перфузії, а також (C) відеодокументація прикріплених клітин за допомогою потокової моделі. включає міцну адгезію лейкоцитів до ендотелію, трансендотеліальний діапедез та хіміотактично контрольовану міграцію до місця запалення.
Молекули адгезії ендотелію та лейкоцитів сімейств селектину та інтегрину (наприклад, E-, P- або L-селектин та LFA-1 (CD11a/CD18), VCAM, ICAM) мають важливе значення для екстравазації нейтрофілів під час запальних процесів, оскільки вони опосередковують згадані вище процеси адгезії клітин.
Як частина моделі in vitro для дослідження адгезії та кочення, ендотеліальні клітини (клітини HUVEC) спочатку культивують на предметних стеклах мікроскопа. Після досягнення місця злиття клітини поміщають у проточну камеру, а лейкоцити пропускають через ендотеліальні клітини за допомогою перфузійного насоса, завдяки чому можна розрахувати та регулювати внутрішньосудинні сили зсуву.
Верхнє ліве зображення.
Принцип статичної моделі
Як частина моделі in vitro для вивчення адгезії, ендотеліальні клітини (клітини HUVEC) спочатку культивують на багатолункових пластинах, як у поточній моделі. Після досягнення місця злиття клітини стимулюються відповідними активаторами та інкубуються з попередньо забарвленими одноядерними клітинами (Т-лімфоцитами), а потім інтенсивність фарбування, пропорційна прилепленим клітинам, вимірюється флуориметрично.
Барвник кальцеїн-АМ використовується для фарбування одноядерних клітин. Цей нефлуоресцентний барвник проникає в клітинну мембрану і розщеплюється внутрішньоклітинно неспецифічними естеразами, і утворюється флуорогенний непроникний кальцеїн. Кальцеїн, також відомий під назвою Флуорексон, є похідним флуоресцеїну і має максимум збудження при 495 нм (збудження) і максимум випромінювання (випромінювання) при 515 нм, і тому його можна кількісно реєструвати у флюороскані.
Пробне оцінювання
За допомогою документації, що підтримується відео, серії зображень оцінюються в межах моделі потоку та реєструється прикріплення мононуклеарних комірок на одиницю зображення.
Малюнок вгорі праворуч.
Вартість моделі потоку
Приблизно 100 євро за 4-лункові мультиплити
Статична вартість моделі
Приклад застосування
Вплив олігосахаридів молока на адгезію лейкоцитів до ендотеліальних клітин людини (Bode et al. 2004a, b та Reiss et al. 2004)