NMP 22 (маркер пухлини сечового міхура) - кількісний тест - Synevo
Загальна інформація
Рак сечового міхура посідає 4 місце серед чоловіків та 8 місце серед жінок серед усіх видів раку. За винятком гематурії, інших ранніх симптомів у пацієнтів з пухлинами сечового міхура немає. Щоб виключити або діагностувати рак сечового міхура, цистоскопічне дослідження є обов’язковим. Донедавна цитологія сечі була єдиним неінвазивним методом, який часто застосовували. Однак чутливість та специфічність цитології сечі залежать від стадії пухлини та морфології проліферуючих клітин.
Для виявлення та моніторингу запущеного раку сечового міхура цитологія сечі є безпечним інструментом; однак рак сечового міхура на ранніх стадіях можна виявити лише приблизно в 30% випадків 2. Було зроблено кілька спроб підтвердити різні неінвазивні тести, характерні для раку сечового міхура, одна з яких - NMP22 1; 7 .
Білки ядерного матриксу (NMP) складають внутрішню структурну структуру клітинного ядра. Ця матриця служить "якорем" для ферментативного апарату, який бере участь у процесах реплікації ДНК, синтезу РНК та зв’язування гормонів. Білки NMP також відіграють роль у регуляції та координації експресії генів. Робота Фей та Пенмана показала, що експресія NMP змінюється залежно від типу клітини походження. На підставі цього спостереження було показано, що в сироватці новоутворених пацієнтів є розчинні білки NMP у значно вищих концентраціях, ніж у здорових людей. Партін та його колеги показали, що картина експресії NMP відрізняється в нормальній тканині простати порівняно з доброякісною гіперплазією передміхурової залози та раком передміхурової залози. Попередня робота виявила специфічні білки NMP для остеосаркоми, раку товстої кишки та раку молочної залози. Ці спостереження показали, що визначення NMP може бути корисним для моніторингу пацієнтів з різними пухлинами.
Різні білки NMP мають органну специфічність. NMP22 або ядерний мітотичний білок (NuMA) міститься в епітеліальних клітинах людини, де він забезпечує правильне розділення генетичного матеріалу під час мітозу. Концентрація NMP22 у злоякісних клітинах уротелію до 80 разів вища, ніж у нормальних тканинах 10. Білок NMP22 виділяється із сечею в результаті клітинного апоптозу 9. На відміну від сечової цитології, виявлення антигену NMP22 не залежить від відновлення інтактних клітин 3 .
Існує два типи тестів на NMP22, розроблені Matritech: кількісні та якісні 9 .
Кількісне визначення NMP22 проводиться за допомогою імуноферментного аналізу з використанням антитіл, які розпізнають основні білкові послідовності ядерного мітотичного білка (NuMA). Потрібна стабілізована спонтанна проба сечі.
Корисність визначення NMP22
- для діагностичних цілей у пацієнтів із симптомами або факторами ризику перехідно-клітинної карциноми сечового міхура (граничне значення 7,5 Од/мл) у поєднанні з (і ні натомість) стандартні діагностичні процедури;
- з метою моніторингу пацієнтів з пухлинами сечового міхура після хірургічного лікування з метою виявлення прихованих або швидко рецидивуючих пухлин (граничне значення 10 Од/мл) 10 .
Тест був затверджений FDA в 1996 році для використання для встановлення прогнозу та моніторингу рецидивуючих пухлин сечового міхура (після операції). У 2000 році тест отримав схвалення FDA для діагностики пухлин сечового міхура.
Метою досліджень було визначити чутливість та специфічність тесту порівняно з цитологією сечі. Хоча цитологія має високу специфічність щодо раку сечового міхура, головним його недоліком є низька чутливість до ідентифікації неінвазивних пухлин 9 .
У 3 окремих дослідженнях, в яких брали участь близько 400 пацієнтів, Солоуей, Міянага та Ландман продемонстрували, що кількісний аналіз NMP22 має загальну чутливість 70-81% для виявлення рецидивуючих уротеліальних пухлин. Для цитології повідомляється про чутливість 10-40%. Важливою знахідкою було те, що NMP22 має високу чутливість до неінвазивних пухлин. Таким чином, Міянага та його колеги показали, що чутливість тесту на поверхневі пухлини становить 70%.
У порівнянні з цитологією NMP22 має меншу специфічність. Carpinito, Soloway та Landman повідомили про специфічність 70-79% для NMP22, тоді як цитологія сечі досягла специфічності 90-94%. На практиці це свідчить про те, що NMP22 дає набагато більше хибнопозитивних результатів, ніж цитологія 9; 12; 13 .
Щодо хибнопозитивних результатів для NMP22, Понський та Шарма показали, що використання клінічних критеріїв виключення збільшує специфічність тесту до 95% та неявно зменшує кількість хибнопозитивних випадків. Слід також зазначити, що цистоскопія має загальноприйняту чутливість 80-85%, і не виключено, що деякі позитивні результати щодо NMP22, класифіковані як хибнопозитивні, насправді є позитивними випадками, які не були виявлені при цистоскопії.
Клінічні критерії виключення такі:
Солоуей та Міянага також показали, що тест NMP22 має дуже хороше негативне прогнозне значення (86-94,9%); це означає, що отримання негативного результату з дуже великою ймовірністю свідчить про відсутність уротеліальної пухлини 9 .
Ефективність тесту для диференціальної діагностики гематурії була продемонстрована в 3 дослідженнях, в яких брали участь понад 700 пацієнтів. Akaza, Miyanaga та Carpinito показали, що тест NMP22 має чутливість 85,7-90,9% для діагностики уротеліальних пухлин у пацієнтів з гематурією, тоді як цитологія сечі має чутливість 50-54,5%.
Щодо моніторингу пухлин сечового міхура, Stampfer та співавтори показали, що NMP22 має чутливість 67%, що перевершує цитологію сечі (40%). Крім того, чутливість тесту була стратифікована відповідно до стадії пухлини: 59% для неінвазивних пухлин і 90% для агресивних 9 .
Навчання пацієнта - не рекомендується використовувати тест після тотальної цистектомії, а також у перші 5 днів після інвазивної процедури (цистоскопія, катетеризація); збирання врожаю слід проводити між 0 і 12 годиною у разі спостереження за пацієнтами після хірургічного лікування 10 .
Зібраний зразок - спонтанна проба сечі 10 .
Збиральний контейнер - збиральний набір NMP22 (ємність зі стабілізатором) 10 .
Кількість зібраного - 10 мл сечі; стабілізований зразок синьо-зелений 10 .
Причини відхилення доказів - нестабілізація зразка; використання непридатного стабілізатора 10 .
Необхідна обробка після збору врожаю - сеча повинна стабілізуватися відразу після забору 10 .
Стабільність зразка - 2 тижні при 2-8 ° C. Зразок не замерзає.
Метод - ОВНС (імуноферментний) 10 .
Межа виявлення: 2,1 Од/мл 10 .
Межі та перешкоди