Посів фарингеального ексудату (за необхідності з антибіограмою); Військовий екстрений університетський госпіталь
Посів фарингеального ексудату (за необхідності з антибіограмою)
Загальна інформація

Верхні дихальні шляхи включають ніздрі, носоглотку (із пов’язаними порожнинами: навколоносові пазухи та середнє вухо), ротоглотку та гортань. Через відсутність чітких анатомічних бар’єрів між верхніми сегментами дихальних шляхів інфекція може поширюватися безперервно, часті ускладнення зачіпають середнє вухо, гортань і навіть нижні дихальні шляхи.
Фарингіт і тонзиліт є найпоширенішими захворюваннями верхніх дихальних шляхів, щодо яких пацієнт звертається до лікаря і, очевидно, до лабораторії.
При мікробіологічній діагностиці лабораторія повинна враховувати бактеріальну флору, яка зазвичай існує в певних анатомічних місцях. Ця нормальна флора, яка знаходиться в симбіотичних стосунках з господарем, відіграє важливу роль у її захисті від патогенних мікроорганізмів, завдяки різним механізмам може запобігати їх розмноженню та інвазії.
В надглотковому дні дихальних шляхів знаходиться бактеріальна флора, що включає понад 200 видів, розподілених у ясенних щілинах, зубних відкладеннях, слизовій оболонці язика та язика, ротоглотці, мигдаликових та носоглоткових криптах, аеробні бактерії домінують в аеробних у пропорції 5- 10: 1.
Етіологія фарингіту
Вірусні інфекції
• Приблизно 70% фарингітів мають вірусну етіологію: риновіруси, аденовіруси, віруси грипу, парагрип, Коксакі А, вірус Епштейна-Барра, що викликає інфекційний мононуклеоз, що характеризується важкою стенокардією, часто виразковим, аденозом шийки матки та ознаками системних уражень.
• Вони мають самообмежену еволюцію, але, пошкоджуючи дихальний епітелій та перевантажуючи синусові отвори або Євстахієву трубу, вони сприяють суперинфекції бактеріями з природної мікробіоти..
Бактеріальні інфекції
• Найчастіше задіяні Streptococcus pyogenes (Гемолітичний стрептокок β групи A, PYR позитивний). Streptococcus pyogenes - один із важливих патогенів людини, єдиний відомий у природі резервуар представлений шкірою та слизовими оболонками людини; відбиває тяжкість фарингіту через інфекційні ускладнення (синусит, середній отит, мастоидит, гнійний аденіт шийки матки, абсцес мигдалин, флегмона мигдалини, дифузний целюліт ротової дна - ангіна Людвіга) та постінфекційні (гострий ревматоїдний артрит, гострий гломерулонефрит, ревматичний кардит).
Наявність антигенів групи А Лансфілда не є специфічним для Streptococcus pyogenes, вони також можуть бути присутніми в групі стенози, яка включає Streptococcus anginosus, Streptococcus constellatus та Streptococcus intermedius. Тест PYR диференціює Streptococcus pyogenes, який відповідає за більшість бактеріальних фарингітів, від групи ангінозів, яка є частиною нормальної мікробіоти глотки.
Фарингіт з еритротоксигенними штамами Streptococcus pyogenes супроводжується скарлатиною.
• Періамігдальний абсцес частіше трапляється у дітей старше 5 років та молодих людей і може стати серйозною інфекцією, вражаючи сусідні тканини, а також розмиваючи сонну артерію. Залученими організмами є в основному: Streptococcus pyogenes, Arcanobacterium haemolyticum, Staphylococcus aureus, анаероби (наприклад, Fusobacterium spp.si Bacteroides).
• Гемолітичні β-стрептококи групи С та G можуть спричинити фарингіт, еволюція якого може бути серйозною.
• Arcanobacterium haemolyticum - може спричинити, частіше у молодих людей, фарингіт та периамігдальний абсцес. Фарингіт, подібний стрептококовому, супроводжується скарлатиною та/або шийним аденитом приблизно у 50% пацієнтів. Оскільки він є частиною коменсальної флори, клінічне значення має лише переважний ріст у ізоляційній пластині.
• Chlamydia pneumoniae - поширена причина фарингіту.
• Mycoplasma pneumoniae - викликає до 10% фарингіту школярів.
• Neisseria gonorrhoeae - гонококовий фарингіт виникає після відхиленого статевого акту і розвивається доброякісно. Лабораторне дослідження проводиться лише за прямим запитом. Мікроскопія не має значення через численні невибагливі вирости мікробіоти ротоглотки.
• Corynebacterium diphteriae - викликає фарингіт або важку псевдомембранозну ангіну, що супроводжується токсикозом. Найбільш побоюються ускладнень з ураженням центральної нервової системи (сліпота, кома).
• Фузо-спірохетотична асоціація - змішана інфекція з анаеробними бактеріями (Fusobacterium spp) та спірохетами, викликає стоматит та ангіну Вінсента. Інфекція, порівняно рідкісна сьогодні, характеризується виразково-некротичними ураженнями, які можуть бути покриті помилковими мембранами. Це вражає дорослих частіше, ніж дітей, особливо тих, хто має погану гігієну порожнини рота та місцеві або системні недоліки захисту від інфекції.
• Гемофільний грип (лише серотип b має значення для патології), Streptococcus pneumoniae та Staphylococcus aureus - це мікроорганізми, які, хоча і часто виділяються з ексудату глотки та носової секреції, не підтвердили свою причетність до етіології фарингіту. Статус носія для одного з цих мікроорганізмів, а також для Neisseria meningitidis може мати клінічне значення для певних пацієнтів або їх контактів.
• Переважне та значне збільшення культури грамнегативних паличок, псевдомонад та дріжджів (Candida albicans - дріжджі з ротоглоткової мікробіоти) може мати клінічне значення у новонароджених, у випадку недоношених дітей, пацієнтів, госпіталізованих з важкими захворюваннями, з ослабленим імунітетом або ті, хто проходив антимікробну терапію, що спричинила значний дисбіоз. Звідси важливість налагодження хорошого зв'язку між клініцистом та лікарем лабораторії, щоб знати клінічний контекст пацієнта.
Конкретний випадок інфекції глотки трапляється у дітей із муковісцидозом - станом, про який обов’язково має згадуватися у запиті, який клініцист надсилає до лабораторії. Одним із патологічних продуктів, прийнятих у цьому випадку, є глибокий глотковий ексудат, лабораторія, що повідомляє про наявність у будь-якій кількості таких мікробів: золотистий стафілокок, синьогнійна паличка та бурхальдерія цепація.
Збір та транспортування зразків
Фарингеальний ексудат приймається до або через 4 години з туалету ротової порожнини або прийому їжі або рідини.
- Пацієнта кладуть на стілець обличчям до джерела світла, шию трохи витягують, а потилицю підтримують спинка або стінка.
- притиснути основу мови депресором і, поки пацієнт вимовляє голосну «а», міцно протерти тампоном мигдалини і задню стінку глотки, наполягаючи на запалених, виразкових ділянках або гнійних відкладеннях; якщо є помилкові мембрани, вони легко від’єднуються, тампонують нижню слизову; як під час введення, так і виймання тампона, уникайте торкання основи мови та м’якого піднебіння.
- Вставте тампон у захисну пробірку, просту або забезпечену транспортним середовищем (Amies або Stuart), яка позначена відповідним чином.
- простий буфер без транспортного середовища, з якого буде проведено експрес-тест на стрептококовий антиген групи А;
- простий мазок із виразкової ділянки, з якого одночасно будуть зроблені два мазки для мікроскопічного дослідження для діагностики стенокардії Венсана;
- буфер, забезпечений транспортним середовищем для проведення культури.
Транспортування зразків до лабораторії здійснюється максимум за 2 години від забору проби. Хоча зразки, відібрані з мазків у пробірках, що містять транспортне середовище, можуть зберігатися до 24 годин, рекомендується робити щеплення на культуральні середовища, як тільки зразки потрапляють у лабораторію, для більш безпечного відновлення відстежуваних мікроорганізмів.
Лабораторна діагностика та інтерпретація результатів
Лабораторна діагностика
• Відібрати зразок на агарі Колумбія з 5% крові барана, а за запитом, коли лікар запитує флору, на шоколадному агарі.
• Аеробно інкубується в атмосфері з 5% СО2, 24 год при 37 ° С, з продовженням до 48 год, якщо при першому зчитуванні пластин не спостерігаються колонії, характерні для переслідуваного мікроба.
• Характерні колонії пересаджують для отримання чистої культури для ідентифікації.
Після отримання позитивного результату латексаглютинації для групи Lancefield проводиться імунохроматографічний тест PYR, який дозволяє диференціювати Streptococcus pyogenes (позитивний PYR) та інші бета-гемолітичні стрептококи (негативний PYR).
• Прямим, швидким методом виявлення бета-гемолітичного стрептококового антигену групи А є латексаглютинація, чутливість якої варіюється від 80-95% до специфічності 98%. Отримання позитивного результату дозволяє швидко розпочати терапію; негативний результат вимагає, однак, показників культури.
• Не рекомендується проводити мікроскопічне дослідження зразків глотки з ексудатом, оскільки на цьому рівні не можна розрізняти підозрюваних патогенів та нормальну флору. Виняток становлять такі ситуації:
- співвіднесення результатів мікроскопії з переважною і великою кількістю ізоляції в культурі видів Candida (albicans або tropicalis);
- діагностика фузо-спірохетотичної ангіни - мікроскопічне дослідження мазка, пофарбованого за Грамом, після наявності веретеноподібних грамнегативних паличок і спірохет в контексті запальної реакції;
- діагноз дифтерії - мазок, що одночасно надсилається в лабораторію, разом з мазками та направленням, в якому має бути клінічна підозра.
Критерії виконання антибіограми
Оскільки гемолітичний β-стрептокок зберігає природну чутливість до пеніциліну, антибіограма проводиться лише на прохання лікаря або у випадку алергії на пеніцилін.
Якщо в культурі гемолітичний β-стрептокок асоціюється із золотистим стафілококом, ця асоціація буде згадана в бюлетені результатів та лікування стрептококів ні буде проводитися з пеніциліном, оскільки більшість штамів стафілококів є секреторною пеніциліназою.
Інтерпретація результатів
–Стафілокок золотистий лише у поєднанні з гемолітичним β Стрептококом;