Тест QuantiFERON TBC; Центральний військовий університетський госпіталь невідкладної допомоги Dr.
Тест QuantiFERON TBC
Загальна інформація
Туберкульоз (ТБ) - це заразне респіраторне інфекційне захворювання, спричинене бактеріями, що входять до комплексу мікобатерій туберкульозу (M. tuberculosis, M. bovis та M. africanum).
Туберкульозна інфекція включає як активну, так і приховану форми; Латентний туберкульоз виникає, коли людина піддається впливу M. tuberculosis, і організм контролює інфекцію, але не може її викорінити. За підрахунками, приблизно 10% людей з прихованим туберкульозом перейдуть у активну форму протягом свого життя. Причини, пов'язані з реактивацією прихованої інфекції, включають ВІЛ-інфекцію та лікування антагоністами TNFα. З цієї причини діагностика прихованого туберкульозу є важливим кроком у запобіганні реактивації інфекції, особливо у людей з високим ризиком. Лікування прихованого туберкульозу може значно зменшити ризик прогресування до активних форм.
QuantiFERON TB, розроблений компанією Cellestis Limited (Австралія), був затверджений FDA у травні 2005 року як тест in vitro, корисний для діагностики інфекції мікобактеріями туберкульозу як для прихованої, так і для активної форми. В Європейському Співтоваристві тест був сертифікований для використання в тих самих ситуаціях, що і туберкуліновий тест.
Донедавна ІРТ туберкуліну був єдиним методом діагностики туберкульозної інфекції. Хоча широко застосовується, туберкулінова проба має ряд обмежень. У випадку QuantiFERON, який є лабораторним дослідженням, проведеним з крові, стимуляція лімфоцитів антигенами туберкульозу відбувається у флеботомічній трубці, а не внутрішньошкірно. З цієї причини «підсилюючий» ефект, який може виникнути у разі проведення туберкулінової проби, виключається (проведення шкірного тесту на людині, яка не зазнала туберкульозної інфекції, стимулює імунну систему та змушує її реагувати на туберкулін в одну стадію. наступні, коли шкірний тест повторюється).
На відміну від IDR для туберкуліну, на результати тестів вакцинація БЦЖ не впливає; попередні інфекції нетуберкульозними мікобактеріями також мають менший вплив. Також усуваються несприятливі реакції гіперчутливості, які можуть виникнути під час шкірного тесту. Крім того, результати тесту на туберкульоз QuantiFERON набагато об’єктивніші, без помилок у читанні та інтерпретації.
Показання до тесту:
1. Може застосовуватися у всіх ситуаціях, коли туберкуліновий тест зазвичай використовується:
-клінічна та рентгенологічна підозра на активний туберкульоз;
-контакти хворих на заразні форми туберкульозу;
-скринінг людей, що знаходяться у групі підвищеного ризику: співробітники медичних установ та закладів охорони здоров’я, люди із середовищ із поганою гігієною тощо.
Дослідження 2008 року показало, що тест можна застосовувати дітям старше 2 років для діагностики прихованого туберкульозу з такими ж характеристиками, як і дорослі.
Примітка: QuantiFERON TB замінює туберкуліновий тест; обидва тести не слід використовувати одночасно.
2. Це може бути інструментом для спостереження за хворими на активний туберкульоз. Є деякі дослідження, які вказують на потенційну корисність тесту для оцінки ефективності туберкулостатичного лікування шляхом відстеження кількості виділеного інтерферону гамма, який змінюється з часом.
Згідно з одним дослідженням, оцінка QuantiFERON через 2 місяці після початку терапії може мати суттєве прогнозне значення з точки зору ймовірності того, що в кінці фази інтенсивного лікування посіви мокроти залишаться позитивними.
3. Може застосовуватися перед імуносупресивною терапією (наприклад, антитілами до TNFα) або перед трансплантацією органів для виключення прихованої інфекції M. tuberculosis.
збирання врожаю
Навчання пацієнта - імунодепресивну терапію (цитостатиками) слід припинити принаймні за 14 днів до збору врожаю.
Зібраний зразок - кров прийде.
Збиральний контейнер - вакутейнер з гепаринатом літію.
Тестовий обсяг - щонайменше 10 мл гепаринізованої крові.
Перевірка стійкості - кров повинна надійти через 12 годин (максимум 16 годин) до лабораторії, де проводиться дослідження, і протягом цього періоду вона зберігається при кімнатній температурі. Охолодження зразка протипоказано.
Причини відхилення доказів - зразки, які перевищили діапазон стабільності, охолоджені або заморожені зразки.
Метод та інтерпретація результатів
Гепаринізована кров пацієнта інкубується протягом доби разом із сумішшю синтетичних пептидів, що імітує 3 специфічні білки для M. tuberculosis: ESAT-6, CFP-10 та TB 7,7 (p4). Ці білки продукуються усіма штамами Mycobacterium tuberculosis та патогенними штамами Mycobacterium bovis, але не штамами, що входять до вакцини БЦЖ. Таким чином, QuantiFERON є більш специфічним, ніж туберкуліновий тест, при виявленні інфекції M. tuberculosis. Якщо в зразку крові для цих білків є лімфоцити пам’яті (що трапляється у випадку інфекції багато років тому), ці клітини вироблятимуть γ-інтерферон у контакті зі специфічним антигеном. Кількісне визначення γ-інтерферону, отриманого з плазми, проводиться за допомогою високочутливого імуноферментного аналізу (ІФА). Для забезпечення достовірності тесту необхідно використовувати позитивний та негативний контроль. Позитивний контроль представлений фітогемагглютиніном (мітогенна речовина), а негативний контроль сольовим розчином (використовується як заготівля для вимірювання базального рівня γ-інтерферону). Кількість вивільненого γ-інтерферону виражається в МО/мл.
Інтерпретація результатів
Результат негативний (кількість виділеного γ-інтерферону
За цих умов можна виключити зараження мікобактеріями туберкульозу. Однак у пацієнтів з хронічною ВІЛ-інфекцією або іншими причинами важкого імунодефіциту (імунодепресивна терапія, певні гематологічні стани: лейкемії, лімфоми, деякі солідні пухлини: область легенів або шиї, діабет, силікоз, хронічна ниркова недостатність) розгляд поточного імунного статусу та використання інших методів діагностики інфекції.
Недавнє дослідження в Японії показало, що тест на туберкульоз QuantiFERON є більш корисним для діагностики туберкульозної інфекції у хворих із ослабленим імунітетом, ніж туберкуліновий тест. Однак, враховуючи те, що у пацієнтів з лімфопенією, які отримують імунодепресивну терапію, було отримано підвищену кількість беззаперечних результатів, результати слід інтерпретувати з обережністю у цієї категорії пацієнтів.
У разі негативного результату у людей, які нещодавно контактували з пацієнтами з діагнозом форми контагіозного туберкульозу, це буде підтверджено новим тестом, проведеним через 6-8 тижнів після закінчення періоду впливу (як у випадку з туберкуліновим тестом ).
Результат позитивні (кількість виділеного γ-інтерферону ≥ 0,35 МО/мл)
Позитивний результат свідчить про зараження M. tuberculosis. У більшості випадків диференціація між прихованою та активною інфекцією неможлива за допомогою цього тесту.
У разі клінічної підозри на активний туберкульоз усі методи мікробіологічної діагностики (мікроскопія, посів) та молекулярна біологія залишаються дійсними.
Результат безрезультатно
Виникає в ситуації, коли критерії підтвердження мітогенного позитивного контролю не були отримані (неадекватна відповідь
Межі та перешкоди
Прогностична цінність тесту залежить від поширеності інфекції M. tuberculosis у досліджуваній популяції. Кожен результат повинен інтерпретуватися в клінічному та епідеміологічному контексті пацієнта.