Цикл ЕКО - Planete sante

ПАРТНЕРИ

Вступ

Стаття з відділу репродуктивної медицини
взято з веб-сайту CHUV

Терапевтичний вихід IVFTE тісно пов’язаний з кількістю отриманих попередніх ембріонів, що саме залежить від кількості зібраних ооцитів. Тому стимуляція яєчників необхідна для збільшення кількості зібраних ооцитів (що становить 1 в природному менструальному циклі). На сьогодні використовуються різні протоколи та активні інгредієнти (кломіфен цитрат, HMG, очищений ФСГ, рекомбінантний ФСГ, агоністи або антагоністи GnRH): всі вони, як правило, отримують оптимальну кількість ооцитів. Інші можливості - це протоколи “мінімальної/м’якої стимуляції” або навіть пункція ооцитів у природному спонтанному циклі. Перевага цих типів протоколів полягає в тому, що вони набагато «природніші», але також і менш дорогі, оскільки кількість призначених ліків значно менша або навіть нульова. Недоліком є те, що, як правило, менше шансів на вагітність. Ваш лікар підбере найкращий для вас протокол.

У переважній більшості випадків вибирається «довгий» протокол. Це включає блокаду гіпофіза аналогом GnRH з наступною стимуляцією гонадотропінами FSH (Gonal-F, Puregon, Fostimon) або hMG (Merional або Menopur). Інші протоколи зарезервовані для конкретних випадків, наприклад, для пацієнтів з гіпер- або гіпореактивою. Особливості обраного лікування представляє лікар перед будь-якою стимуляцією. Зазвичай протизаплідні таблетки використовують короткий час, що дозволяє синхронізувати всі дрібні фолікули яєчників, що призводить до більш гармонійної стимуляції та, можливо, кращих результатів. В даний час такий підхід дозволяє краще контролювати точний момент (число тижня), коли відбувається пункція ооцитів. Цей короткочасний (7 - 30 днів) прийом таблеток ("подвійно пригнічений") застосовується більшістю програм ЕКО в США. Нижче ви знайдете короткий опис циклу IVFTE.

Крок 1: Стимуляція яєчників

Для стимуляції яєчників і вироблення кількох ооцитів застосовують два препарати.

Аналог GnRH (наприклад, Декапептил®) блокує синтез гонадотрофних гормонів гіпофіза (ФСГ, ЛГ) та індукує блокування природного циклу. Щоденне підшкірне введення зазвичай починається за 4 дні до припинення прийому таблеток і триває до настання овуляції (загалом приблизно 20-25 днів).
Фолікулостимулюючий гормон (ФСГ або ГМГ), що міститься у препаратах Gonal-F®, Puregon®, Fostimon®, Merional®, Menopur®), вводять щодня у вигляді підшкірної ін’єкції, він індукує ріст фолікулів яєчників (стимуляція яєчники). Зростання цих фолікулів супроводжується ультразвуковими сканами (див. Фото) та гормональними дослідженнями крові.

УЗД яєчника, що показує наявність декількох фолікулів (округлі чорні ділянки). Найбільші з них - близько 2 см.

Крок 2: Настання овуляції

Ооцит може бути запліднений спермою лише в тому випадку, якщо вона раніше відновила свій мейотичний поділ і вигнала перше полярне тіло. Потім вважається стиглим.

Приклад зрілого ооцита. Полярне тіло розпізнають о 15:00, що вказує на відновлення мейозу

У природному циклі дозрівання ооцитів та овуляція індукуються сплеском ЛГ, лютеїнізуючого гормону. У стимульованому циклі введення ХГЧ (гормону вагітності) дає змогу імітувати дію ЛГ. Це називається спрацьовуванням овуляції. Для цього можуть бути використані різні природні або синтетичні гормони, такі як ХГЧ в сечі або рекомбінантний ХГЧ.

Початок овуляції зазвичай планується за 35 годин до запланованого часу фолікулярної пункції.

Крок 3: Збір ооцитів (OPU)

Більшість вилучень яєць роблять під легким загальним наркозом в операційній. У виняткових випадках може бути запропонована місцева або локальна анестезія. Цей факт обговорюється з лікарем та анестезіологом перед операцією.

Фолікули проколюють за допомогою голки, введеної у фолікул за допомогою ультразвукового зонда через піхву. Проколоту рідину збирають у пробірки з маркуванням імені пацієнта, а потім відправляють у лабораторію. Кумулюсно-ооцитні комплекси (КОК) шукають (див. Фото) за допомогою бінокулярної лупи, потім культивують в інкубаторі.

Три купково-ооцитарні комплекси. Кожен КОК має діаметр 2-3 мм. Культура для культури з 4 лунками.

Крок 4: Збір та підготовка сперми

Забір сперми проводиться в безпосередній близькості від лабораторії приблизно через 1,5 години після пункції. Рекомендується утримання 2-3 дні, оскільки цей період дозволяє отримати максимум рухомих сперматозоїдів. У випадках, коли еякуляція за допомогою мастурбації неможлива, збір сперми під час коїтусу можливий, але це повинно проводитися в спеціальному презервативі, наданому лабораторією. Цю можливість слід заздалегідь обговорити з лікарем та лабораторією.

У дуже рідкісних випадках, якщо в першій пробі немає або занадто мало сперми, може знадобитися збір другої проби.

Сперма після промивання та сперма фарбуються Папаніколау. Довжина голови 4-5 мкм, її ширина 1,50-1,75 мкм, довжина джгутика 45 мкм (змінюється від однієї особини до іншої).

Попереднє заморожування сперми

Для зменшення ризиків функціональної «поломки» в день пункції ми рекомендуємо подружжю розглянути питання про заморожування «резервного» зразка сперми, який можна було б використати у разі «поломки». Поінформувавшись, чоловік повинен вирішити, чи здається йому цей запобіжний захід необхідним. Для заморожування зразка сперми чоловік повинен зв’язатися з лабораторією перед початком лікування та домовитись про зустріч. Застосовується той самий застережливий метод утримання від 2 до 3 днів.

Етапи 5: Початок запліднення in vitro

При звичайному ЕКО, через кілька годин після ОПУ, 50 000 сперматозоїдів контактують з кожним кумулусно-ооцитарним комплексом. Це підживлення проводять у культуральному посуді з 4 лунками (див. Фото). Кожна коробка ідентифікується з іменами пацієнтів та інкубується при температурі 37 ° C у присутності 6% CO2, 5% O2 та 90% N2 у спеціальному інкубаторі.

Коли низька кількість сперми робить неможливим звичайне запліднення, застосовується ІКСІ.

Інкубатор з контролем CO2 і O2

Крок 6: Ідентифікація просочених ооцитів, культивування ембріонів та заморожування надмірних просочених ооцитів

Як тільки сперма потрапила в ооцит, генетичний матеріал батьківського та материнського походження виглядає як структури, що називаються пронуклеусами. Таким чином, через 16-20 годин після запліднення просочені ооцити (запліднені ооцити) ідентифікуються за наявністю двох пронуклеусів (материнське та батьківське ядра) та двох полярних глобул.

Купково-ооцитні комплекси (ширина 2 мм). Ооцит міститься в скупченні клітин в центрі (0,2-0,3 мм у діаметрі). Культурний ящик, в якому проводиться запліднення.

Як правило, 2 просочені ооцити (не більше 3 у виняткових випадках) культивують для перенесення свіжих ембріонів.

Всі зайві просочені ооцити негайно заморожують згідно LPMA, тобто до 20-ї години, що відповідає моменту, коли пронуклеуси зникають і зливають їх вміст (після злиття ядер просочений ооцит визначається як зародок).

Крок 7: Перенесення ембріонів

Перенесення ембріонів здійснюється через 48-72 години після збору ооцитів. Перенесення здійснюється вагінально, за допомогою тонкого катетера, і це безболісно. Перенесення здійснюється під УЗД з наполовину наповненим сечовим міхуром.

Катетер, що використовується для перенесення ембріонів

У дуже рідкісних випадках необхідно захопити шийку матки щипцями, щоб випрямити матку і дозволити вставити катетер. Після поміщення ембріонів в матку пацієнтка відпочиває близько 30 хвилин.

Прогестерон, що вводиться вагінально, призначається з вечора дня пункції. Дози та способи лікування (лікування) вам дасть лікар.

Передача розморожених ембріонів

Передача розморожених ембріонів зазвичай здійснюється під час циклів, заміщених естрогеном (трансдермальні пластирі Progynova® або Estradot®) та прогестероном (Utrogestan®, Crinone®).

Найчастіше переносять 2 ембріона.

Ембріон з 4 бластомерами або клітинами (45 год після запліднення) та з 8 бластомерами (72 год після запліднення)

Ембріон на стадії морули (96 годин після запліднення) та бластоцисти (120 годин після запліднення).

Ембріон на стадії повної бластоцисти (144 години після запліднення)