ДНК вірусу вітряної віспи (VZV) (кров, ліквор, навколоплідні води) - Synevo

Загальна інформація

вітряної

Вірус вітряної віспи (VZV) входить до сімейства Herpesviridae; містить дволанцюжкову ДНК, розташовану в центрі та оточену конвертом 6 .

VZV викликає шкірні везикулярні ураження, які клінічно виражаються як вітрянка (первинна інфекція) або оперізуючий лишай (реактивація). Первинна інфекція проявляється особливо у дітей віком до 10 років генералізованою везикулярно-пустульозною висипкою, яка в більшості випадків самообмежується. У дітей з ослабленим імунітетом елементи шкіри більш численні, часто мають геморагічну основу, важче заживають, а іноді і суперінфікуються грампозитивними бактеріями 3; 5; 6 .

Ускладнення вітрянки зустрічаються рідко і переважно вражають ЦНС і легені. Неврологічні відхилення включають гостру мозочкову атаксію, енцефаліт, менінгіт, поперечний мієліт. Мозочкова атаксія (поширеність 1 на 4000 випадків) найчастіше розвивається протягом 1 тижня від початку висипу, але може виникнути навіть через 21 день. У дітей це, як правило, доброякісне ускладнення, яке проходить протягом 2-4 тижнів; за допомогою методів ПЛР VZV-ДНК можна виявити в лікворі. Більш серйозним ускладненням є енцефаліт, який супроводжується смертністю 5-20% та неврологічними наслідками у 15% вижилих. Крім того, важким ускладненням, яке часто трапляється у дорослих та пацієнтів з ослабленим імунітетом, є пневмонія вітрянки (задишка з тахіпное, кашель, лихоманка, інтерстиціальні рентгенологічні зміни), яка може призвести до летального результату для вагітних у другому або третьому триместрі вагітності .

Якщо первинне зараження відбувається в перші 28 тижнів вагітності, існує 1-2% ризику пошкодження плода (синдром вітрянки плоду або вроджена вітрянка). VZV-ДНК можна виявити методом ПЛР в навколоплідних водах; тест має дуже високу чутливість, але низьку специфічність для синдрому вітрянки плоду. Однак не повідомлялося про випадки порушення плода у зв'язку з не виявленою VZV-ДНК в навколоплідних водах. Ризик вродженої вітрянки високий, якщо наявність VZV-ДНК в навколоплідних водах супроводжується сугестивними змінами УЗД 1 .

Якщо зараження матері відбувається в термін, існує значний ризик вітрянки у новонародженого із смертністю до 30% 1; 6 .

Після первинної інфекції VZV вірус зберігається у прихованому стані в сенсорних гангліях уздовж спинного кореня спинномозкових нервів та черепних нервів. Реактивації відбуваються у 10-20% дорослих, частіше після 50 років і проявляються односторонніми висипаннями на сечовому міхурі з дерматомальним розподілом 5. У оперізуючого лишаю може бути клінічно виражене ураження ЦНС, таке як менінгоенцефаліт або енцефаліт. Рідкісним ускладненням, яке виникає після оперізуючого герпесу, є церебральна гранулематозна стенокардія. У людей з ослабленим імунітетом розвиток оперізувального лишаю відбувається важче і триваліше. Пацієнти зі злоякісною лімфопроліферацією мають підвищений ризик поширення шкіри та пошкодження внутрішніх органів (пневмонія, гепатит та менінгоенцефаліт) 6 .

Характерні ураження зазвичай передбачають діагноз оперізуючого лишаю. Однак і вірус простого герпесу (ВПГ), і віруси Коксакі можуть викликати дерматомальні везикулярні ураження. Для диференціальної діагностики може бути використано виявлення вірусної ДНК у місцях ураження, що є швидшим та чутливішим, ніж виділення вірусу в культурах клітин. .

Рекомендації щодо визначення VZV - ДНК - діагностика ВЗВ-інфекцій; тому:

  • VZV - ДНК у крові: раннє виявлення ускладнених інфекцій VZV у пацієнтів з важкою імуносупресією (наприклад, постмедулярна трансплантація) з метою призначення противірусного лікування 3; 6 .
  • VZV - ДНК при ураженні: диференціальна діагностика уражень шкіри 4; 6 .
  • VZV - ДНК ліквору: діагностика синдромів ЦНС, пов’язаних із VZV (чутливість та специфічність> 95% для оперізуючого лишаю без герпесу, асептичного менінгіту, енцефаліту, поперечного мієліту, васкуліту ЦНС, церебеліту); пацієнти з неврологічними синдромами без супутнього висипу отримують найбільшу користь від тестування; тест ПЛР є більш корисним для діагностики неврологічних ускладнень вітрянки; щодо синдромів ЦНС, пов’язаних з оперізуючим лишаєм, потрібно більше даних для підтвердження корисності тесту, оскільки VZV-ДНК виявлена ​​в лікворі пацієнтів з неускладненими шкірними інфекціями 2 .
  • VZV - ДНК в навколоплідних водах: діагностика зараження плода VZV 1; 6 .

Навчання пацієнта - не потрібно 3 .

Зібраний зразок - а) прийде кров; б) продукт, взятий з місця ураження на сухому тампоні; в) ліквор, зібраний поперековою пункцією; г) навколоплідних вод 3 .

Збиральний контейнер - а) пилосос, що містить ЕДТА як антикоагулянт; б) буфер без транспортного середовища; в) і г) стерильний контейнер 3 .

Кількість зібраного - а) стільки, скільки дозволяє вакуум; в) і г) мінімум 2 мл 3 .

Необхідна обробка після збору врожаю - а), в), г) докази ні буде центрифуговано 3 .

Причини відхилення доказів - а) старі, коагульовані, гемолізовані зразки; використання гепарину як антикоагулянта 3 .

Перевірка стійкості - зразки крові з місця ураження, ліквору або навколоплідних вод стабільні протягом 1 тижня при 2-4 ° C 3 .

Метод - ПЛР в режимі реального часу Light-Cycler: ланцюгова реакція полімеризації з виявленням накопиченого продукту ПЛР у реальному часі шляхом вимірювання випромінюваної флуоресценції (якісний тест) 3 .

Довідкові значення - VZV - не виявляється ДНК 3 .

Межа виявлення - 10 дітей/зразок 3 .

Інтерпретація результатів

Виявлення VZV-ДНК у різних патологічних продуктах підтримує клінічний діагноз інфекції, спричиненої цим вірусом 5 .

Межі та перешкоди

Негативний результат не виключає можливості зараження VZV, особливо на рівні 5 ЦНС .

1. Ашраф Фоуда. Вітрянка при вагітності. www.obgyn.net/educational-tutorial. Тип посилання: Інтернет-спілкування.

2. Гай Бойвін. Діагностика герпесвірусних інфекцій центральної нервової системи. В HERPES 11, Додаток, 2004.

3. Синевська лабораторія. Конкретні посилання на робочу технологію, що використовується 2015 р. Тип посилання: Каталог.

4. Марк Дж. Еспі та співавт. Діагностика вірусних інфекцій вітряної віспи-зостера в клінічній лабораторії за допомогою ПЛР LightCycler. У J Clin Microbiol. 2000 вересня; 38 (9): 3187–3189.

5. Клініка Майо. Медичні лабораторії Mayo. Каталог тестів: вірус вітряної віспи-зостер (VZV), молекулярне виявлення, ПЛР. www.mayomedicallaboratories.com. Тип посилання: Інтернет-спілкування.

6. Річард Дж. Уітлі. Вірус вітряної віспи. У „Принципах та практиці інфекційних хвороб Манделла, Дугласа та Беннета”, 7-е видання, Черчілль Лівінгстон, Ельзев’є, 2010, 1963-1968.