Хвороби у щурів - дослідження крові, взяття крові
Існують різні методи взяття крові у щурів. Найпростіший спосіб проколювання каудальної вени, каудальної артерії або вени стопи можливий без анестезії. Зазвичай можна отримати 50-80 мікролітрів крові. Цього достатньо для серологічного дослідження. Перед збором волосся на цій ділянці слід видалити, а шкіру продезінфікувати антисептиком.
Введення внутрішньовенного катетера дещо складніше, хоча цим методом можна отримати більше крові. Однак це також вимагає трохи більше практики з боку залученого ветеринарного персоналу. Тварин слід «попередньо нагріти» протягом 15 хвилин в інкубаторі (при температурі 37 o Цельсія) перед цим типом забору крові, щоб збільшити кровотік у хвості (це нешкідливо для тварини).
Для того, щоб отримати достатню кількість крові для «повного» дослідження крові, щурам необхідно знеболити (метофан або ізофлуран). Кров береться або з під'язикової вени, або "ретробульбарно" (пронизуючи сплетення вен за очним яблуком). Обидва методи повинні використовувати лише навчені люди!
Ретробульбарний (також неправильно званий ретроорбітальний) збір крові при правильному виконанні має багато переваг для тварини. Капіляри мікрогематокриту можна використовувати для збору ретробульбарної крові. Капіляр забивають корундом (склорізом), а потім відламують. Це створює свіжий, гострий край. Край розриву повинен бути гарним і гладким, під прямим кутом і не зазубреним, інакше буде встановлена занадто велика рана, що може призвести до ретробульбарних синців.
Однак деякі ветеринари мають "огиду" до гострих предметів біля ока і вибирають інший метод з естетичних міркувань, що може мати ускладнення для тварини (під'язикова вена, пункція серця, відсікання кінчика хвоста).
Упродовж місяця у щура вагою 300 г слід забрати не більше 3-4 мілілітрів крові.
Детальний опис забору крові
Каудальна вена/артерія
(Зазвичай використовується нижня хвостова вена, яка проходить разом з артерією, і обидва судини розрізаються): За допомогою скальпеля або леза бритви роблять поріз глибиною 2 мм до кровоносної судини. Кров капає з рани і може бути зібрана в пробірку або з капіляром гемотокриту. Перевага: швидкий, відсутність анестезії, мінімальна фіксація тварини. Недолік: шкіра хвоста дуже груба, лише невелика кількість крові (50-80 мікролітрів), ризик зараження.
Вена стопи (vena saphena)
Видиму вену проколюють ін’єкційною голкою (тварина повинна бути міцно зафіксована). Кров капає з рани і може бути зібрана в пробірку або з капіляром гемотокриту. Перевага: швидкий, знеболення, невелика ранка. Недолік: лише невелика кількість крові (50-80 мікролітрів)
Ампутація хвоста
Кінчик хвоста (1-2 мм) відрізають скальпелем або лезом бритви. Кров капає з рани і може бути зібрана в пробірку або з капіляром гемотокриту. Перевага: швидкий, відсутність анестезії. Недолік: велика рана, ризик зараження, лише невелика кількість крові (50-80 мікролітрів) повторити не можна, інакше хрящ хвоста буде порізаний. НЕ РЕКОМЕНДОВАНО!
УВАГА: Цей вид забору крові використовується або використовувався лише в лабораторіях і заборонений у зоні для домашніх тварин. Відповідно до Закону про захист тварин це заборонено, тому тим часом це відмовляють у лабораторіях, або кров більше не слід отримувати таким чином.
Каудальна вена
В бокову хвостову вену вводять внутрішньовенний катетер. Кров стікає через катетер і може бути зібрана в пробірку. Тварину потрібно утримувати в обмежувальній трубці та попередньо нагрівати протягом 15 хвилин в інкубаторі (37 градусів Цельсія) для отримання великої кількості крові.
Перевага: найчистіший розчин (відсутність забруднення крові), середня та велика кількість крові. Недолік: технічно складний, вимагає спеціального обладнання (обов’язкова трубка, інкубатор), трудомісткий.
Під'язикова вена
Під наркозом витягують язик, а вену під язиком розрізають маленькими ножицями. Кров проходить вздовж язика і може бути зібрана в пробірці.
Перевага: середній об’єм крові (0,5 мл). Недолік: анестезія, потрібні 2 людини, кров змішується зі слиною і, можливо, частинками їжі, може призвести до синців під язиком, якщо це зробити неправильно (щур більше не може їсти), велика рана.
Ретробульбарний
Під наркозом капіляр гематокриту вводять у куточок ока, а венозний комплекс всередині очної ямки проколюють повз очного яблука. Кров капає з іншого кінця капіляра і може бути зібрана в пробірку.
Перевага: велика кількість крові (необмежена кількість, тварина може кровоточити таким чином), кров відносно вільна від забруднення, немає ризику зараження, оскільки немає зовнішньої рани, немає вторинної кровотечі. Недолік: знеболення, при неправильному виконанні може призвести до синців за очним яблуком та пошкодження залоз Хардера.
Прокол серця
Під наркозом ін’єкційну голку з прикріпленим шприцом вводять у серце під грудною кісткою. Кров забирається шприцом.
Перевага: велика кількість крові (необмежена кількість, тварина може кровоточити таким чином), кров не забруднює. Недолік: анестезія, ризик повторного кровотечі в перикард (може призвести до смерті -> зазвичай проводиться лише як втручання переважно в лабораторіях) НЕ РЕКОМЕНДУЄТЬСЯ!
Загалом: у щурів протягом 4 тижнів слід вилучити не більше 20% об’єму крові. Об’єм крові щура становить приблизно 7% від ваги його тіла. Приблизний об’єм крові у щура 300 г: 20 мл
Всі проколи без анестезії трохи болючі. Чим менш навчений ветеринар, тим більше болю він заподіює. Вена стопи найкраща, оскільки шкіра там набагато тонша, ніж на хвості. Часто невелика кількість крові, що витікає, згортається занадто швидко, тому пункцію доводиться повторювати. Якщо пластикову гільзу канюлі видалити до взяття крові, це може запобігти передчасному згортанню.
Усі методи пункції дають лише трохи крові, і нерідкі випадки, коли не вдається отримати недостатньо крові або взагалі її не потрібно, і що потрібно зробити кілька спроб. У дослідженні на тваринах, де важливо отримати потрібну кількість крові в певний день, цих методів уникають через їх ненадійність.
При правильному використанні навченої людини ретробульбарний метод є найбезпечнішим для тварини (його часто використовують в експериментах). Ми все ще повинні запитати себе, наскільки це підходить для наших щурів. У виконанні неталановитих початківців можуть виникнути ускладнення у вигляді синця, в крайньому випадку такий синець може призвести до втрати ока.
Висновок: У разі необхідності, пункція вени хвоста/артерії та/або прокол вени стопи, найімовірніше, буде розглянута у домашніх щурів, оскільки ці два методи є найменш складними та порівняно простими у виконанні.
Якщо ветеринар має відповідні знання та необхідні технології, немає нічого поганого у відборі ретробульбарної крові. Однак кожному господареві щурів слід брати кров під наркозом лише тоді, коли це вкрай необхідно.
У будь-якому випадку, практикуючий ветеринар повинен мати певний досвід, щоб тварина не мала зайвого болю.
Ветеринар повинен вирішити, коли призначений аналіз крові. Як правило, його слід замовляти у разі виникнення певної підозри. Можна лише сподіватися, що набагато більше ветеринарів спочатку змогли б взагалі провести аналіз крові, якщо вони інакше вже не знають, що робити, або якщо вони взагалі освоїли техніку взяття крові у щурів. На жаль, це все ще виняток з щурами. Досі існує (занадто) багато ветеринарів, які ніколи не брали кров у щурів. Для щура цей аналіз крові недосвідченою людиною може тоді стати болючим досвідом.
Лабораторія може отримати найрізноманітнішу інформацію з крові:
Виявлення антитіл проти інфекційних захворювань. Можна конкретно визначити, чи була тварина/коли-небудь заражена відомими вірусами/бактеріями.
Лабораторія може підрахувати еритроцити та білі кров’яні тільця з цільної крові (зробленої не здатною до згортання за допомогою ЕДТА). Кількість та співвідношення один до одного можуть дати ветеринару інформацію про певне захворювання (= підозра на інфікування тощо)
У крові виявляється ряд речовин та ферментів. Залежно від того, чи існує певна речовина занадто мало чи занадто багато, можна зробити висновок про наявність захворювання. Простіше кажучи, коли орган пошкоджений, тканиноспецифічні ферменти надходять з відмираючих клітин у кров і відповідний рівень ферменту підвищується. Креатинінкіназа (КК) в основному міститься в м’язах, а це означає, що підвищення рівня КК у крові свідчить про пошкодження м’язів). Подальші приклади: підвищений рівень глюкози може свідчити про діабет, збільшення рівня креатиніну та сечовини - про пошкодження нирок тощо.
Нормальні значення цих тестів є лабораторними (вони залежать від використовуваного методу аналізу), але загальні значення публікуються і повинні бути доступними хорошому ветеринару.
| показники крові | |||||
| гематологія | Нормальні значення | ||||
| ПВХ (%) | Гематокрит (%) | 36 - 54 | |||
| Hgb (г/дл) | гемоглобін | MCV (fl) | Середній об’єм еритроцитів | 48-70 | |
| MCHC (г/дл) | Вміст гемоглобіну в одному еритроциті | 40 | |||
| WBC (x1000) |
| Різниця. (%) | Диференціальний аналіз крові | |
| Segs | Неутофільні гранулоцити | 10-30 |
| Лімфи | Лімфоцити | 65-85 |
| Монос | Моноцити | 0 - 5 |
| EOS | Еозинофіли | 0 - 6 |
| Басос | Базофільні гранулоцити | 0 - 1 |
| Платформа (x1000 | Тромбоцити | 500-1300 |
| Клінічна хімія | Нормальні значення | |
| Альба (г/дл) | альбумін | 3,8 - 4,8 |
| Alk P (U/l) | Лужна фосфатаза | 16 - 50 |
| Старий (U/l) . | 35-80 | |
| Білі-Т (мг/дл) | Білірубін | 0,2-0,5 |
| БУН (мг/дл) | сечовина | 10-21 |
| CA 2+ (мг/дл) | кальцію | 8-13 |
| Холестерин | холестерин | 40-130 |
| Креа (мг/дл) | Креатинін | 0,5 - 1 |
| Глюкоза (мг/дл) | Глюкоза | 50-160 |
| Фос (мг/дл) | фосфор | 5,3 - 8,3 |
| ТР (г/дл) | 5,6 - 7,6 | |
| Na + (мекв/л) | натрію | 140-150 |
| K + (мекв/л) | калію | 4,3 - 5,6 |
| Хлориди | Хлориди | 95-115 |
| Різні методи ін’єкцій | Найпоширенішими методами ін'єкції є: |
| Внутрішньошкірно (в/в) або внутрішньошкірно (в/в) | в шкіру |
Окрім інших факторів, речовини, що вводяться, повинні бути асептичними та з температурою тіла. Деякі речовини не можна вводити у вену (IV), але їх слід вводити в черевну порожнину (внутрішньочеревно - внутрішньовенно), під шкіру (підшкірно - с. С.) Або в шкіру (внутрішньошкірно - в. С.). Перед кожною ін’єкцією місце проколу необхідно дезінфікувати 70% спиртом і при необхідності звільнити від хутра (гоління). Само собою зрозуміло, що шприц і канюля завжди повинні бути стерильними. Залежно від місця розміщення шприца, речовина поширюється більш-менш швидко в організмі. Внутрішньосерцева ін’єкція найшвидше розподіляє засіб в організмі, потім внутрішньовенна, внутрішньочеревна, внутрішньом’язова, підшкірна і, нарешті, внутрішньошкірна ін’єкція.
У випадку ін’єкції безпосередньо в серце (внутрішньосерцеву) речовина негайно розподіляється в організмі по артеріях. Це найшвидший спосіб, але техніка введення вимагає великого досвіду у щурів і повинна проводитися під наркозом. Цей тип ін’єкцій не використовується в зоні домашніх тварин, але зарезервований для лабораторій.
Якщо речовина діє дуже швидко (наприклад, анестетик), її часто вводять внутрішньовенно (IV). Це дуже важливо для i. v. ін’єкція (як при внутрішньосерцевій), щоб ні в шприці, ні в канюлі не було повітря! У щурів можна робити внутрішньовенні ін’єкції у хвостову вену. Якщо перед ін’єкцією хвіст розігріти в теплій воді на 40 °, вену можна знайти легше, випираючи Коротка інгаляційна анестезія рекомендується дуже нервовим та тривожним тваринам та недосвідченим ветеринарам.
Внутрішньочеревна (i . p) ін’єкція, як і внутрішньосерцева, проводиться за умови випробувальних лабораторій. Оскільки очеревина добре забезпечена кров’ю, речовина, що вводиться, дуже швидко засвоюється організмом. Однак цей тип ін’єкції є дуже ризикованим і повинен проводитися лише досвідченими людьми; недосвідчені люди ризикують травмувати сечовий міхур або кишечник через неправильну ін’єкцію. Тому цей метод НЕ рекомендується.
Якщо робиться внутрішньом’язова (внутрішньовенна) ін’єкція, тоді речовина повинна мати сильний вплив на метаболізм, але ефект не повинен відбуватися негайно. Оскільки цей тип ін’єкції може зруйнувати м’язову тканину або випадково вразити нерв, такий тип введення не слід застосовувати у щурів, і цей тип ін’єкції є досить болючим.
У щурів ін’єкція під шкіру (див. С.) Застосовується найчастіше і бажано в місцях, де шкіру можна легко підняти, головним чином в області спини та шиї. Анестезія при цій техніці не потрібна. Шкіру слід підняти з тканини двома пальцями, а потім проколоти в складку шкіри паралельно поверхні тіла. Перед спорожненням шприца ветеринар повинен перевірити правильність розташування канюлі, обережно пересуваючи її.
Внутрішньошкірна (внутрішньошкірна) або внутрішньошкірна (внутрішньошкірна), тобто ін’єкція в шкіру, також не застосовується в зоні вихованців у щурів. Навіть у експериментальних тварин такий спосіб введення дуже важкий для щурів, і його не рекомендують і не проводять.
Для щура 250 г рекомендований максимальний об’єм ін’єкції:
У випадку з молодими тваринами кількість ін’єкції необхідно регулювати або розподіляти по кількох місцях ін’єкції.