Імунітет свиноматок-оновлювачів у стабільній фермі PRRS - Статті - 3trois3, сайт Le
Запропоновано подальші заходи щодо заміщення свиноматок за програмою відбору зразків рідини для прийому всередину.
Серед багатьох досліджень, спрямованих на поглиблення знань про PRRS у свиней, нещодавно був запропонований новий підхід до польової оцінки імунної відповіді шляхом аналізу специфічних антитіл у слині. Цей метод діагностики є дуже цікавим, оскільки дозволяє легко збирати його неінвазивними методами, поважаючи добробут тварин. Це також економить значний робочий час для працівників ферми порівняно із забором крові, який важко провести у дуже великих тварин.
Дослідження проводили на фермі для свиноматок, стабільно розташованій у PRRS, метою якої є продаж свиней від 30 до 35 кг живої ваги. Кількість свиноматок у виробництві становить максимум 350 - 400. Він позитивно оцінював PRRS протягом багатьох років, і первинну вакцинацію відновленого стада проводять живою аттенуйованою вакциною близько 140 днів життя та підсилювачем з інактивованою вакциною через 3 тижні.
Контур дослідження
Ми вибрали 8 поновлених свинок з 3 послідовних груп, які були ідентифіковані, розміщені разом та вилучені у наступному віці: T1 = день 1 (день після прибуття в кімнату, окрему від ферми), T2 = день 49 (вихід з кімнати, щоб піти до вирощування), T3 = день 63, T4 = день 77, T5 = день 91 і T6 = день 105. У кожної проби кров і рідини (слину) з рота брали у групи за допомогою мотузки.
Збір слини в приміщенні, відокремленому від свиноферми, на наступний день після їх прибуття.
Збирають урожай, виходячи з кімнати прибуття, щоб піти на розведення
Збирають урожай в кінці експерименту в коробці. Презентація мотузки вручну
Клінічний стан свинок був задовільним протягом експерименту, а також параметри виробництва та відтворення ферми протягом року, протягом якого проводились польові випробування (аборти, показники опоросу, відлучення/свиноматка/рік). Обстежені свинки заразили вірусом PRRS через 7-9 тижнів після прибуття на ферму (табл. 1). Кінетика утворення сироваткових антитіл збіглася з кінетикою антитіл IgA та IgG у ротовій рідині груп 1 та 2. У групі 3 вона корелювала лише з IgG у слині.
Однак позитивного впливу на ПТ-ПЛР у реальному часі не виявлено ні в сироватці тварин, ні в оральній рідині (слині) групи.
Таблиця 1: Відповідь антитіл (кров і пероральні рідини) на вірус PRRS
| Зразок 1 (0 д) | Зразок 2 (49 д) | Зразок 3 (63 д) | Зразок 4 (77 д) | Зразок 5 (91 д) | Зразок 6 (105 д) | |
| Сироватка: середня s/p | 0 | 0,35 | НАРОДЖЕНИЙ | 0,92 | 0,76 | 0,86 |
| Позитивні/загальні сироватки | 0/8 | 3/8 | НАРОДЖЕНИЙ | 8/8 | 7/8 | 8/8 |
| LO: з/п тест IgA | 0 (NEG) | 0,61 (POS) | НАРОДЖЕНИЙ | 0,49 (DOU) | 0,87 (POS) | 0,75 (POS) |
| LO: s/p тест IgG | 0,10 (NEG) | 1,83 (POS) | НАРОДЖЕНИЙ | 1,04 (POS) | 1,16 (POS) | 1,06 (POS) |
Зразок 3 (63 д)
Зразок 3 (63 д)
Зразок 1: На наступний день після прибуття в кімнату, окрему від ферми.
Зразок 2: після виходу з кімнати прибуття та переходу до розведення через 7 тижнів.
Зразок 3-6: кожні два тижні до 105-го дня прибуття (4,5 місяці життя).
Ця експериментальна схема була проведена, щоб показати час зараження, знаючи, що протягом перших 7 тижнів контакту з вірусом не було.
LO: рідина для прийому всередину
NEG: негативний
POS: позитивний,
ДУ: сумнівний
Обговорення та висновок
Санітарний контроль PRRS, заснований на заборі рідини через рот, виявився точним та своєчасним з дуже низькими логістичними та організаційними вимогами порівняно з індивідуальним забором крові. Дані також показують, що однієї або двох серопозитивних тварин у групі 8-10 може бути достатньо для позитивного збору оральної рідини з групи. У цьому сенсі істотної затримки діагностики не було порівняно з серологією. Слід підкреслити, що збір ротової рідини за допомогою мотузки повинен бути модульований відповідно до віку тварин (або їх розміру), незалежно від часу чи режиму впливу.
У нашому дослідженні виявилось, що виявлення реакції антитіл у ротовій рідині є більш надійним, ніж виявлення вірусу в крові або ротовій рідині за допомогою RT-PCR. Слід зазначити, що акліматизація свинок у цьому комплексі проводиться у два етапи: А) перші 7 тижнів у приміщенні, окремому від свиноферми, без вірусної рециркуляції; Б) період у службовому будинку, де контакт з тваринами здійснюється в умовах з дуже низьким рівнем вірусної циркуляції. За цих умов дуже зниженого інфекційного тиску підсвітка ніколи не була позитивною за допомогою ПЛР в реальному часі з різних можливих причин: 1) час відбору зразків не збігався з піком вірусемії, 2) використовуваний зонд сильно відрізнявся від циркулюючий вірус (хоча він був підтверджений на фермі до дослідження), 3) деградація вірусної РНК перед забором, незважаючи на вжиті заходи обережності.
Цікаво відзначити, що тест IFN-гама (Dotti et al., 2011; імунітет, виміряний клітинами до вірусу PRRS) дає результати згідно з тестами на антитіла, наведеними в таблиці 1 (неопубліковані дані). Тому в стабільних господарствах доцільно очікувати стабілізації позитивності антитіл з часом, що має призвести до помірних титрів s/p та рівноваги після відповіді IgA та IgB в оральній рідині. Вищевказані умови не спостерігаються у нестабільних зграях, які мають повторювані цикли зараження (див. рисунок 1). За цих умов нестабільності запропонована схема контролю виявить послідовні цикли віремії та відповіді антитіл як у крові, так і в слині, пов’язану з відсутністю імунної відповіді, вимірюваної клітинами (IFN-гама-тест).
Рисунок 1: Інфекція вірусом PRRS у нестабільній фермі.
Польові випробування в нестабільній фермі були опубліковані раніше (Dotti et al., 2013). Це когортне дослідження в групі свиноматок-замісників. Графік А показує кількість свинок з віремією та без неї у різний час. На графіку В показано зміну титру сироваткових антитіл з часом. Стрілки на графіку А показують 3 послідовні хвилі зараження, що відбулися у фермі.