Методи мікологічного обстеження - Енциклопедія Альтмайєра - Департамент дерматології

Автор: Професор доктор мед. Пітер Альтмайєр

Останнє оновлення: 24.10.2017

Синонім (и)

Загальна інформація

Видобуток матеріалу (залежить від Mayser)

Процедура вилучення матеріалу залежить від уражених структур (див. Мікози).

Прибирання: Замішується 70-процентним етиловим спиртом або ізопропіловим спиртом. Усунення наближеної флори та можливих супутніх мікробів. Ніяких комерційно доступних дезінфікуючих спреїв, оскільки це погіршить ріст грибів! Відбирання зразка в крайовій ділянці шкіри змінюється (тут найсильніше лущення з найвищою концентрацією грибка). Примітка: Обов’язковою умовою є використання стерильних інструментів (скальпель, гостра ложка, ножиці)!

Видалення з краю краю тупим боком скальпеля. Поверхневі та грубі луски викидаються (часто лише мертві гриби та багато домішок). Нижні дрібні луски досліджують. Дрібні пластівці збирають у пластиковий контейнер або на аркуш паперу для дослідження.

Матеріал шкіри між пальцями ніг може бути легко вилучений за допомогою пінцета для обстеження, а потім додатково оброблений мікологічно. Для полегшення ситуації можна використовувати розкидач пальців ніг (див. Нижче). Tinea pedum).

Якщо кількість матеріалу недостатня енергійний мазок поверхні стильним тампоном, змоченим кухонною сіллю. Це поширюється безпосередньо на культуральній пластині.

виконання

Застосування на слайді: Кілька частинок досліджуваного матеріалу розміщують на предметному склі. Додайте 1-2 краплі 20-30% розчину гідроксиду калію (КОН; розчин гідроксиду калію). Луг калію мацерує частинки шкіри, волосся та нігтів, роблячи їх прозорими. Укладені грибні елементи мікроскопічно видно завдяки своєму більш сильному заломленню світла. Гірка накривається накладкою. Уникайте бульбашок повітря! Підготовлені препарати зберігають у вологій камері (наприклад, у закритій чашці Петрі з вологою целюлозою), поки їх не можна буде переглянути. Час, необхідний частинкам шкіри для досягнення бажаної прозорості, коливається в середньому близько 20 хвилин. Нігтьовий матеріал займає близько 1 години. Волосся слід швидко мікроскопізувати після додавання розчину гідроксиду калію (волосся дуже швидко розпадаються; тоді вже неможливо віднести збудника до ростової форми - ектотричної/ендотриксичної).

Скорочення часу мацерації: Це може бути досягнуто ретельним нагріванням препарату. Не нагрівати до кипіння, утворюючи кристали КОН! Кристали лугу калію можуть спричинити хибнопозитивні результати. Якщо замість гідроксиду калію використовується TEAH (гідроксид тетраетиламонію - Merck), матеріал можна негайно дослідити під мікроскопом.

Мікроскопія: Для мікроскопічного дослідження досліджуваний матеріал розподіляється дуже тонким шаром, застосовуючи рівномірний тиск на ковзання покриття. Оцінка проводиться за допомогою світлового мікроскопа. Опустіть конденсатор мікроскопа. Це призводить до отримання більш чіткого зображення. В якості альтернативи: фазово-контрастне дослідження. В якості альтернативи: фарбування (конго червоний, Метиленовий синій, Хлоразол чорний) клітин грибка.

Рідні препарати від пітниці версіколор (Дивись нижче. Пітниця різнокольорова)

Мікроскопічне дослідження для ідентифікації на видовому рівні: Для цього підходять зірвані препарати (нанесіть на предметне скло 1 краплю лактофенолу, вирвіть з культури грибкові елементи, покладіть на предметне скло і розгляньте під мікроскопом), препарат для відриву клейкої смужки (покладіть на предметне скло 1 краплю лактофенолу, видаліть грибкові елементи з культури за допомогою клейких смужок - злегка натискайте), Наклейте клейкі смужки на предметне скло та дослідіть їх за допомогою мікроскопа) або кульку скляного покриву (виріжте з чашки Петрі кубик агару розміром 1,0x1,0x0,5 см, покладіть на предметне скло, прищепіть бічні краї, покладіть на покривне скло, інкубуйте протягом декількох днів, а потім використовуйте мікроскоп).

Флуоресцентне обстеження: Фарбування зразків акридиновим апельсином або Calcofluor White. Барвники прикріплюються до певних полісахаридів або до хітину грибів (кератин людини лише трохи забарвлений). Грибкові елементи світяться зеленим кольором у флуоресцентному мікроскопі. Печера: целюлоза (бавовняні волокна) також флуоресцирує.

Підказки)

Диференціація дріжджів відбувається за допомогою культури Рисовий агар.

Гістологічне дослідження: Більші шматочки нігтів за необхідності також можна використовувати для гістологічної діагностики. Гістологічне виявлення збудника проводиться за допомогою Відповідь PAS.