Мікробіологічний аналіз кишкової води, фекального стрептокока, загальної мезофільної аеробної флори,

Преамбула: інформація, значення, таблиці, графіки та питання, представлені нижче, є лише частиною вивченої теми. Деякі питання не відображаються в документі про підтримку діяльності, але їх задавали під час сесій.

Вода, призначена для споживання людиною (але також і для корму тваринам, для поливу овочів і фруктів, для купання тощо), не повинна містити патогенних або умовно-патогенних організмів, здатних викликати проблеми зі здоров’ям тих, хто їх споживає або вживає.

Метою є пошук мікробів, які є свідками забруднення фекаліями:

аеробні мікроби, що відроджуються при 22 ° C і 37 ° C (їх також називають загальною мезофільною аеробною флорою: FAMT)
коліформи (загальна, термотолерантна (= фекальна) та кишкова паличка)
ентерококи (фекальні стрептококи)
спори сульфіторедукторів Clostridium (не дуже конкретний свідок старого забруднення фекаліями, оскільки деякі сапрофітні з ґрунту) або Clostridium perfringens (більш конкретний свідок старого забруднення фекаліями)

1-а частина: перелік відроджуваних аеробних мікробів при 22 ° C і 37 ° C (FAMT) шляхом посіву в масу

Підрахунок проводять після серійних розведень у співвідношенні 1/10, в кінцевому обсязі 10 мл (розчинник = стерильна фізіологічна вода) методом інокуляції в масу агарового середовища (агаровий ПЛР-агар ПЛР) з відливанням накладка з білого агару.

Проведіть перерахування FAMT (метод масової інокуляції, Vinoculum = 1 мл, середовище PCA) для цієї серії розведень: d10 0, d10 -1, d10 -2:

Прокоментуйте якість продукції
Вкажіть, які колонії порахувати.
Проаналізуйте консистенцію між розведеннями:
- - це співвідношення кількості колоній між двома розведеннями, що відповідає коефіцієнту розведення ?
- чи можна застосувати ISO 7218 (нижче) ?
Вкажіть, згідно з інструкціями стандарту, два використовуваних розведення.
Виразіть результат підрахунку в КУО мезофільних мікроорганізмів.mL -1 води плавального басейну.

Примітка: підрахунок на комп’ютері може здійснюватися за допомогою програмного забезпечення MESURIM PRO. Приклад:

Перерахування згідно з ISO 7218 (жовтень 2007)

Цей стандарт формалізує використання лише однієї коробки в одному розведенні. У мікробіології харчових продуктів доречно застосовувати формулу імовірнісного розрахунку, рекомендовану французькою асоціацією стандартизації (AFNOR). Розрахунок кількості КУО на мл (або на г продукту) полягає у виготовленні середньозваженої кількості колоній, отриманих при двох послідовних розведеннях (розрахунок дійсний, коли співвідношення кількості колоній між двома розведеннями відповідає коефіцієнт розведення).
Виберіть два послідовних розведення, включаючи:

Принаймні одна має мінімум 10 колоній;
Загальна кількість колоній - 300 на блюдо (Примітка: один обмежить до 150 колоній для середовища, що містить кольоровий індикатор рН та/або дозволяє визначити біохімічний характер)

Рівняння для кількостей: cN (мікроорганізм; суспензія) = Ʃc/(V x 1,1 d)

-cN (мікроорганізми; суспензія) = концентрація в кількості КУО на мілілітри (або грами)

- Ʃc = сума колоній, підрахованих на двох обраних ящиках

- V = об’єм посівного матеріалу, нанесеного на кожну коробку, у мілілітрах

- d = перше розведення, яке можна використовувати (наприклад, якщо ми використовуємо коробки для розведення 10 -1 та 10 -2, d = 10 -1 - це перші розведення, що використовуються).

Результат округлюється до 2 цифр, виражених числом від 1,0 до 9,9, помноженого на відповідну потужність 10.

2-а частина: підрахунок загальних і термотолерантних коліформ (калу) в рідкому середовищі (імовірнісний метод АЕС)

Маніпуляції були розподілені з метою підрахунку:

загальна кількість коліформ: ентеробактерії (грамнегативні палички, оксидаза (-), аеро-анаеробна, ферментативна глюкоза, не дуже вимоглива, нітрат-редуктаза (+)) лактоза (+) та газ (+) при 30 ° C
калові коліформи (або термотолерантні): ентеробактерії (грамнегативні палички, оксидаза (-), аеро-анаеробна, ферментативна глюкоза, не дуже вимоглива, нітрат-редуктаза (+)) лактоза (+) та газ (+) при 44 ° C

Виконайте перелік термотолерантних коліформ (так званий фекальний) на цій серії розведень (2 пробірки на розведення): d10 -1, d10 -2, d10 -3, d10 -4, d10 -5

(метод найімовірнішого числа; Вінокулюм = 1 мл; середній = Лактозний відвар Білі Бриліант Зелений BLBVB)

Прочитати носій дзвінка BLBVB + (результати у табличній формі).
За допомогою імовірнісного методу, відомого як Найвірогідніше число (MPN), оцініть кількість фекальних коліформ на мл води басейну .

3-а частина: перелік спор CLostridium сульфіторедукуючих та Clostridium perfringens

Пошук спор:

попереднім нагріванням води до 90 ° C протягом 10 хвилин
з подальшим інокуляцією 20 мл у 4 середовища VFSR (5 мл на середовище), регенеровані у великих глибоких пробірках
з подальшою інкубацією при 37 ° C (кількість спор від Клострідій сульфіторедукторів) і при 44 ° С (кількість спор Clostridium perfringens)

дав такий результат:

Також було здійснено другий підрахунок: вегетативних форм.

Ось результат, отриманий після 24 годин інкубації при 37 ° C:

Читайте ЗМІ: обґрунтуйте появу колоній.
Вкажіть, яку бактерію (и) шукають з огляду на умови експлуатації.
Проведіть підрахунок вегетативних форм і повідомте про результат у КУО. 100 мл -1 води в басейні

4-та частина: перелік фекальних ентерококів методом мембранної фільтрації

Процедура експлуатації, реалізована під час технологічних проектів.

Приклад, отриманий на агарі Сланеца та Бартлі: виявлення та перелік фекальних стрептококів

Оскільки це середовище є лише передбачуваним, мембрану слід перенести в середовище підтвердження: агар BEA (жовч-ескулін-азид)

Частина 5: Перерахування коліформ через мембранну фільтрацію