Ромен Клод Реймонд ЛАМЕР - Завантажити PDF безкоштовно

НАЦІОНАЛЬНА ВЕТЕРИНАРНА ШКОЛА АЛЬФОРТ 2015 РІК ВНЕСОК RH-BMP-2 В ОСТЕОГЕННИЙ ПОТЕНЦІАЛ ВІДВОДИМИХ БІО-ГІБРІДІВ, АСОЦІЮЮЧИХ КОРАЛЬНИХ АКРОПОРАХ І АВТОМОЛОГІЧНИХ СМС: ДОКЛІНІЧНЕ ВИВЧЕННЯ В ДЕРЕКТОРІ ДИСЦЕРАЦІЇ ЛА КРЕТЕЙЛЬНА МЕДИЦИНА. Ромен Клод Раймонд ЛАМЕР Народився 19 січня 1990 р. в Ам'єні (Сомма) Президент журі: професор, професор медичного факультету КРЕТЕЙ Члени Директор: пан Матьє МАНАСЕРО Викладач Національної ветеринарної школи Альфорта. Викладач Національної ветеринарної школи Альфорта

завантажити

ПОДЯКИ професору медичного факультету Кретей, котрий зробив нам честь прийняти пост президента нашої журі дипломних робіт, Шаноблива данина поваги. Пану Матьє Манассеро, старшому викладачу з хірургічної патології в Національній ветеринарній школі міста Альфорта, за те, що я зробив мені честь керувати цією роботою, за те, що довірив мені, підтримав та порадив, уся моя вдячність та щира подяка. Пану Едуарду Рейесу Гомесу, старшому викладачу гістології та патологічної анатомії, який приніс мені задоволення прийняти посаду асесора. За його доброту, розуміння та реактивність, щира подяка. Пані Веронік Віато, професору та керівнику хірургічного відділу Національної ветеринарної школи м. Альфорт, за поради та довіру, щира подяка. Пані Аделіні Декамброн, яка відповідає за консультації з хірургії Національної ветеринарної школи Альфорта, за її педагогіку, її доступність і доброзичливість до мене, всю мою подяку. Пану Александру Фурне, резиденту хірургії Національної ветеринарної школи м. Альфорта, за його поради, допомогу та доступність, всю мою подяку.

СПИСОК СКОРОЧЕНЬ ALP: лужні фосфатази, лужноїфосфатази BV: Bone Обсяг, обсяг новосформованої кістка CFSE: карбоксіфлуоресцеін сукцініміди ефір, карбоксіфлуоресцеін диацетат сукцініміділових CSMS: мезенхімальні стовбурові клітини, або залишкове Corenchymal Corenal або CV Обсягу клітини: Динамічна притискної пластина DMEM: Дульбекко з Модифікований Eagle s Medium EDTA: етилендіамін тетра-оцтова кислота FDA: Управління харчовими продуктами та ліками HA: HydroxyApatite HD: висока доза або сильна доза IV: внутрішньовенне LD: низька доза, низька доза MicroCT: мікросканер MMA: метилметакрилат PBS: сольовий розчин, забуференний фосфатом, сольовий розчин, забуференний фосфатом PRP: Плазма, багата на тромбоцити, збагачена тромбоцитами плазма RH-BMP: Морфогенетичний білок кісткової рекомбінантної кістки людини або рекомбінантний морфогенетичний білок кісток ROI: Область інтересів, СВФ область інтересу: Фетальна теляча сироватка TCP: Трикальцій фосфат, трифосфат кальцію ВК: кораловий обсяг 3

СПИСОК ТАБЛИЦ Таблиця 1: Короткий опис властивостей опор, що використовуються в інженерії кісткової тканини 16 Таблиця 2: Функції BMP у кістковій та хрящовій тканинах 19 Таблиця 3: Опис конституції трьох біогібридів, імплантованих у вівцематок в області плюсни 28 Таблиця 4: Порівняння якісних даних між навчальними групами та історичним контролем 47 7

СПИСОК ДОДАТКІВ Додаток 1: Двомісячні рентгенограми плеснових кісток 59 Додаток 2: 4-місячні рентгенограми метатарзальних кісток 60 Додаток 3: Тривимірна реконструкція метатарзальних кісток після отримання мікроскану 61 Додаток 4: Центральний розділ метатарзали після мікроскопічного отримання 62 Додаток 5: Центральні гістологічні зрізи плеснових кісток 63 Додаток 6: Оцінка поверхні кістки шляхом гістоморфометричного аналізу ділянки, взятої в середній сагітальній площині дефекту кістки 64 Додаток 7: Оцінка залишкового корала за мікроктром аналіз та гістоморфометричний метод 64 Додаток 8: Крива лінійна регресія між обсягом кістки та резорбцією коралів для кожної групи 65 9

Рисунок 6: Схематичне зображення препарату різних імплантатів Таблиця 3: Опис конституції трьох біогібридів, імплантованих в овець в області плеснової кістки 55 кубів Acropora 55 кубів Acropora Biohybride 1 Acropora/rh-bmp-2 LD (рис. 68 мкг) Acropora/CSM Біогібрид 2 Acropora/rh-bmp-2 LD (68 мкг) Acropora окремо Biohybride 3 Acropora/rh-bmp-2 HD (680 мкг) Acropora лише 2.1.2.1. Біогібрид Acropora/CSM: інокуляція коралових кубів CSM За тиждень до інокуляції кріоконсервовані клітини розморожують, промивають і культивують відповідно до процедури, описаної вище (2.1.1.2.). За добу до щеплення 60 стерильних кубиків Acropora промивають PBS, а потім занурюють у культуральне середовище, ідентичне середовищу клітинного культури, на 24 години. У день щеплення 60 кубиків Acropora, підготовлені заздалегідь, поміщають у поліпропіленову пробірку об’ємом 50 мл, а потім інокулюють щільністю 2,10 5 CSM на куб. Пробірки перевертають кожні чверть години протягом чотирьох годин у перший день, щоб гомогенізувати їх розподіл на коралі, потім кожні 8 годин протягом 28 годин.

звичайним способом (підшкірний шов (поліглактин 910, Vicryl dec 2); шкірний шов (поліамід, Ethilon dec2)). Хірургічна рана захищена нанесенням алюмінію (Алюспрей, Ветохінол, Букінгем, Англія). Радіопрозора смола (Dynacast Soft, BSN Medical, Laval, Канада), що включає 8-міліметрову ступінчасту планку, розміщена під дугою. Рисунок 7: Фотографії часу роботи (a) Сегментарна резекція кістки пилкою Gigli; (b) Довжина остектомії становить 25 мм. (c) Розміщення 3,5 мм вузької пластини DCP з 8 отворами. (d) Заміна втрат кісткової речовини біогібридами. Післяопераційну аналгезію проводять шляхом внутрішньовенної ін’єкції мелоксикаму по 0,5 мг/кг (Metacam, Boehringer Ingelheim, Реймс, Франція) та Трамадолу по 2 мг/кг (Contramal, Grünenthal SAS, Леваллуа-Перре, Франція) перед пробудженням та 72 години. пізніше. Для кожної оперованої вівці її вага перевіряється перед хірургічною операцією, довжина остектомічного шматка та його об’єм, а також будь-які інтраопераційні випадки. 31

ВИСНОВОК Це дослідження показує на широкоформатній доклінічній моделі тварин, що додавання rh-bmp-2 (у дозах від 10 2 до 10 в 3 рази нижче, ніж у людей) до біогібридів, що асоціюють корали Acropora та CSM, дозволяє збільшити остеогенний потенціал у короткостроковій перспективі без шкідливого впливу на архітектуру кісток. Однак результати залишаються відносно непослідовними, як результати, отримані з біогібридами, що поєднують Acropora/Porites та CSM. Як і в попередніх дослідженнях, зберігається слабке зв’язок явищ резорбції коралів та новоутворень кісток. Недостатня остеоіндукція, пов’язана із занадто низькими дозами rh-bmp-2, та/або збільшення запалення, породженого rh-bmp-2 (у початку ранньої резорбції коралового матриксу), може пояснити стійкість цього дефектне зчеплення і становлять два можливі шляхи подальших досліджень з метою поліпшення біофункціональності цих біогібридів аж до аутологічного кортикоспонгічного трансплантата. 51

ДОДАТКИ Додаток 1: Рентгенівські промені через 2 місяці плеснових кісток 59

Додаток 2: Рентгенограми на 4 місяці плеснових кісток 60

Додаток 3: Тривимірна реконструкція плеснових кісток після отримання мікроскану 61

Додаток 4: Центральний зріз плеснових кісток після отримання мікроскану 62

Додаток 5: Центральні гістологічні зрізи плеснових кісток. Забарвлення блакитним Стівенелом та пікро-фушином Ван Гісона 63