Blastocystis sp слід розглядати як новий збудник статей - 3three3, Сайт
У клінічно важливих кількостях не виявлено ентеропатогенів, і тому масивна інвазія Blastocystis sp вважалася значною у цьому випадку.
Цей випадок бластоцистозу у свиней, який спостерігався в університетській свинарській клініці, стався в березні 2015 року в австрійській свинофермі. У цій фермі є 60 свиноматок у 3-тижневій партії з 28-денною лактацією в системі виробництва заводчиків-відгодівників. Свиноматок регулярно вакцинують проти парвовірусу та червоного кефалі, а поросят - проти PCV2 та Mycoplasma hyopneumoniae. Про інші хвороби нас не повідомляли.
Ветеринар спостерігав поросят з діареєю після відлучення, що призвело до зменшення набору ваги. Інших клінічних симптомів не спостерігалося. Смертність була низькою з низьким рівнем клінічного обстеження та досягненням ранньої діагностики
Порося, який лікувався колістином (5 мг/кг ваги на добу протягом 7 днів) з характерною профузною діареєю, був направлений в Університетську клініку свиней. Результати клінічного обстеження показали лише помірно знижений харчовий статус та діарею. Після клінічного обстеження порося було евтаназовано для розтину та гістологічного дослідження. Фрагмент тонкої кишки обробляли окремо для його бактеріологічного аналізу. Зразки фекалій з діареєю відбирали зондом (повністю заповненим для забезпечення анаеробних умов) і негайно відправляли в Інститут бактеріології для культури Brachyspira spp. Щоб виключити пов'язаний з PCV2 ентерит, зразки тканин фіксували у формаліні та гібридизували in situ для виявлення PCV2 безпосередньо в кишечнику. Вискоблювання слизової оболонки клубової кишки та товстої кишки аналізували на наявність Lawsonia intracellularis, Brachyspira hyodysenteriae та Brachyspira pilosicoli за допомогою потрійної ПЛР. Для виявлення кокцидіальних ооцист і найпростіших мікроскопію калу проводили у флуоресценції та при звичайному освітленні.
Помітних морфопатологічних змін в органах не виявлено. Вміст товстої кишки був світло-зеленого та водянистого кольору. На слизовій оболонці тонкої кишки при гістопатологічному дослідженні спостерігали різні еозинофільні гранулоцити (рисунок 1). Гібридизація in situ для PCV2, така як потрійна ПЛР для виявлення L. intracellularis, B. hyodysenteriae та B. pilosicoli, була негативною.
Рисунок 1: Гістологічний зріз тонкої кишки. У слизовій розташовано кілька еозинофільних гранулоцитів.
У тодкій кишці виявлено гриби низької щільності (дріжджі) та кишкову паличку. Через погане виявлення Е. coli у товстій кишці, передбачалося, що він має низький клінічний вплив, і тому фактори вірулентності не визначались. Слід додати, що Brachyspira spp не виявлено на конкретних культурах.
Ооцисти кокцидії не були виявлені за допомогою флуоресцентної мікроскопії. Виявлено кісти необалантидієвої палички у кількості, яка вважається фізіологічною для свинячої кишки.
Під звичайною світловою мікроскопією було виявлено, що фекалії цього порося мають багато округлих структур розміром 10-20 мкм. Ці структури здавалися прозорими без або майже без "внутрішньоклітинних" компонентів (рис. 2).
Рис. 2: мазок з фекалій, забарвлений Diff-Quick. Червоні стрілки вказують на бластоцистис.
Щоб краще побачити ці структури, мазок з калу фарбували комерційним набором Diff-Quick. При збільшенні в 1000 разів за допомогою зануреного мікроскопічного світла структури виглядали одноклітинними, особливо базофільними. Оскільки, наскільки нам відомо, ці структури зазвичай не містяться в таких кількостях у фекаліях свиней, вважається, що це щось «нове». Після консультації з патологоанатомами, бактеріологами та паразитологами остаточний діагноз був отриманий від лікаря-протолога, який працював як з ветеринарними найпростішими, так і з людьми. Ці структури були описані як Blastocystis sp.
Інтерпретація цих висновків
Через те, що ентеропатогенів не виявлено у клінічно важливих кількостях, масивна інвазія Blastocystis sp вважається значною у цьому випадку.
Blastocystis sp є найпростішим, що зазвичай зустрічається у людей та тварин, таких як свиноматки та корови. Клітина оточена клітинною мембраною і складається в основному з великої центральної вакуолі. Ядро розташоване гранично (рисунок 3). Вперше він був описаний в 1911 р., Проте його патогенез та патогенність ще не відомі взагалі. Бластоцисти можна виявити фізіологічно в помірних кількостях у товстій кишці свиней. Дослідження на предмет виявлення бластоцистозу у свиней зі зниженим імунітетом показують ймовірну колонізацію не тільки товстої кишки, але і тонкої кишки. Загалом, у людей чи свиней не спостерігається уражень або колонізації епітелію кишкової тканини.
Рис. 3: мазок з фекалій, забарвлений Diff-Quick. Червона стрілка вказує на центральну вакуолю, а чорна - на ядро.
Рис. 4 Гістологічний зріз товстої кишки. Червоні стрілки показують бластоцисти в просвіті кишечника.
У цьому випадку причиною масової колонізації кишечника поросят була б імуносупресія через забруднення мікотоксинами. У 2014 році кукурудза була сильно забруднена мікотоксинами, особливо трихотеценами типів А і В, по всій Центральній Європі. Дезоксиніваленол (DON), що належить до трихотеценів групи В, і токсин Т2, що належить до групи А, є мікотоксинами, відомими своїм імунодепресивним ефектом. Враховуючи високу забрудненість кукурудзи, було вирішено повністю виключити її з корму. Однак вважається, що мікотоксини (особливо Т2 і ДОН) були імунодепресивними компонентами, які дозволяли колонізувати бластоцисти з попередніх партій. Цей факт, разом з відсутністю належних гігієнічних та дезінфекційних процедур, міг допустити надзвичайне забруднення загонів інфекційними фазами Blastocystis, що вплинуло на наступні партії.
Профілактика та лікування
Лікування бластоцистозу важко через обмежену кількість ефективних речовин для боротьби з ним. Кажуть, що метронідазол є продуктом вибору, але його використання у виробничих тваринах ще не затверджено ЄС. Інші імідазоли, такі як тинідазол та кетоконазол, також заборонені.
Єдиним законним способом лікування бластоцистозу є пероральний триметоприм сульфаніламід (TMP/STX) або паромоміцин, який дають у питну воду. Паромоміцин - протимікробний засіб з групи аміно-глюкозидів, який погано всмоктується системно. Після вживання він залишається в просвіті кишечника і виводиться з калом. У людській медицині паромоміцин використовується для лікування блостоцистозу, криптоспоридіозу, амебіазу та шкірного лейшманіозу.
У цьому випадку TMP/STX вводили в їжу для лікування діареї, але покращення симптомів не спостерігалося. Отже, ветеринар вирішив застосовувати паромоміцин у дозі 40 мг/кг маси тіла протягом 10 днів, ніби це антимікробне лікування, оскільки це продукт, зареєстрований для цього використання. Цей продукт також дозволений для лікування ентериту через кишкову паличку.
Лікування антибіотиками бластоцистиса не є ефективним саме по собі. Він завжди повинен супроводжуватися такими заходи, як прибирання та відповідна дезінфекція. Хоча інформація недоступна, передбачається, що дезінфікуючі засоби на основі крезолу або четвертинного амонію/глутаральдегідних компонентів є ефективними. Будь-який інший інфекційний імунодепресант слід розглянути та лікувати, якщо це необхідно. Якщо є підозра, що мікотоксини могли спричинити захворювання, можна розпочати застосування ефективних добавок у кормі.
Через кілька місяців клінічна ситуація у господарстві значно покращилася. Паромоміцин успішно застосовується у трьох партіях. Більше діареї у партій, оброблених пармоміцином, не спостерігалось, і рівень смертності знизився до
Короткий зміст та перспективи
Таким чином, Blastocystis sp слід додати до переліку диференціальних діагнозів при діареї свиней, особливо в роки, коли кукурудза була сильно забруднена мікотоксинами, які, як відомо, мають свій імунодепресивний ефект. У майбутньому лабораторії повинні розширити своє діагностичне поле та шукати Blastocystis sp у фекаліях свиней з рясною діареєю.