Діагноз - Крит; невропатологічна відп

Інформація для медичних працівників

невропатологічна

Остаточний діагноз пріонових захворювань заснований на обстеженні центральної нервової системи, яке виявляє патогномонічне накопичення патологічного PrP (PrPsc) та характерну лесіонну картину.

Накопичення PrPsc високий

Накопичення PrPsc у центральній нервовій системі починається після нейроінвазії нетрадиційними трансмісивними агентами.

Це можна виділити різними техніками. Найчастіше використовуються:

  • виявлення вестерн-блот після перетравлення білків протеїназою К
  • імуногістохімія.

Вестерн-блот має ту перевагу, що дозволяє класифікувати профіль міграції PrPsc. Найбільш широко використовуваною біохімічною класифікацією є класифікація Парчі та Гамбетті, яка розрізняє за молекулярною масою неглікозильованої форми PrPsc та розподілом різних глікоформ, 3 основних типи (1, 2A та 2B) (Head et al. ., 2004; Parchi et al., 1996; Parchi et al., 1999)

Імуногістохімія дозволяє проводити морфологічну класифікацію відкладень PrPsc (синаптичні, зернисті, вогнищеві, бляшки, перивакуолярні). Оскільки ця інформація доповнює класифікацію захворювань людини, ці дві методики найчастіше використовуються паралельно.

Характерна таблиця уражень включає:

1) нейропільний спонгіоз,

2) значний астроцитарний гліоз, що супроводжується активацією мікроглії

3) ймовірно апоптотична смерть нейронів

4) наявність, суперечлива, бляшок амілоїдних відкладень.

Під час ТСЕ не спостерігається явного запального синдрому. Поява стигмати гліозу та спонгіозу добре корелює з накопиченням PrPsc у мозку, наявність якого є патогномонічним. Загалом ураження спонгіозу з’являються в місцях накопичення PrPsc.

Це найбільш поширене ураження ТСЕ; це дозволяє орієнтувати діагноз. Спонгіоз відповідає утворенню порожнин, розташованих у нейропілі. Ця вакуолізація відбувається за рахунок тіл нейрональних клітин та нервових розширень. Розмір вакуолей дуже мінливий і може коливатися між межею виявлення та 30-50 мкм. Спонгіоз вражає кору головного мозку (у повній товщі або в глибоких шарах), кору мозочка (молекулярний шар) та базальні ганглії.

Його слід відрізняти від інших неспецифічних форм спонгіозу:

  • губчастий стан, що асоціює мікрокістозний аспект нейропілу та інтенсивний гліоз, який можна спостерігати під час інтенсивних нейрональних втрат,
  • вогнищеві (деменція з тілами Леві) або поверхневі спонгіози (хвороба Альцгеймера, хвороба Піка), які можуть спостерігатися при деяких нейродегенеративних захворюваннях, спонгіформних змінах під час набряку мозку, перинейрональної вакуоляції та периваскулярних судин, пов’язаних з церебральною аноксиєю-ішемією. Нарешті, багато артефакти (пов’язані з фіксацією, включенням або різанням) можуть мати вигляд периваскулярних або перинейрональних вакуолей або поверхневого ламінарного спонгіозу (Budka et al., 1995; Hauw et al., 1995)
Гліозвисокий

Гліоз вражає астроцити та мікрогліальні клітини.

  • Найбільш вражаючим невропатологічним ураженням ТСЕ є інтенсивний астроцитарний гліоз, об'єктивований дуже сильною надмірною експресією гліофібрилярного кислотного білка (GFAP). (Diedrich et al., 1991; Dormont et al., 1981; Kordek et al., 1996)
  • Ця реакція астроцитів тим важливіша, оскільки втрати та вакуоляція нейронів інтенсивні.
  • Астроцитарна гіперплазія та гіпертрофія зазвичай розташовані в місцях сірої речовини або поблизу амілоїдних бляшок, але в деяких випадках можуть бути виявлені в білій речовині.

  • Реакція мікроглії, присутня при ТСЕ, давно недооцінюється.
  • Проте прогрес, досягнутий в імуногістохімії, дозволив краще його охарактеризувати.
  • Мікрогліальна реакція спостерігається в нейропілі та в зонах вакуолізації.
  • Клітини мікроглії також вважаються невід’ємними складовими амілоїдних бляшок. Дійсно, імуногістохімічні дослідження показують наявність активованих мікрогліальних клітин навколо амілоїдних відкладень.
  • Ця „мікрогліальна реакція” пов’язана з бляшками та ділянками сильної вакуолізації, але її також можна дифузно виявити в білій речовині (Barcikowska et al., 1993; Duguid and Trzepacz, 1993; Guiroy et al., 1994).

Амілоїдні бляшкивисокий
  • Поява амілоїдних бляшок PrP не систематично виявляється у всіх моделях TSE.
  • Амілоїдні бляшки виявляються в мозку пацієнтів з певними формами CJD, SGSS та Kuru і в різній кількості присутні в інших природних або експериментальних ТСЕ (скрепіт овець, BSE, хронічна хвороба) (Bruce and Fraser, 1975; Bruce and Fraser, 1981)
  • Ці бляшки в основному складаються з позаклітинних відкладень PrPsc, організованих у фібрили, що мають характеристики амілоїдів (двозаломлення після червоного фарбування Конго, нерозчинність, фібрилярний вигляд при електронній мікроскопії).
  • Амілоїдні волокна, що спостерігаються у TSE, складаються з ниток PrPsc, організованих у спіралі діаметром 12-16 нм, що змінюються в довжину від 100 до 500 нм (Liberski et al., 1991).
  • З суворо анатомопатологічної точки зору ці бляшки можна класифікувати за чітко визначеними морфологічними критеріями та ураженнями, які безпосередньо з ними пов’язані.

Таким чином, ми розрізняємо:

    • Бляшки типу Куру (округлі бляшки з щільним ядром, оточені променевими фібрилами)

    • "багатоцентрові" бляшки, характерні для SGSS, (Kitamoto et al., 1986), що містять кілька щільних вогнищ амілоїдних відкладень без променевих волокон. Вони часто асоціюються з відкладеннями аморфного матеріалу, не організованого в амілоїдну структуру. Астроцитарні розширення тісно пов’язані з ним.

    • Нарешті, для нового варіанту CJD характерні бляшки Флориди, що складаються з куруподібної бляшки, оточеної короною вакуолей (Will et al., 1996)

Куруподібні бляшки при епізодичному CJD
В: Фарбування бодіан-луксолом. B: фарбування PAS

AT: спонгіоз молекулярного шару кори мозочка (фарбування гематоксилін-еозином).
: фокальні відкладення PrPsc, які переважають на стику зернистого шару та шару клітин Пуркіньє (імуногістохімічне маркування PrP за допомогою антитіла 3F4
VS: астроцитарний гліоз (імунозабарвлення GFAP).
D: квіткові тарілки (D1: Фарбування PAS; D2: імунозабарвлення PrP)
  • Втрата нейронів постійна при ТСЕ, але вона може бути дуже різною за інтенсивністю в залежності від області мозку та клініко-патологічної форми, що досліджується.
  • Більше того, він впливає на групи нейронів, розподілених нерегулярно, і може бути дуже інтенсивним у певних областях, як у мозочкових формах CJD з атрофією шару зерен.
  • Що стосується захворювань людини, і принаймні для пацієнтів з гомозиготним метіоніном та гетерозиготним метіоніном-валіном при кодоні 129, смерть нейронів має все більше значення, оскільки клінічна фаза захворювання тривала (Hauw et al., 2000). Крім того, вижилі нейрони демонструють значну втрату дендритних варикозних розширень.
  • Відсутність запального синдрому та інфільтрації лімфоцитів у скрейпі свідчить про те, що нейродегенерація в основному опосередковується апоптозом. Це було підтверджено на моделях внутрішньоочної інфекції хом'яків або мишей, при яких втрата нейронів є масовою (Giese et al., 1995; Williams et al., 1997) У людей через повільний перебіг захворювання (з інкубаційного періоду до смерті) та дифузний характер нейронної смерті, апоптоз - рідкісне явище, яке важко продемонструвати в будь-який момент часу. Ретельне обстеження дозволяє виявити це явище під час ТСЕ методами, спрямованими на демонстрацію фрагментації ДНК та/або виявлення білків, активованих під час апоптотичного процесу (Dorandeu et al., 1998; Gray et al., 1998; Gray et al. Al., 1999)

Депопуляція зернистого шару нейрону
мозочка при спорадичному CJD
AT: контрольний пацієнт; : Спорадичний CJD

Barcikowska M, Liberski PP, Boellaard JW, Brown P, Gajdusek DC, Budka H. Microglia - це компонент амілоїдної бляшки пріонового синдрому при синдромі Герстмана-Штрауслера-Шейнкера. Acta Neuropathol 1993; 85: 623-627.

Брюс М.Є., Фрейзер Х. Амілоїдні бляшки в мозку мишей, інфікованих скрепі: морфологічні варіації та властивості фарбування. Neuropathol Appl Neurol 1975; 1: 189-202.

Брюс М.Є., Фрейзер Х. Вплив шляху зараження на частоту та розподіл церебральних амілоїдних бляшок у мишей-скрепі. Neuropath Appl Neurobiol 1981; 7: 289-298.

Budka H, ​​Aguzzi A, Brown P, Brucher JM, Bugiani O, Gullotta F, et al. Нейропатологічні діагностичні критерії хвороби Крейцфельдта-Якоба (CJD) та інших губчастих енцефалопатій людини (хвороби Пріона). Brain Pathol 1995; 5: 459-466.

Дідріх Й.Ф., Бендхайм ПЕ, Кім Й.С., Карп Р.І., Хаасе А.Т. Прион-білок, пов'язаний зі скрейпі, накопичується в астроцитах під час зараження скрейпом. Proc Natl Acad Sci USA 1991; 88: 375-379.

Dorandeu A, Wingertsmann L, Chretien F, Delisle MB, Vital C, Parchi P, et al. Нейрональний апоптоз при фатальній сімейній безсонні. Brain Pathol 1998; 8: 531-537.

Dormont D, Delpech B, Delpech A, Courcel NM, Viret J, Markovits P, et al. Гіперпродукція гліофібрилярного кислого білка (GFAP) під час експериментального мишачого скрепі. C R Acad Sc Париж 1981; 293: 53-56.

Duguid J, Trzepacz C. Основні складні гени гістосумісності мають підвищену експресію мозку після зараження скрейпом. Proc Natl Acad Sci США 1993; 90: 114-117.

Giese A, Groschup MH, Hess B, Kretzschmar HA. Загибель нейрональних клітин у мишей, інфікованих скрейпі, відбувається внаслідок апоптозу. Brain Pathol 1995; 5: 213-221.

Сірий F, Chretien F, Adle-Biassette H, Dorandeu A, Ereau T, Delisle MB та ін. Нейрональний апоптоз при хворобі Крейцфельдта-Якоба. J Neuropathol Exp Neurol 1999; 58: 321-328.

Guiroy DC, Wakayama I, Liberski PP, Gajdusek DC. Взаємозв'язок амілоїдно-імунореактивних бляшок мікроглії та скрепежу при куру, хворобі Крейцфельдта-Якоба та синдромі Герстмана-Штрауслера. Acta Neuropathol 1994; 87: 526-530.

Hauw JJ, Naccache PY, Seilhean D, Camilleri S, Mokhtari K, Duyckaerts C. Невропатологія нетрадиційних інфекційних агентів або пріонів. Pathol Biol 1995; 43: 43-52.

Hauw JJ, Sazdovitch V, Laplanche JL, Peoc'h K, Kopp N, Kemeny J, et al. Невропатологічні варіанти спорадичної хвороби Крейтцфельдта-Якоба та кодону 129 гена PrP. Неврологія 2000; 54: 1641-6.

Head MW, Bunn TJ, Bishop MT, McLoughlin V, Lowrie S, McKimmie CS, et al. Неоднорідність прионного білка при епізодичній, але не варіантній хворобі Кройцфельдта-Якоба: випадки у Великобританії 1991-2002. Ann Neurol 2004; 55: 851-859.

Kitamoto T, Tateishi J, Tashima I, Takeshita Ibarry RA, DeArmond SJ, Prusiner SB. Амілоїдні бляшки при хворобі Крейтцфельдта-Якоба фарбують антитілами до прионного білка. Ann Neurol 1986; 20: 204-208.

Кордек Р, Нерукар В.Р., Ліберський П.П., Ісааксон С., Янагіхара Р., Гайдушек, округ Колумбія. Підвищена експресія TNFa, IL1a та GFAP при експериментальній хворобі Крейцфельдта-Якоба у мишей. Proc Natl Acad Sci США 1996; 93: 9754-9758.

Ліберський П.П., Браун П, Сяо С.Ю., Гайдушек Д.К. Ультраструктурна різноманітність фібрил, пов’язаних зі скрейпі, ізольованих від експериментальної хвороби Скрейпі та Крейцфельдта-Якоба. J Comp Pathol 1991; 105: 377-386.

Parchi P, Castellani R, Capellari S, Ghetti B, Young K, Chen SG та ін. Молекулярна основа фенотипової мінливості при спорадичній хворобі Кройцфельдта-Якоба. Ann Neurol 1996; 39: 767-778.

Parchi P, Giese A, Capellari S, Brown P, Schulz-Schaeffer W, Windl O, et al. Класифікація спорадичної хвороби Крейцфельдта-Якоба на основі молекулярного та фенотипового аналізу 300 суб'єктів. Енн Нейрол. 1999; 46: 224-233.

Will RG, Ironside JW, Zeidler M, Cousens SN, Estibeiro K, Alperovitch A, et al. Новий варіант хвороби Кройцфельдта-Якоба у Великобританії. Lancet 1996; 347: 921-925.

Williams A, Lucassen PJ, Ritchie D, Bruce M. PrP відкладення, мікрогліальна активація та нейрональний апоптоз при мишачому скрепі. Exp Neurol 1997; 144: 433-438.