Група крові OAB (Бет Вінсент, Симонін); Центральний військовий університетський госпіталь невідкладної допомоги Dr.

Група крові OAB (Бет Вінсент, Симонін)

Загальна інформація

У людини виявлено 26 систем груп крові з 228 антигенами; група крові складається з одного або декількох антигенів, які регулюються одним геном або комплексом двох або більше тісно пов'язаних генів.

Були також визначені інші антигени, які не були віднесені до встановлених систем. Антигени еритроцитів можуть бути білками, глікопротеїнами або гліколіпідами. Більшість із них синтезуються еритроцитами, проте деякі антигени, такі як ті, що належать до системи Льюїса, адсорбуються з плазми на мембрані еритроцитів. Деякі антигени специфічні для еритроцитів, а інші знаходяться в інших клітинах організму. Знання груп крові є важливим для трансфузійної терапії. Таким чином, особи, які не мають певних еритроцитарних антигенів, можуть виробляти аллоантитіла під впливом крові, що містить ці антигени, при переливанні крові або під час вагітності. Антитіла, які взаємодіють з еритроцитарними антигенами, викликають негайні або уповільнені реакції гемолітичного переливання крові та гемолітичну хворобу новонародженого.

Система груп крові АВО є найважливішою системою груп крові, оскільки: коли антигени не експресуються на поверхні еритроцитів, відповідні антитіла завжди присутні в плазмі, стимули для вироблення антитіл представлені різними факторами навколишнього середовища, такими як бактерії (наприклад, кишкова паличка), які експресують на поверхні структури майже ідентичні вуглеводам АВО; утворені антитіла являють собою суміш IgM (переважно) та IgG, активних при 37ºC і здатних активувати комплемент, а висока щільність антигенних ділянок на мембрані еритроцитів дозволяє зв’язувати велику кількість антитіл, що ведуть у разі несумісного переливання крові в систему АВО, при гострих реакціях гемолітичного переливання.

Усі імунокомпетентні особи виробляють природні антитіла (ізоаглютиніни або ізогемолізини) до відсутніх антигенів групи АВО (Н). Зазвичай анти-А та анти-В можна виявити через 3-6 місяців після народження, а у віці 5 років титр антитіл досягає свого максимуму і зберігається протягом усього дорослого віку. Титр антитіл IgM може поступово зменшуватися з похилим віком. Анти-А та анти-В антитіла також є у тих, хто має слабкі варіанти А або В. У новонароджених зазвичай немає значної кількості анти-А та анти-В у плазмі, за винятком народжених від аллоімунізованих матерів, які можуть мати антитіла IgG від матері, які перетнули плаценту. АНТ-антитіла не є основною причиною гемолітичної хвороби у новонародженого через пригнічення антитіл до розчинних речовин А та/або В, присутніх у крові, а також А або В-антигенів, присутніх на клітинах, крім еритроцитів; також спорідненість зв'язування антитіл з молекулами цукру слабша, ніж спорідненість антитіл до молекул білка, наприклад антиген D4. Гемоліз є більш імовірним, якщо мати - група O, а дитина - група A2.

збирання врожаю

Навчання пацієнта - попередня підготовка не потрібна; корисна інформація про інфузійні методи лікування високомолекулярними розчинами, проведені до визначення, переливання крові за останні 120 днів, інфекційні захворювання з грамнегативними мікробами з/без сепсису, злоякісні захворювання (карцинома, лімфома, мієлома).

Зібраний зразок - а) капілярна кров з пульпи пальця; б) прийде кров.

Збиральний контейнер - b) пилосос без добавок або активуючого гелю (червоний або безбарвний ковпачок).

Кількість зібраного - б) стільки, скільки дозволяє вакуум.

Причини відхилення доказів - сильно гемолізований зразок.

Перевірка стійкості - тест проводять негайно, якщо це неможливо, зразок витримують протягом 48 годин при 2-8 ° C.

Необхідна обробка після збору врожаю - після повної коагуляції при кімнатній температурі сироватка і згусток видаляються. З решти еритроцитів 10% суспензію готують у власній плазмі або у фізіологічному розчині. Для методу аглютинації на картках суспензію з 5% еритроцитів готують у спеціальному суспензійному середовищі.

Метод

Метод визначення - у лабораторіях Synevo прямий/глобулярний метод (Бет-Вінсент) проводиться для визначення групи крові АВО з використанням сироватки анти-А, анти-В та анти-АВ з наступними варіантами:
- гемаглютинація на пластині3. Використовуються два засоби контролю: контроль АВ (еритроцити пацієнта з сироваткою АВ) та контроль автомобіля (еритроцити та власна сироватка).
- аглютинація та гель-фільтрація на мікротрубках, що містять гель, просочений еритроцитарним антиген-специфічним реагентом (мишачі або людські моноклональні антитіла) - прямий тест групування ABO та визначення Ag RH1 (D) та Ag RH 1, 2,3 (DCE).

Межі та перешкоди

Результат визначення групи крові повинен прочитати двоє людей і в підсумку повинен бути підтверджений на другому зразку крові.

Для методу аглютинації карт позитивна реакція підтверджується, лише якщо контрольна мікропробірка є негативною. Позитивна реакція оцінюється залежно від розміру аглютинатів від + до ++++.

Помилки читання через технічні помилки:
- брудний скляний посуд; бактеріальне забруднення;
- наявність мікротегів (помилкова аглютинація);
- не спостерігається: пропорції еритроцитів/сироватки крові, порядок крапельного введення аналізів сироватки крові (суперечлива аглютинація), час читання - пізнє читання: сухі краї (помилкова аглютинація), раннє читання (відсутність аглютинації або погана аглютинація).

Помилки через еритроцити

Помилкові аглютинатори

а) Наявність роликів (псевдоаглютинація): використання макромолекулярних розчинів (декстран, HES), порушення згортання крові, неповністю коагульовані зразки крові, гіперфібриногенемія, продукти розпаду фібрину, фібринолітичні агенти, диспротеїнемія, парапротеїнемія, кріоглобулінемія, підвищення артеріального тиску, високий рівень гепарину, протаміну сульфату), ревматоїдні фактори, підвищений рівень холестерину, білірубіну, лейкоцитоз, ферменти лейкоцитів2. Контроль АВ позитивний; промивання еритроцитів дозволяє правильно виконувати сферичну пробу.

б) Самоаглютинація

• Наявність холодних агглютинінів (світло автомобіля позитивне). Зразок крові та реактиви попередньо інкубують при температурі 37 ° C, а тест проводять гарячим.

• Червоні кров’яні клітини, покриті алоантитілами: новонароджене від несумісної вагітності (в резус-системі, АВО),
пацієнту, якому переливали несумісну кров.

• Визначення групи крові по крові, зібраній з пуповини: желатин Wharton, високомолекулярна речовина, яка оточує еритроцити, надає вигляду псевдоаглютинатів. Для його видалення необхідно промити еритроцити щонайменше 6 разів перед визначенням.

• Наявність лікарських імунних комплексів.

в) Поліглютинація

У септицеміях з грамнегативними паличками криптоантигени (Т) піддаються ферментативній дії бактеріальних агентів, які розпізнаються антитілами (анти-Т), присутніми в більшості сироваток людини2. Контроль АВ позитивний.
Відсутні або слабкі аглютинації або подвійний вигляд популяції: аглютинація не тотальна, при наявності вільних еритроцитів (аглютинації з’являються на рожевому фоні):

• стара кров;
• слабкі антигени: новонароджені, недоношені;
• слабкі підгрупи А або В;
• загасання антигенів (при лейкозах, лімфомах, хворобі Ходжкіна);
• пацієнт з групою А або В, якій перелито кров групи О, крововиливи матері та плода;
• наявність у плазмі великої кількості речовини А або В (рак шлунка, підшлункової залози), що нейтралізує досліджувані антитіла (для їх видалення необхідно промити еритроцити);
• наявність химери або мозаїки (винятково, наприклад: постмедулярний алотрансплантат).

Група крові OAB (Бет Вінсент, Симонін); Центральний військовий університетський госпіталь невідкладної допомоги Dr.