Імплантаційний потенціал ембріона при ЕКО - Doctissimo

Який імплантаційний потенціал ембріона? За якими критеріями здійснюється перенесення або заморожування ембріонів у разі ЕКО? Чи можемо ми сприяти імплантації ембріонів? Відповіді.

потенціал

Який імплантаційний потенціал ембріона ?

Під час запліднення in vitro (ЕКО) біологи вивчають ембріональний розвиток та якість ембріона з метою перенесення ембріона в матку: це називається потенціал імплантації.

Це дозволяє вибрати ембріони, які найімовірніше імплантують в утробі майбутньої матері і тим самим оптимізувати шанси на вагітність. Дійсно, не всі ембріони, генеровані ЕКО, придатні для перенесення або заморожування.

Які критерії вибору, які ембріони перенести або заморозити? ?

  • Першим критерієм є морфологічний: ооцити та ембріони класифікуються за зовнішнім виглядом;
  • Другим критерієм є заснований на розвитку ембріона: спостереження за поділом клітин in vitro.

Тільки ембріони із задовільними характеристиками та еволюцією переносяться під час циклів ЕКО або заморожуються для передачі в наступному циклі. Ембріони, які не відповідають цим критеріям, не будуть передані або збережені.

Щоб уникнути ризику багатоплідної вагітності, буде передано один або два доброякісних ембріона під час циклів ЕКО. Якщо кількість отриманих ембріонів перевищує кількість ембріонів, які хочеться передати, закон санкціонує заморожування надмірних ембріонів.

Поява ооцитів

Поява техніки ICSI, що передбачає декоронізацію ооцитів перед ін’єкцією сперми, дозволило спостерігати різні морфологічні ситуації зрілого ооцита, що називається дисморфізми ооцитів.

нормальні ооцити шоу:

  • Прозора, однорідна, рівномірно текстурована цитоплазма;
  • Чистий перивітелліновий простір нормальних розмірів;
  • 1-е нефрагментоване полярне тіло.

Дисморфії несуть:

  • За формою, розміром і кольором ооцитів;
  • Зернистість та однорідність цитоплазми ооцитів;
  • Коркова зона, коли вона позбавлена ​​цитоплазматичних органел;
  • Наявність більш-менш важливих вакуолей, цитоплазматичних включень, рефракційних тіл, некротичних ділянок або скупчення гладкої ендоплазматичної сітки;
  • Розмір перивітеллінового простору та наявність уламків у цьому просторі;
  • Аномалії 1-го полярного тіла (наприклад: фрагментація) та зона pellucida (наприклад: товщина).

Тому за ооцитами потрібно ретельно спостерігати, деякі ооцити можуть накопичувати кілька дисморфізмів. Крім того, у когорті ооцитів окремий ооцит може бути дисморфічним, але може постраждати декілька або всі. Зараз це, здається, прийнято дисморфія ооцитів відповідає за низькі показники запліднення і диски зниження рівня вагітності за ІКСІ, та ан підвищений рівень спонтанних викиднів.

Ваш браузер не може відтворити це відео.

Поява ембріонів

Просте дослідження під мікроскопом при великому збільшенні дозволяє детально спостерігати пронуклеарні структури і кілька останніх публікацій пропонують оглянути морфологія ооцитів може передбачити результат ЕКО.

Через 24 години інкубації, біолог дивиться під мікроскоп, якщо відбувається запліднення. Тоді запліднений ооцит з’являється у вигляді двоядерна клітина (один батьківського походження, другий материнського походження). Цей важливий етап називається "2 проядерна стадія"або 2PN.

Через 48 годин інкубації, зовнішній вигляд заплідненої яйцеклітини змінився. це є складається з кількох клітин і оточений конвертом називається "пелюцидна мембрана". Зараз це ембріон, який можна перенести в утробі матері.

Згідно з усіма останніми публікаціями на цю тему, можна розглянути 3 параметри:

  • Ми можемо спостерігати положення пронуклеусів всередині цитоплазми, а також їх розмір. Два пронуклеуси однакового розміру і добре в центрі цитоплазми вважається нормальною морфологією.
  • Слід оцінити морфологію та орієнтацію ядерців PR. Доброякісні пронуклеуси повинні мати ядерця в однаковій кількості, а їх розподіл повинен бути протилежним до центру зиготи.
  • Нарешті, наявність щільної зони цитоплазми навколо пронуклеусів є хорошим прогнозом для імплантації зигот.

ЕКО «трьох батьків»
Запліднення in vitro (або ЕКО): що це таке ?

Примітка: зиготи з доброякісними PR не обов'язково призводять до доброякісних ембріонів. Морфологія зиготи та морфологія ембріона є двома незалежними параметрами. Саме поєднання двох оцінок (морфологія зиготи + морфологія ембріонів) слід використовувати як показник успішності ЕКО, а не те чи інше.

Кінетика поділу та раннє розщеплення

Більшість центрів ЕКО кодують свої ембріони в день передачі, тобто Через 2-3 дні після пункції ооцитів, і ця оцінка базується на:

  • Швидкість фрагментації зародка;
  • Поява цитоплазми;
  • Наявність багатоядерних бластомерів;
  • Кількість, розмір і регулярність бластомерів.

Ці спостереження дозволяють встановити бал, зародки з високим балом (відсутність фрагментів та багатоядерних бластомерів, рівні та регулярні бластомери, 4-клітинна стадія на D2) мають вищу імплантаційну силу.

Зовсім недавно на це звернули увагу біологи кінетика поділу і, зокрема, раннє розщеплення: Від 24 до 27 годин після запліднення.

Перші спостереження були зроблені піонерською командою Едвардса в 1984 році, яка показала це ембріони, що досягли 8-клітинної стадії через 55 годин після осіменіння, привели до подвоєності частоти вагітності ніж ті, що досягли цієї стадії пізніше (> 56 год після осіменіння).

Оскільки, оцінка моменту першого розщеплення, тобто виявлено, що поява першого мітотичного відділу є корисним параметром для відбору ембріонів з високою швидкістю імплантації і корелювало з якістю ембріона та рівнем вагітності. Причини, чому ембріони раннього розщеплення є якіснішими, не відомі.

Як сприяти імплантації ембріонів ?

Тривала культура

Перед імплантацією ембріони людини, отримані шляхом запліднення in vitro, є переноситься в матку через 2-3 дні після пункції ооцитів, тобто на стадії 4 або 8 клітин після культивування в синтетичному середовищі.

Завдяки розробці відповідних культурних середовищ, можна продовжити крок культури in vitro на два-три дні: до стадія бластоцисти. Це називається a тривала культура. У цьому випадку ембріон перенесеться в матку лише через 5–6 днів після пункції.

Крім синхронізації ендометрій-ембріон, тривала культура дозволяє відбирати найбільш компетентні ембріони з високим потенціалом розвитку.

Допоміжне штрихування

У природних умовах ембріон розвивається до стадії бластоцисти, тоді його порожнина (бластоцель) збільшиться: тоді бластоциста, як кажуть, розширена і має все тонша зона pellucida. Під дією ембріональних лізинів і скорочень самої бластоцисти, zona pellucida розірветься, і ембріон вийде імплантуватися в слизову матки.

Zona pellucida - це безклітинна мембрана, що складається з трьох глікопротеїнів: під час запліднення вона стає більш стійкою до протеаз і відбувається затвердіння цієї pellucida. На додаток до цього фізіологічне затвердіння, затвердіння zona pellucida може бути спричинене культурою ооцита in vitro або може бути обумовлено віком пацієнта.

У 1988 р. Коен та співавт. (12) припускають, що аномалії вилуплення ембріонів можуть бути причиною відмов у імплантації і пропоную зробити допоміжне штрихування, тобто зробити отвір приблизно 20 мкм в зоні пелюциди раннього зародка для полегшення його подальшого вилуплення.

Було розроблено кілька методів:

  • Часткове розсічення зона pellucida: цей механічний процес полягає у закріпленні зони пелюциди ембріона тонкою скляною голкою, а потім придавленні її до утримуючої піпетки, щоб зробити порушення достатнього розміру, щоб отримати нормальний зародковий штрихування.
  • Зонне буріння: Цей хімічний прийом передбачає пробивання отвору в зоні пелюциди ембріона шляхом нанесення розчину тиродної кислоти, що «перетравлює» зону зони мікропіпеткою. Цей метод має перевагу, порівняно з попереднім, у тому, що він робить більші отвори та краще калібрує розмір цих отворів.
  • Лазерний: після використання ультрафіолетових, а потім інфрачервоних лазерів з одноразовими та/або стерилізованими оптичними волокнами, зараз існують лазерні пристрої, спеціально розроблені з метою допоміжного штрихування.

У літературі повідомляється про багато досліджень з змінні результати з чого важко зробити тверді висновки про фактичну ефективність спалахів, яким надається допомога. Однак аналіз рандомізованих серій, що порівнює контрольну групу та групи, які отримували лікування, показує значну користь цієї методики за кількома показаннями.

  • По-перше, повторні збої імплантації після декількох спроб ЕКО з якісним перенесенням ембріонів: застосування допоміжного висиджування у жінок, які перенесли не менше 3 ембріонів без вагітності, покращує рівень імплантації ембріонів (14% проти 6% для контрольної групи) та клінічну частоту вагітності на перенесення (40% проти 16% для контролю).
  • З іншого боку, пацієнти віком від 38 років та/або з високим рівнем ФСГ: допоміжне вилуплення всіх ембріонів жінок із вихідним FSH, що перевищує 15 мМО/мл, на 3 день циклу дозволяє отримати коефіцієнт імплантації ембріона 26% проти 10% для контрольної групи. Подібним чином, у жінок старше 38 років допоміжне вилуплення всіх їх ембріонів збільшує швидкість імплантації.
  • Нарешті, товщина зональної оболонки або морфологія ембріона: коли товщина зони pellucida більша або дорівнює 15 мкм або коли ембріон має фрагменти цитоплазми або менше 5 клітин на D3, допоміжне вилуплення дозволяє отримати більш високі показники імплантації: 25% проти 18% у контролі групи.