Клінічна лабораторна діагностика Перетравлення органів, метаболізм - PDF Безкоштовно завантажити
Клінічна лабораторна діагностика Перетравлення органів, метаболізм М. Штірн, Р. Гофман-Леманн Вецуйський факультет Цюріхського університету http://www.epi4dogs.com/ Собака Клер
Зміст порушення травлення, порушення всмоктування (функція підшлункової залози та кишечника) дослідження фекалій абсорбційні тести (ксилоза кінь) трипсиноподібна імунореактивність (TLI) вітамін В12, фолієва кислота панкреатит функція печінки сторінка 2
Тематичне дослідження Джек Рассел тер'єр Круна жінка, 2 роки, маса тіла 6 кг Анамнез Велика втрата ваги (3,5 кг) Багато екскрементів, часто, кашоподібні, світло-коричневі, смердючі, хронічна діарея Поліфагія Слабка, не любить ходити Клінічне обстеження Середній стан Апатичний живіт напружений Символічний Джек Рассел Сторінка 3
Клінічна хімія Cruna F2 Матеріал гемолітичний; Помічені вимірювання можуть бути порушені. сторінка 5
Клінічна хімія Cruna ff F3 матеріал гемолітичний; Помічені вимірювання можуть бути порушені. сторінка 6
Інтерпретація лабораторних показників пацієнта, преаналітика. Чи є у пацієнта чи лабораторних показників відхилення від норми? Вид, вік, раса, попереднє лікування, гострий стрес? Гемоліз, ліпемія тощо? Об’єднати лабораторні показники у значущі групи. Органоспецифічні зміни? Покласти в клінічний контекст Чи є пояснення змінам? Розробити план діагностики на основі Леслі С Шаркі, Університет Міннесоти: Оптимізація використання діагностичної клінічної біохімії, 13-та конференція ESVCP/ECVCP, 2011 р. Трініті-коледж, Дублін, Ірландія Сторінка 7
Інтерпретація лабораторних значень (не вичерпна) Лейкоцитоз, лімфоцитоз, незначний моноцитоз Збудження? Легка нормоцитарна, нормохромна анемія гіпопроліферативна? хронічні події (запалення, інфекція), нирки (еритропоетин), гіпометаболічні (щитовидна залоза, дефіцит білка) АЛАТ та АСТ підвищений гемоліз порушує роботу печінки? (Лекція печінки) лужна фосфатаза помірно підвищена - (лекція печінки; жовчна протока, кишечник, нирка, остеобласти; собака: пов'язана з кортикостероїдами, потім сильно підвищена, часто плюс лімфопенія) амілаза знижена (підшлункова залоза, нирки, печінка, наступна лекція, панкреатит. Важливе збільшення; Зниження, як правило, не у собак) сироваткові білки зменшуються, нижня межа альбуміну збільшує втрати (шлунково-кишковий тракт, нирки), зменшується продукція (печінка, мальабсорбція)? Рідко знижується рівень холестерину, порушення травлення, порушення всмоктування
Можливі причини бактеріальної інфекції для схуднення? Вірусна інфекція? Паразитози? Порушення всмоктування в тонкому кишечнику? Розлади травлення? Порушення функції підшлункової залози? (екзокринна недостатність підшлункової залози, ЕПІ) запалення підшлункової залози? Розлад дренажу жовчі? Порушення травлення, порушення всмоктування Якщо Круна підозрює проблему підшлункової залози або хронічну хворобу кишечника, проведіть подальші тести. Для цього на наступний день, сторінка 9, тверезо познайомтеся з собакою
Порушення травлення Екзокринна недостатність підшлункової залози Недостатня секреція ферментів підшлункової залози 14 травня 2013 року шлунково-кишковий тракт, 2-й ЖК, Регіна Хофманн-Леманн сторінка 10
Травні ферменти підшлункової залози Ферменти підшлункової залози відіграють важливу роль у травленні: вуглеводи а-амілази (полісахариди), жири ліпази (у гліцерині та жирних кислотах; потребує емульгування жовчними кислотами) білок трипсину (ендопептидаза, аргінін, лізин) білок хімотрипсипда А білок карбоксипептида А Екзопептидаза, кінець карбоксилу) еластаза еластин ДНКаза, ДНК РНКаза, РНК вивільняються у вигляді неактивних форм (зимогени), розщеплення в кишечнику, щоб уникнути самоперетравлення сторінка 11
Порушення травлення Екзокринна недостатність підшлункової залози Недостатня секреція ферментів підшлункової залози для собак та котів! Не у коней та великої рогатої худоби Форми: - Неповнолітні через ацинарну атрофію (німецька вівчарка) - Хронічний панкреатит - руйнування екзокринної та, можливо, ендокринної підшлункової залози - закупорка проток підшлункової залози 14.05.2013 травного тракту, 2-й JK, Регіна Хофманн-Леманн сторінка 12
Кишкова мальабсорбція Локальна або дифузна мальабсорбція різних поживних речовин (наприклад, вуглеводів, жирів, білків) або певних поживних речовин (наприклад, кобаламіну) Причини: - Запальна - Новоутворююча - Лімфангіектазія 14 травня 2013 р. Шлунково-кишковий тракт, 2-й JK, Регіна Хофманн-Леман, сторінка 14
Дослідження калу Макроскопічне дослідження калу Колір Глина кольорова Вказівка на порушення відтоку Жовте світло Вказівка на кістки, антибіотики, екзокринна недостатність підшлункової залози Чорне Вказівка на кровотечу Проксимальний травний тракт Домішка крові Вказівка крові з дистальних відділів кишечника Запах Консистенція Паразитологічне дослідження калу Див. Паразитологію Кілька разів на сторінці 15
Дослідження калу Мікроскопічне обстеження калу (зменшується значення) Напівкількісні обстеження для виявлення жиру, крохмалю, м’язових волокон стор. 16
Крапельки жиру в калі, колір Судану (червоний) Жирові грудочки, колір Судану (червоний) Зерна крохмалю, калу, колір Люголя (синьо-чорний) сторінка 17
Дослідження калу Мікроскопічне обстеження калу (зменшується значення) Напівкількісні обстеження для виявлення жиру, крохмалю, м’язових волокон »Історичні методи» Виявлення трипсину за допомогою рентгенівського плівкового тесту на розщеплення Шар желатину не перетравлюється Шар желатину перетравлюється (фермент присутній) сторінка 18
Дослідження калу Мікроскопічне дослідження калу (зменшується значення) Напівкількісні обстеження для виявлення жиру, крохмалю, м’язових волокон »Історичні методи» Виявлення трипсину за допомогою рентгенівського плівкового тесту на розщеплення Виявлення трипсину за допомогою желатинового тесту Виявлення ліпази за допомогою тесту на кукурудзяну олію Визначення хімотрипсину за допомогою тесту PABA
Дослідження калу: прихована кров свіжий кал. Не годуйте м'ясо за 3 дні до цього (м'ясо містить гемоглобін та міоглобін -> помилково позитивний результат) Тестовий лист, наприклад, тест Hemo-FEC (Roche), Haemoccult (Beckmann Coulter). Людина: Скринінг на рак товстої кишки Принцип: Пероксидазоподібна дія гемоглобіну Хромоген + H 2 O 2 + пероксидаза -> зміна кольору сторінка 25
Порушення травлення, порушення всмоктування - лабораторна діагностика Диференціювання екзокринної недостатності підшлункової залози (ЕПІ) та первинних захворювань кишечника, часто важко диференціюючих ЕПІ, може призвести до змін у травленні в проксимальній частині тонкої кишки, наприклад, надмірне розростання бактерій. Сьогодні у собак та котів особливо біохімічна група: трипсиноподібна імунореактивність (TLI), фолієва кислота, вітамін B12 (кобаламін) TLI знижений: Переконливі докази EPI Фолієва кислота збільшена та/або вітамін B12 знижена з TLI у контрольному діапазоні: змінена проксимальна частина тонкої кишки? Тести на всмоктування: в минулому також на дрібних тварин; все ще з конем сьогодні сторінка 26
Трипсиноподібна імунореактивність (TLI) Функціонуюча підшлункова залоза виділяє в кров невелику кількість трипсиногену, трипсину та його фрагментів. Їх (включаючи трипсин, зв’язаний з інгібіторами протеази), можна виявити як трипсиноподібну імунореактивність у крові. Якщо підшлункова залоза недостатня (EPI), TLI в крові низький. Сторінка 30
Фізіологічні процеси, що впливають на TLI (та PLI) TLI = Трипсиноподібна імунореактивність PLI = Імунореактивність ліпази підшлункової залози (див. Наступний урок) TAP = Пептид активації трипсиногену Stockham and Scott, 2008: Veterinary Clinical Pathology стор. 31
Методи виявлення імунологічного аналізу TLI, трипсин імунологічно не дуже консервативний, тому видоспецифічні тести Раніше RIA (чутливий і специфічний), тепер також ІФА, для собак також імунохроматографія (швидкий тест) EPI собаці: TLI 2,5 мкг/л 2,5 5,0 мкг/л = сіра зона EPI кішка: TLI 8,0 мкг/л 8,0 12,0 мкг/л = сіра зона Матеріал: переважна сироватка. TLI стабільний при кімнатній температурі (2 тижні). Фактори, що руйнують: ліпемія, тварина повинна бути тверезою! Сторінка 32
Фолієва кислота та вітамін В12 Фолієва кислота Деякі кишкові бактерії можуть синтезувати та виділяти вітаміни, які всмоктуються в кишечнику (проксимальна кишка). Наприклад: фолієва кислота. У разі переростання бактерій можливе збільшення виробництва фолієвої кислоти і, отже, підвищення рівня фолієвої кислоти в крові. Вітамін B12 (кобаламін) Деякі бактерії споживають вітамін B12. У разі переростання бактерій споживання вітаміну В12 у кишечнику збільшується та/або поглинається всмоктування вітаміну В12, зменшуючи тим самим вітамін В12 у крові. Вітамін В12 всмоктується лише в дистальній частині тонкої кишки та клубової кишки. Сторінка 33
Пояснення фолієва кислота, вітамін B12 Cbl = кобаламін, вітамін B12 фолат = фолієва кислота IF = внутрішній фактор, що виробляється в підшлунковій залозі (собака та кішка) та шлунку (собака) R-білок = кобалофілін/гаптокоррин, що виробляється в шлунку Транс = транскобаламін 2, транспортні білкові бактерії потрібні бактерії кобаламіну виробляють фолієву кислоту Багато бактерій (переростання бактерій): більше споживається кобаламіну, виробляється більше фолієвої кислоти Дефіцит кобаламіну: кобаламін необхідний для каталізації фолієвої кислоти в її біологічно активній формі. Дефіцит кобаламіну може призвести до функціональної недостатності фолієвої кислоти Стокхем і Скотт, 2008 Ветеринарна клінічна патологія
Взаємозв'язок між вітаміном B12 та фолієвою кислотою Stockham and Scott, 2008 Ветеринарна клінічна патологія Вітамін B12 (кобаламін) є кофактором для синтезу метіоніну і служить реципієнтом метильної групи N5-метилтетрагідрофолату. У разі дефіциту вітаміну B12 метильна група не переноситься і виникає в Клітина до дефіциту тетрагідрофолату 5-метилтетрагідрофолат також вимірюється як фолієва кислота, отже, функціональний дефіцит фолієвої кислоти, а не абсолютна сторінка 35
Вимірювання вітаміну В12 Конкурентні аналізи зв’язування білків Аналізи людини не завжди надійні для інших видів; Наприклад, через зв’язуючі білки кобаламіну в сироватках собак та котів. Матеріал: сироватка, не стабільна при кімнатній температурі! в 4 1 день; на -20 6-8 тижнів відправляти з виключенням світла Збільшення: зазвичай приходить не раніше. За винятком добавок. Або при некрозі клітин печінки. Клітини печінки зберігають вітамін В12. Приниження: Тільки тоді, коли пам’ять організму витрачається. Це швидше з тваринами, ніж з людьми. Сторінка 36
Вимірювання фолієвої кислоти Вимірювання загальної фолієвої кислоти (включаючи N5-метилтетрагідрофолат). Фолієва кислота не обов'язково знижується при вимірюванні, хоча функціональний дефіцит (тетрагідрофолату), спричинений дефіцитом вітаміну В12. Конкурентний аналіз зв'язування з білками (β-лактоглобулін) Матеріал: Сироватка, не стабільна при кімнатній температурі! в 4 1 день; у -20 6-8 тижнів подання з виключенням легкого гемолізу турбує! Фолієва кислота витікає з еритроцитів. Сторінка 37
Інтерпретація TLI, вітамін B12, фолієва кислота TLI фолієва кислота вітамін B12 ò ò (кішка, частково собака) Екзокринна недостатність підшлункової залози (EPI) ò (проксимальний GI) ò (дистальний GI) синдром мальабсорбції - +/- ò переростання бактерій тонкої кишки сторінка 38
Тест на всмоктування: тест на ксилозу кінь Функціональні ентероцити транспортують ксилозу через слизову (дванадцятипалу кишку, тонку кишку) у кров (активний транспорт). Виведення через нирки Субнормальні показники підтримують діагноз мальабсорбції. Процедура: Коні голодують протягом 15 годин, повідомте лабораторію, вага коня (ксилоза: 0,5 г/кг маси тіла; 0,1 г/мл у теплій воді) бере кров у фторидні пробірки перед введенням ксилози через NSS і кожні 30 хвилин після 4 години сторінка 39
Кінь для випробування ксилози Здоровий кінь: Найвищі показники через 1-2 години 15 мг/дл вище базового значення мг/дл кривої дзвоноподібних хвилин Значення дещо залежать від дієти коня. Вищі піки, багаті деревною щепою, ніж високоенергетичне годування Плоска крива через зменшене всмоктування у разі захворювань тонкої кишки, неповного транспортування до кишечника (блювота, порушення спорожнення шлунка) або швидкого кишкового транзиту (діарея) Вплив СКФ на швидкість виведення (затримка елімінації) сторінка 40
Фолієва кислота, Vit B12, TLA Cruna (зразки крові 2 день натщесерце) 7,7-24,2 ð ð Сумісний з екзокринною недостатністю підшлункової залози (EPI) (TLI 2,5 мкг/л) Дефіцит вітаміну B12, вторинний щодо EPI сторінка 43
Терапія Круна Помістіть на корм порошок ферменту підшлункової залози. Заміна відсутніх ферментів. Ін’єкція вітаміну В12 (Вітарубін). Усунення дефіциту. Метронідазол (антибіотик) проти потенційного запалення та розростання бактерій у кишечнику. Cruna збільшує кількість повторних ін’єкцій вітаміну B12, регулярний контроль терапії EPI протягом усього життя! Сторінка 44