Молекулярно-генетичні та клінічні дослідження непереносимості лактози (гіполактазія) - PDF безкоштовно

З Інституту клінічної хімії та лабораторної медицини медичного факультету Ростокського університету Директор: проф. мед. Пітер Шуфф-Вернер Молекулярно-генетичні та клінічні дослідження непереносимості лактози (гіполактазія) Інавгураційна дисертація на здобуття вченого ступеня доктора медичних наук медичного факультету Ростокського університету, представлена Йоганнесом Фут, який народився 20 лютого 1981 року в Потсдамі Росток 2008 р. Urn: nbn: de: gbv: 28-дисс2010-0009-9

Декан: проф. мед. Еміль Рейзінгер 1-й рецензент: проф. мед. Стефан Лібе (Клініка внутрішніх хвороб/Кафедра гастроентерології/Університет Ростока) 2-й рецензент: проф. мед. Гартмут Ганс-Юрген Шмідт (Експериментальна трансплантаційна гепатологія/Westfälische Wilhelmsuniversität Münster) 3-й рецензент: Priv.-Doz. Лікар. мед. Майкл Штайнер (Інститут клінічної хімії та лабораторної медицини/Університет Ростока) Місце дисертації: День державного захисту Ростока: 27 травня 2009 р.

Зміст Список малюнків Список таблиць Список скорочень 1. Вступ.1 1.1 Історичний конспект. 1 1.2 Класифікація лактазної недостатності. 2 1.3 Фізіологія та патофізіологія мальабсорбції лактози.3 1.4 Клініка мальабсорбції лактози. 6 1.5 Діагностика мальабсорбції лактози. 8 1.6 Терапія мальабсорбції лактози ... 9 1.7 Первинна недостатність лактази у дорослих. 11 1.7.1 Епідеміологія. 13 1.7.2 Молекулярна генетика 14 2. Завдання. 17 3. Матеріал та методи 18 3.1 Тестування людей та пацієнтів 18 3.2 Виділення ДНК. 18 3.3 Генотипування. 19 3.3.1 PCR-RFLP. 19 3.3.2 ПЛР у режимі реального часу (LightCycler). 23 3.4 Тест на дихання на лактозу H2. 27 4. Результати. 33 4.1 Епідеміологічне дослідження. 33 4.1.1 Предмети. 33

4.1.2 Генотипування поліморфізму LCT-13910 у когорті донорів крові Ростока. 33 4.1.3 Генотипування поліморфізму LCT-13910 у південнокорейській когорті. 34 4.1.4 Генотипування поліморфізму LCT-13910 за допомогою ПЛР у реальному часі (LightCycler). 34 4.2 Клінічне дослідження. 34 4.2.1 Пацієнти. 34 4.2.2 Поширеність H2-невиробників. 36 4.2.3 Виробники H2: результати тесту на дихання H2 та генотипування. 36 4.2.4 Невиробники H2: клінічні дані та генотипування. 38 5. Обговорення. 40 5.1 Епідеміологічне дослідження. 40 5.2 Клінічне дослідження. 47 6. Підсумок. 59 7. Бібліографія. 61 теза Декларація про незалежність резюме Подяки

Список рисунків 1.1 Фізіологія всмоктування лактози. 5 1.2 Патофізіологія мальабсорбції лактози. 6 3.3 Виявлення трьох генотипів поліморфізму LCT-13910. 23 3.4 Принцип флуоресцентного резонансного переносу енергії (FRET). 26 3.5 Ілюстрація специфічних для алеля кривих плавлення однонуклеотидного поліморфізму LCT-13910. 3.6 Схема оцінки на основі тесту на дихання H2. 29 3.7 Схема збору висновків із нинішнім статусом невиробника H2 30 3.8 Анкета для запису анамнестичних даних. 31 3.9 Журнал подій для реєстрації скарг під час проведення тесту на вдихання лактози H2. 32 5.10 Поширеність первинної недостатності лактази у дорослих у Європі. 42

5.18 Потенційні причини хибнопозитивних та хибнонегативних результатів тесту на дихання H2. 51

Список скорочень змінного струму ДНК дНТФ аденина цитозин дезоксирибонуклеїнової кислоти дезоксинуклеозидов трифосфат ЕДТА етилендіамінтетраоцтової кислоти F вперед (прямий праймер) FLU флуоресцентний барвник FRET флуоресцентного резонансного переносу енергії G гуанін GLUT глюкози переносник Lactosetransporter Laktoset-Laktolerase Laktoset-Laktolerase Laktoset-Laktolerase Laktosaktin-Laktor-Laktolerase Laktosaktin-Laktor-Laktorase Lactoshlactor-Lactoscot-Lactor-Lactolase Lactoscot-Lactor-Lactolase Lactoscentrase Lactoscot-Lactolactase Lactoshromase Lactoshromase Lactoshrolase Lactosity-Lactor-Lactorase Lactoshromase дефіцит підтримки Na натрій негативний (контрольний) ppm частин на мільйон ПЛР ланцюгова реакція полімерази R зворотний (зворотний праймер) довжина фрагмента рестрикції RFLP поліморфізм об/хв Кількість в хвилину SGLT Натрійзалежний транспортер глюкози T Тимін WT дикого типу

Лактаза тонкої кишки Епітелій тонкої кишки Кишковий транзит Лактоза Глюкоза + галактоза SGLT1 Товста кишка Епітелій товстої кишки Кров Лактоза H 2 O H 2 O Бактеріальна ферментація Коротколанцюгові жирні кислоти Бактеріальні токсини H 2 CO 2 Flatus Рисунок 1.2: Патофізіологія мальабсорбції лактози. 1.4 Клініка мальабсорбції лактози Симптоми, що виникають після прийому їжі, що містить лактозу, є неспецифічними і включають біль у животі, бороборігму, метеоризм та діарею, а іноді і запор. Крім того, повідомляється про низку системних скарг, причиною яких є, як вважають, токсичні метаболіти, що виникають під час бактеріального метаболізму лактози (табл. 1.1). 6-й

Лактоза повинна бути вказана у списку інгредієнтів. Середній вміст лактози у деяких вибраних продуктах харчування зведений у таблиці 1.2. Таблиця 1.2: Вміст лактози в молоці та молочних продуктах (на основі Реннера та Ренц-Шауена 1994). Молоко або молочний продукт Вміст лактози (г на 100 г) Споживане молоко (свіже молоко, UHT молоко) 4,8-5,0 Згущене молоко (4-10% жиру) 9,3-12,5 Сироватка, сироваткові напої 2,0-5, 2 сухого молока 38,0-51,5 вершкового масла 0,6-0,7 кварка (10-70% жиру в сухій речовині) 2,0 8,0 нежирного кварку 4,1 йогурту 3,7-5,6 твердого, Напівтвердий м’який сир