МОРФОЛОГІЧНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ КРОВНИХ ПЛОДІВ Medlife

Морфологічне дослідження пофарбованого мазка крові Мей Грунвальд Гімза оцінює:

кровних

• еритроцити: порушення розміру, форми, структури, включень еритроцитів, вмісту гемоглобіну;

• лейкоцити: структурні відхилення, наявність включень, наявність атипових, незрілих форм;

• тромбоцити: порушення розміру, форми, структури, розташування на мазку.

Дослідження мазка крові проводиться за прямим проханням клініциста, а також за попереджувальними повідомленнями гемолейкограми, проведеними на автоматичному гематологічному аналізаторі (наприклад, бласти, атипові лімфоцити, ліве відхилення, еритробласти тощо).

Морфологічне дослідження еритроцитів

Морфологічно нормальні еритроцити виглядають у вигляді: нормохромних, нормоцитарних, двовгнутих дископодібних, без включень і відпалених. Ряд аномалій еритроцитів можна виявити шляхом мікроскопічного дослідження мазка крові, як описано нижче [2,11]:

Морфологічна аномалія

Патофізіологія

Супутні захворювання

Важка анемія (наприклад, дефіцит заліза, гемолітична та ін.)

Еритроцити зі спікулами (нерівномірне розширення цитоплазми та щільний центр)

Зміна мембранного ліпідного шару

Абетіліпопротеїнемія, порушення паренхіми печінки, постпленектомія.

Кодоцити або еритроцити "в ціль"

Еритроцити як ознака стрільби по мішені, гіпохромні

Збільшення надмірності клітинної мембрани

Хвороби печінки, таласемія, постпленектомія, гемоглобін С

Еліптична форма еритроцита

Аномальні білки цитоскелета

Ехіноцити або червоні кров’яні тільця, що мають крен

Еритроцити з короткими розширеннями/колосками, з центральною блідістю

Зміна ліпідів мембрани

Зазвичай це артефакти. Рідко: уремія, карцинома шлунка, дефіцит піруваткінази.

Блідість центральних еритроцитів

Знижений синтез гемоглобіну

Залізодефіцитна анемія, сидеробластика, таласемія

Включення: тіла Хауел-Джолі

Включення, як правило, унікальні, невеликі, круглі, базофільні

Постпленектомія, мегалобластна анемія, гемолітична анемія

Кругові включення (кільце)

Постпленектомія, мегалобластна анемія, гемолітична анемія

Малі еритроцити діаметром 8 мкм VEM> 100 фл

Молоді еритроцити, порушення дозрівання еритроцитів

Мегалобластна анемія, алкоголізм, захворювання печінки, гемолітична анемія (ретикулоцити), гіпотиреоз та ін.

Еритроцити з діаметром> 9 мкм, овальні

Сірі або сині еритроцити

Рибосомний матеріал (молоді еритроцити)

Опадання рибосомної РНК

Отруєння свинцем, таласемія

Розподіл еритроцитів подібний до статури монети

Агрегація еритроцитів парапротеїнами

Парапротеїнемія (мієлома, макроглобулінемія Вальденстрема)

Викривлені, фрагментовані еритроцити

Механічні спотворення в мікроциркуляції (відкладення фібрину, механічні протези)

Мікроангіопатична гемолітична анемія (CID - дисемінована внутрішньосудинна коагуляція, PTT - тромботична тромбоцитопенічна пурпура, клапанні протези, важкі опіки)

Сферичні еритроцити, без центральної блідості, меншого діаметру

Зменшення поверхні мембрани

Спадковий сфероцитоз, імунна гемолітична анемія

Дефект мембрани з аномальною катіонною проникністю

Спадковий стоматоцитоз, імунна гемолітична анемія

Молекулярна агрегація гемоглобіну S

Морфологічне дослідження тромбоцитів

Оцінюється морфологія тромбоцитів та оцінюється кількість тромбоцитів на мазок (напівкількісна оцінка). Тромбоцити - це синьо-блакитні фрагменти цитоплазми з дрібними азурофільними гранулами, діаметром 2-4 мкм, змінної форми (часто сферичної або еліпсоїдної форми). Передбачувана кількість тромбоцитів на мазок є нормальною, якщо: їх наявність становить 5 - 15/поле занурення або 1 тромбоцит при 10-20 еритроцитах. [11]

  1. Мегатромбоцити (діаметр> 4 мкм)
    1. Прискорене виробництво тромбоцитів
    2. Дефіцит В12
    3. Мієлопроліферативні синдроми
    4. Вроджена тромбоцитопенія (синдром Бернарда-Соульє)
    5. Імунна тромбоцитопенічна пурпура (ІТП)
  2. Фрагменти мегакаріоцитів
    1. мієлофіброз
  3. Гіпогранулярні тромбоцити
    1. Мієлодиспластичний синдром
    2. мієлофіброз
  4. Тромбоцити з химерними формами, з грубо згрупованими грубими гранулами:
    1. Мієлопроліферативні захворювання
    2. спленектомія

Морфологічне дослідження лейкоцитів.

Найбільш поширені морфологічні відхилення лейкоцитів реактивні, викликані інфекціями або токсичністю деяких хімічних речовин (наприклад, ліків); рідше зустрічаються структурні зміни, викликані аномальним дозріванням (наприклад, асинхронія нуклео/цитоплазми) або вродженими аномаліями.

● Дегенеративні зміни:

  • Некротичні/пікнотичні клітини (зразок старше 4 годин; уремія; сепсис)
  • Вільні ядра (хронічний лімфолейкоз, гострі лейкозні пухирі, артефакт)

● Тіла Барра - ядерний матеріал, прикріплений до ядра, у формі “барабанної палички”, яка з’являється лише у самок (з домінантною Х-хромосомою)

● Гіперсегментовані нейтрофіли (> 5 часток), пов’язані з:

  • мегалобластна анемія/дефіцит фолатів
  • хіміотерапія проти фолатів (наприклад, метотрексат)

● Гіпогегментовані нейтрофіли (2 частки)

  • Аномалія Пелгер-Хуета (спадкова)
  • Нейтрофіли псевдо-Пельгера (мієлодиспластичний синдром)

● Гіпогранулярні нейтрофіли: нейтрофіли, що експресують рідкісні грануляції та/або відсутність внутрішньоцитоплазматичних грануляцій.

  • асоційований з мієлодиспластичним синдромом

● Аномалія Вільхи-Рейлі: великі, помітні азурофільні та базофільні гранули, подібні до токсичних гранул (можуть бути в лімфоцитах та моноцитах)

  • спадкові, пов’язані з аномаліями кісток і хрящів
  • при мукополісахаридозі

● Синдром Чедиака-Хігаші: еозинофільні включення (гігантські лізосоми), присутні в: Лейкоцити

  • Спадкові: частковий очний та шкірний альбінізм, сприйнятливість до бактеріальних інфекцій та дискразія крові.

● Нейтрофіли з токсичними грануляціями (стійкість первинних грануляцій, часто пов’язаних з тілами Дьоле та вакуолями)

  • Важкі інфекції або пошкодження тканин
  • Ліки, особливо фактори росту гранулоцитів

● Тіла Дьоле (маленькі, сині/сірі, овальні або неправильні цитоплазматичні включення)

  • бактеріальні інфекції, скаралатин, опіки, травми, вагітність, цитотоксичні препарати
  • Великі тіла Дьоле можуть з’являтися внаслідок спадкової аномалії Мей-Геггліна.

● Інтрацитоплазматичні вакуолі (містять ферменти, що відіграють роль у фагоцитозі)

● Еритрофагоцитоз або бактеріофагоцитоз - явища, характерні для моноцитів або нейтрофілів (обидві клітини мають рецептори IgG/C3)

  • гаряча аутоімунна гемолітична анемія
  • дисемінований червоний вовчак
  • сепсис

● Атипові/реактивні лімфоцити з’являються у відповідь на різні вірусні або невірусні подразники

Морфологічний аспект: неправильна форма цитоплазми та/або ядра, рясна цитоплазма, базофіл, інтрацитоплазматичні вакуолі, тонкий хроматиновий малюнок, іноді з нуклеолярним малюнком (схожий на бласти)

  • вірусні інфекції (Епштейн-Барр, цитомегаловірус, вірусний гепатит)
  • лікарські реагенти або невірусні подразники (наприклад, токсоплазмоз)

● Плазмоцито-лімфоцити (клітина Турка) є проміжними формами перетворення В-лімфоцитів у плазматичні клітини. Морфологічний аспект: ядро ​​центральне, злегка ексцентричне, інтенсивно базофільна цитоплазма менш поширена.

  • виникає в периферичній крові після інтенсивної антигенної стимуляції (наприклад, після вакцинації)
  • при макроглобулінемії Вальденстрема - як злоякісні клітини

● Тіла Рассела: рожеві, червоні або безбарвні включення в цитоплазмі плазматичної клітини, що беруть участь у виробництві імуноглобулінів (клітина Мотта)

  • зазвичай зустрічається при розсіяній мієломі

● Плазмоцит з цитоплазмою “у полум’ї”: плазматична клітина з червоною периферією

  • зустрічається при множинній мієломі з IgA

● Клітина Рідера: ядро ​​з анчоусом

  • неходкінські лейкозні лімфоми, деякі гострі лейкози

● тіла Ауера: фіолетово-червоні включення овально-витягнутої форми, що з’являються лише в цитоплазмі мієлоїдних бластів; Тіла Ауера утворюються шляхом злиття первинних пероксидазо-позитивних грануляцій.

  • наявність тіл Ауера говорить про гострий мієлоїдний лейкоз
  • Кілька тіл Ауера з’являються при гострому промієлоцитарному лейкозі

Мазок з периферичної крові рекомендується із загальним аналізом крові !

  • Оцінка морфології еритроцитів при анеміях.
  • Оцінка морфології тромбоцитів при тромбоцитопеніях
  • Кількісна оцінка (%) та морфологічний опис вибухів
  • Кількісне визначення (%) та опис атипових лімфоцитів при синдромах мононуклеозу
  • Опис структурних аномалій лейкоцитів, кількісне визначення лівого відхилення формули лейкоцитів, уточнення типів незрілих гранулоцитів.

  1. Артефакти, спричинені неправильною технікою розтягування мазка
  • Аномальний розподіл лейкоцитів з розташуванням великих лейкоцитів по краях мазка і в бахромах.
  • Через неправильне відображення лейкоцити по краях можуть здаватися меншими за норму .
  • Механічне руйнування клітин з наявністю вільних ядер на мазку, за відсутності справжньої крихкості клітини (як при лейкеміях).

2. Артефакти, спричинені неправильною технікою фарбування

  • Клітини надмірно забарвлені в синій колір: занадто довгий час фарбування, занадто лужний буфер (неправильно підготовлений/старий), старі мазки або занадто густі мазки.
  • Ділянка між клітинами забарвлена: неадекватне промивання леза, можлива парапротеїнемія.
  • Забарвлення виглядає занадто рожевим/червоним: буфер занадто кислий, занадто короткий час фарбування/надмірне миття леза 4; 5 .

3. Артефакти, викликані тривалим впливом ЕДТА (старі зразки)

  • Артефакти еритроцитів: червоні кров'яні клітини, "цільові" еритроцити, стоматоцити.
  • Артефакти тромбоцитів: можуть виглядати збільшеними, менш кольоровими та без характерних азурофільних грануляцій.
  • Артефакти лейкоцитів: вакуоляція/розриви цитоплазми, ядерний каріорексис. Моноцити з’являються з численними вакуолями та/або нерегулярно пелюстковим ядром.
  • Реактивні лімфоцити продовжують морфологічно змінюватися, коли вони контактують з ЕДТА, ядро ​​стає звивистим, а цитоплазма збільшується та/або вакуолізується (їх можна сплутати з клітинами лімфоми).
  • Ядро лімфоплазмоцитів може стати звивистим/"конюшиноподібним"