Очищення моноклональних антитіл SpringerLink

Резюме

Імуноглобулін із сироватки миші, що несе асцит, яка потрапила в асцит пухлини, може імітувати реактивність mAb з антигеном, проти якого миша раніше була імунізована природним шляхом. На практиці це має особливе значення, коли mAb присутній в асцитній рідині в низькій концентрації або має лише низьку спорідненість до свого антигену і тому не може використовуватися у великих розведеннях. Зразки сироватки від миші, отримані до ін'єкції клітин гібридоми, можуть бути використані в якості контролю в таких випадках.

У разі прямого маркування (наприклад, біотином, пероксидазою або фторхромом) недостатньо чистого препарату mAb, інші білки (наприклад, інсулін або трансферин тощо) також можуть бути мічені. Якщо антитіло зараз використовується, наприклад, для дослідження клітин на експресію антигену, який розпізнається моноклональним антитілом, клітини, які мають рецептори до забруднюючого білка (наприклад, рецептори трансферину), також можуть бути позначені.

Особливі труднощі виникають при використанні препарату mAbs у біологічних тест-системах. Очікувана активність антитіла може бути змінена забрудненням імунних медіаторів. Оскільки багато з цих імунних медіаторів ще недостатньо чітко визначені, не можна виключати, що вони все ще присутні в препараті навіть після ретельного очищення антитіла. У таких випадках антитіло з того самого підкласу імуноглобулінів, яке не реагує з відповідним антигеном, але походить від того ж злиття, яке готували та очищали в однакових умовах, могло б служити контрольним антитілом.

---