Швидкість зараження молодих рослин грибами, що відповідають за хвороби деревини

зараження

Теми

Роль багатьох видів грибів, які беруть участь у захворюваннях деревини виноградної лози, була предметом численних досліджень протягом останніх двадцяти років. Навіть якщо збитки зазвичай вважаються результатом взаємодії між сортовою сприйнятливістю, обтяжуючими стресовими факторами, кліматичними умовами та дією самих грибів, спостереження симптомів на ділянках, іноді вирощених на питання про можливу участь рослинного матеріалу. Роботи, проведені у Франції та за кордоном, вивчали забруднення рослин у розплідниках і, ширше, роль рослинного матеріалу у розповсюдженні патогенних мікроорганізмів. Таким чином неодноразово було показано, що багато грибів поширюється протягом усього процесу розвитку рослин. З моменту надходження розплідника на живці щеплень та підщепи у дуже мінливих кількостях, але головним чином на корі, вони також знаходяться всередині деревних тканин, і підщепи здаються на цьому рівні більш забрудненими, ніж щеплення.

Численні дослідницькі групи провели випробування джерел посіву в розпліднику, рівні забруднення та задіяних грибів, ключові стадії та шляхи проникнення в живці живців, а також `` вивчення різних розчинів для дезінфекція деревини та рослин та біоконтроль. Ці різні роботи підтвердили:

  • поширення багатьох грибів,
  • основна роль фаз регідратації та стратифікації,
  • обмежена ефективність хімічних або фізичних засобів контролю з точки зору дезінфекції
  • і, зрештою, ефективне забруднення молодих рослин на різних і непередбачуваних рівнях.

Однак на сьогоднішній день жодне дослідження не дозволило порівняти доведену присутність цього первинного посіву та подальші симптоми, що спостерігаються на полі. Подібним чином, питання щодо кінетики забруднення після посадки зовнішнім середовищем не були розглянуті або дуже мало. Однак кілька попередніх результатів порівнянь між одними і тими ж ділянками живців щеплень, вирощених у теплицях і висаджених у розсадниках відкритих полів, припустили, що це може бути швидким та значним (IFV Sud-Ouest, неопубліковано).

Під час досліджень, спрямованих на порівняння можливого впливу різних технік розплідника на рівень забруднення, аналізи, проведені на рослинах, отриманих в результаті трав'янистих трансплантатів, систематично демонстрували повну відсутність грибків, що беруть участь у захворюваннях деревини, будь то всередині тканин або на корі ( Ларіньйон та ін, 2013). Таким чином, ця техніка, яка включає лише трав'яні фрагменти (відростки та підщепи) протягом вегетаційного періоду, була збережена в решті експерименту для отримання партії рослин, вільних від грибкового зараження.

Пристрій та початкові умови

У 2012-2013 рр. З того самого вихідного рослинного матеріалу (клон совіньйон блан B 297 із 110 клонів Ріхтера 237, початкова категорія) було виготовлено дві партії рослин, одна - на трав'янистих, а інша - на деревному.

Совіньйон блан B був обраний через його відому високу чутливість до хвороб деревини та його тенденцію до швидкого вираження симптомів на молодих лозах. Підщепа 110 R, яка надає сильну енергію нащадків, ідеально підходила до цілей дослідження, оскільки надмірна енергія вважалася фактором, який може сприяти появі симптомів. Ділянка на землі незайманої виноградної лози понад 20 років була створена на місці експериментального виноградарського домену Тарна (виноградник Гайяка). Він порівнює два способи в пристрої в змінних смугах.

Стан здоров'я двох партій рослин попередньо визначався мікробіологічним аналізом за методом Ларіньона та Дубоса (1997). Зразок 30 рослин з кожної партії дебетували на 6 рівнях і культивували внутрішні зразки тканин. Одночасно відбирали зразки кори на 5 рівнях і аналізували таким же чином. Результати показали сильні відмінності між двома партіями:

  • На рослинах, отриманих в результаті трав'янистих живців-живців (GBH): Знайдено лише одну рослину, яка несе в п’яті засіб, що викликає чорну стопу (Ilyonectria liriodendri). Цей гриб, широко розповсюджений у ґрунтах, мабуть, був занесений у цьому випадку середовищем росту. Інших грибів не виявлено, ні на корі, ні всередині тканин, що підтверджувало раніше отримані результати.
  • З іншого боку, було встановлено, що контрольна партія в основному забруднена кількома видами грибів. Більше ніж 76% рослин переносили Botryosphæriaceæ принаймні на одному з рівнів збору, з яких 60% (18 з 30 рослин) виховували принаймні один з видів всередині тканин. Зразки 43% рослин виявили однакові види Botryosphæriaceæ як на корі, так і всередині деревини. Присутність цих грибів у розпліднику є звичним явищем і не є несподіванкою, навіть якщо рівень забруднення в цьому випадку високий.

Методика вибірки

З кампанії після посадки (2014-2015 рр.) Були взяті зразки стовбура з обох видів матеріалу, і була визначена програма відбору зразків, що проводить щорічне розподіл та мікробіологічний аналіз.

  • Наприкінці посадкового року a двоокий розмір не проводився, аналіз не проводився
  • У рік n + 1 (2014) хороша енергія плантації, на якій нічого не бракувало, дозволила правильно встановити два стовбури на всіх пнях. У наступному розмірі один з двох зберігався і складався безпосередньо над несучим дротом, а другий виймався для аналізу. Всі штами були обрізані в той же день, щоб жодне упередження не порушило однорідність ділянки. У цих однорічних лісах, які швидко зростали, проводили ізоляцію на трьох внутрішніх рівнях (і на двох рівнях на корі).

Наступні два роки (2015 та 2016), коптування були заплановані на вибірці із 100 штамів, визначених заздалегідь. Протягом вегетаційного періоду виноградна лоза зберігалася, була розбита і захищена на кожній нозі. Під час обрізки було взято стовбур, коптування дозволило проводити (руйнівний) аналіз без зміни розміру ділянки, що могло спричинити небажані неоднорідності.

Потім кожен проаналізований штам видаляється з обсягу дослідження після аналізу, переливна рана (захищена мастикою) та омолодження стовбура викликають значне упередження порівняно з іншими стопами після нормального курсу.

Кожен стовбур упаковували індивідуально, як тільки його збирали, щоб уникнути забруднення після обрізки або контакту між зразками. Обрізка, що практикується на ділянці, після завершення формування пеньків, являє собою простий гайко з 8-очною палицею та 2-очним підсилювачем хвостовика.
Точне картографування взятих штамів та їх стану здоров'я, виявленого аналізами, проводиться та збільшується щороку дослідження, щоб спостерігати будь-яке районування або переважне прогресування забруднення.

Покриття пня в кінці 2015 року та вилучення 2-річного стовбура

Результати: колонізація рослин та поява перших симптомів на листках

Починаючи з року, наступного за посадкою, перші виміри показують a колонізація рослин збудниками хвороб, включаючи види Botryosphaeriaceae, що в кінцевому підсумку призводить до швидке зближення стану здоров’я з двох вивчених партій. Наявність грибів спостерігається в площі (кора) і всередині деревної тканини.

  • Рік n + 4 (2017), дозволяє появу симптомів листя на карті, взятій із партії GBH. Поява цього першого симптому відбувається дуже рано, винограду лише 4 роки, а основа вважається вільною від грибків при посадці.

  • Кінець 2019 року, вони зараз 8 рослин, які виявляють симптоми листя: 2 від контрольної партії та 6 від партії GBH

Багато питань залишаються без відповіді після цих результатів, що стосуються походження інокулята (навіть якщо елементи, що піддаються, вимагають визначальної ролі зовнішнього середовища), кращих шляхів проникнення, ефективної дії грибів у тканинах та їх зв'язку з будь-якими подальші симптоми тощо.

Нарешті, ці результати піднімають питання про ефективність з точки зору профілактики екстенсивної дезінфекції в розпліднику, враховуючи масовий і швидкий характер забруднення на ділянці різними видами Botryosphæriaceae. Однак зв’язок між цими грибами та спостережуваними симптомами не встановлений, і P. minimum та P chlamydospora, два піонерські види еска, які не були знайдені в цій роботі, ще багато чого потрібно зробити, перш ніж мати можливість зробити остаточні висновки на цю тему. Подальша робота над цим сюжетом та іншими, можливо, дозволить нам краще визначити всі процеси, що працюють.

Нові випробування, проведені в рамках програми Origin

Створення ділянки та перші роки моніторингу фінансували FranceAgriMer, і продовження цієї довготривалої роботи є частиною проекту Origine (зокрема, дії, спрямованої на вивчення факторів зниження молодих рослин). Забруднення грибками виявилося дуже швидким, а результати щодо їх кінетики були отримані з самого початку проекту, було визнано доречним імплантація другого пристрою за дещо іншою експериментальною конструкцією (розташування блоків) . На додаток до проведення того самого моніторингу забруднення, нове дослідження має на меті визначити походження щеплення яка швидко вражає рослини, отримані в результаті трав’янистих трансплантатів, спочатку вільних, зокрема, завдяки молекулярній характеристиці патогенних грибів, присутніх у контрольних рослинах. Мета полягає в спробі кількісно визначити частку відповідальності за ці забруднення між навколишнім середовищем (виноградні лози, інші рослини в оточенні ...) та щепленням, внесеним із самими рослинами (свідки, що переносять грибки на корі або всередині тканини).

Ця ділянка була створена навесні 2020 року, і на полюсі Валь-де-Луар ІФВ проводяться молекулярні аналізи. Раніше в трав’янистих живцях щеплень не було виявлено патогенних грибів, що підтверджує справедливість цієї моделі для такого роду досліджень.