Текст анотації 10-й симпозіум DGfZ 1997 р

10-й Гейдельберзький симпозіум
23-25 ​​жовтня 1997 р

Реферати DGfZ

Тези опубліковані в: Збірник матеріалів Зустрічі DGZ в Гайдельберзі, DKFZ, Гейдельберг, 1997, ISSN 0949 - 5347

анотації

=== УСНІ ПРЕЗЕНТАЦІЇ ===

=== АПОПТОЗ = =

=== АНАЛІЗ ЗОБРАЖЕННЯ ===

7-й. МІКРОСКОПІЯ СПЕКТРАЛЬНОЇ ТОЧНОСТІ В ДОСЛІДЖЕННЯХ ГЕНОМА
К. Кремер * (1,2), Х. Борнфлет (1), Дж. Бредль (1), П. Едельманн (1), А. Еса (1), Х. Мюнч (1), Й. Раух (1) ), Б. Рінке (1), Л. Трахтенброт (3), М. Хаусманн (1), Т. Кремер (4,2) (1) Інститут прикладної фізики та (2) Міждисциплінарний центр наукових обчислень (IWR), Університет Гейдельберга, D-69120 Гейдельберг; (3) Інститут гематології, Тел. Хашомер/Ізраїль; (4) Інститут генетики людини Мюнхенського університету, D-80333 Мюнхен.
* Представляючи автора
Викладено нові методологічні підходи за допомогою комбінації мультиспектральних методів молекулярного біологічного маркування з новими оптоелектронними процесами, такими як конфокальна лазерна скануюча флуоресцентна мікроскопія або кількісна флуоресцентна мікроскопія із стимульованим лазерним хвильовим полем, "високоточна спектральна мікроскопія", "високоточна мікроскопія з далекою полем", класична біологічна мікроскопія з далекою польовою прозорістю, біологічна мікроскопія з далекою польовою прозорістю Реалізувати об'єкти. У довгостроковій перспективі з’являються можливості для проведення світлових мікроскопічних досліджень просторової топології геному в тривимірно збережених («неушкоджених») ядрах клітин з молекулярною роздільною здатністю «еквівалент» і, таким чином, сприяти глибшому розумінню взаємозв’язку структура-функція геному людини.

=== НАГОРОДА КЛАУСА ГОРТТЛЕРА ===

=== СТАНДАРТИЗАЦІЯ ТА КОНТРОЛЬ ЯКОСТІ ===

=== ПЕРИФЕРНА КРОВЬ І КІСТКОВИЙ МОЗЖ ===

32. ЦИТОМЕТРИЧНИЙ АНАЛІЗ АНТИГЕНОВИХ ПЕПТИДІВ НА АНТИГЕНОВИХ КЛІТИНАХ
Д. Кункель, А. Шеффольд та А. Радбрух,
Німецький дослідницький центр ревматизму в Берліні
Для контролю імунної реакції Т-хелперні лімфоцити повинні розпізнавати свій специфічний антиген у вигляді антигенних пептидів, які обробляються антиген-презентуючими клітинами і представлені на молекулах МНС класу II.
Використовуючи гаптенізований пептид овальбуміну, ми дослідили презентацію цього пептиду за допомогою проточної цитометрії. Було продемонстровано специфічне зв’язування пептиду з молекулою MHCII. Крім того, були визначені умови, необхідні для поглинання та представлення, а також залежність між концентрацією пептиду та кількістю завантажених молекул MHCII на клітину.
Наші результати показують, що за допомогою проточної цитометрії можна виявити та відокремити антигенпрезентативні клітини на основі презентації специфічних пептидів.

ІМфоцити селективно фільтруються CPB. Ми робимо висновок, що під час операції клітини з CD3 25 54

фенотип мігрує в окремі частини організму (самонаведення). Через підвищену здатність продукувати та секретувати цитокіни ці клітини частково можуть бути індукторами місцевих запалень та післяопераційного CLS. (За підтримки Міністерства науки і мистецтва Саксонії).

=== ЕКОЛОГІЧНИЙ АНАЛІЗ ===

=== НОВІ МЕТОДИ ТА ЗАСТОСУВАННЯ ===

=== ПЛАКАТНА СЕСІЯ ===

53. ЯК ТОЛЩИЙ ВАШ РОЗДІЛ? - ПРОСТИЙ МЕТОД ОЦІНКИ ТОЛЩИНИ СЕКЦІЙ ПАРАФІНОВИХ СЕКЦІЙ
Гшвендтнер А., Лоренц М., Майрінгер Т.
Кафедра патології, Інсбрукський університет, Інсбрук, АВСТРІЯ
Точне вимірювання товщини парафінових зрізів, що використовується для будь-якого кількісного аналізу (наприклад, ДНК - цитометрія, фарбування ІГХ - кількісне визначення, стереологічні методи), є важливим для отримання надійних результатів. Хоча товщину зрізу можна виміряти з великою точністю та точністю, використовуючи конфокальну лазерну мікроскопію, такі прилади є дорогими і не легко доступними для багатьох лабораторій. У цій роботі описаний простий метод кількісної оцінки товщини перерізу парафінового зрізу, що постійно обробляється, фактично використовуваного для аналізу зображень.
Для досягнення цієї мети даний розділ розділений на дві частини, більший використовується для кількісного визначення, тоді як менший повторно вбудовується та резекується через товщину. Товщину повторно вбудованої секції тепер можна легко виміряти будь-яким приладом для вимірювання довжини, доступним у світловій мікроскопії.

67. ХРОМОЗОМНІ ТЕРИТОРІЇ ЗМІНЮЮТЬСЯ ПІД ЧАС КЛІТИННОГО ЦИКЛУ
С.Монаджембаші, Х.Діттмар, К.Бок та К.О.Грейліч
Інститут молекулярних біотехнологій, Beutenbergstrasse 11, D-07745 Єна, тел./Факс: ** 49-3641-656409/10
Просторову кореляцію та форму виділених хромосом (2, 7, 9, X) у міжфазному ядрі досліджували методом флуоресценції в гібридизації Situ (FISH). Звичайну епіфлуоресцентну мікроскопію та обробку зображень використовували для візуалізації цілих зондів для фарбування хромосом, які фарбували або CY3, або CY5. Оскільки лімфоцити не синхронізовані, міжфазні ядра в різні фази клітинного циклу можна знайти на предметному склі.
Можна спостерігати два типи зображення: а) в декількох випадках хромосомні домени дуже компактні і чітко відокремлені один від одного і розташовані парами гомологів. Хромосоми з’явилися по колу в зовнішньому об’ємі ядра. Ймовірно, ці ядра представляють ситуацію, близьку до мітозу. б) у більшості випадків домени більші і упаковані більш вільно. Вони заповнюють значно більші ділянки ядра клітини. Ці результати свідчать про значну динаміку територій хромосом протягом клітинного циклу.

71. КАРІОТИП ПОТОКУ МІЖФАЗНИХ ХРОМОСОМ АРАБІДОПСИС ТАЛІАНИ
Тетяна 1. Самойлова, Армін Мейстер та Саймон Мізера
Інститут генетики рослин та досліджень рослинництва, D-06466 Гатерслебен
Вміст ДНК у різних анеуплоїдних лініях Arabidopsis thaliana визначали за допомогою проточної цитометрії на зафарбованих DAPI міжфазних ядрах у суспензії та порівнювали з диким типом. Відхилення всіх ліній від дикого типу було дуже легко відтворити і дозволило оцінити відносний вміст ДНК кожної хромосоми Arabidopsis або окремих плечей хромосом.
За винятком лінії з найменшою телотрисомою (Tr 3A), всі досліджені трисоми показали значні відмінності від дикого типу. З цього можна зробити висновок, що за наявних експериментальних умов можна виявити відмінності, які перевищують 3% геному Arabidopsis.
Сума всіх відмінностей між окремими трисомами та диким типом добре узгоджувалась із очікуваним вмістом ДНК для гаплоїдного хромосомного набору.

74. ГАЛЕКТИН -1, ОРЕДЕНИЙ ІМУНОПРЕСПРЕСІЯ, ПОВ'ЯЗАНИЙ З ІНДУКЦІЄЮ АПОПТОЗУ
У. Шульц 1, с Нілс 2, Дж. Брок 2, Х. Вальцель 2
Інститут імунології 1 Інститут медичної біохімії 2, Університет Ростока, Німеччина
Плацентарний галектин -1, член сімейства галектинів розчинних 13-галактозид-зв'язуючих білків, інгібує індуковану алоантигеном та мітогеном проліферацію лімфоцитів периферичної крові людини. Встановлено, що опосередковане галектином -1 інгібування проліферації лейкозної Т-клітинної лінії людини Jurkat пов'язане із збільшенням внутрішньоклітинної концентрації кальцію ([Ca 2+] i) та індукцією апоптозу.
Проточні цитометричні вимірювання показали, що лектин спричиняє залежність від часу та концентрації збільшення експресії фосфатидилсерину, як виявлено при фарбуванні анексином - V FITC/PJ. Встановлено, що цей вплив на експресію фосфатидилсерину помітно знижується у присутності лактози. Фрагментація ДНК з’явилася в агарозних гелях у вигляді драбинки після інкубації Т-клітин Jurkat з галектином -1 протягом 6 годин. Ці результати вказують на те, що галектин -1 модулює імунну відповідь шляхом індукції апоптозу в активованих Т-клітинах.