Університетські роботи Вплив харчування на експресію гена, залежну від рецептора вітаміну D

1,25 (OH) 2D3 - плейотропний гормон, який не тільки впливає на здоров'я кісток та гомеостаз кальцію/фосфату, але також має антипроліферативні, продиференціюючі та модулюючі імунну систему функції.

університетські

В результаті 1,25 (OH) 2D3 було запропоновано як потенційний засіб для терапії та профілактики раку. Численні спостережні дослідження показали чіткий зв'язок між низьким вмістом вітаміну D і споживання кальцію та підвищеним ризиком розвитку раку прямої кишки (КРР).

Метою даної роботи було на першому етапі довести, чи дієтичний кальцій i) модулює місцеву кількість 1,25 (OH) 2D3 в колоноцитах і ii) підтримує, таким чином, протипухлинну дію гормону вітаміну D. На другому етапі ми оцінили 1,25 (OH) 2D3 катаболізуючий фермент CYP24A1, головний фактор, який регулює накопичення 1,25 (OH) 2D3 у слизовій оболонці товстої кишки хворих на ХРН.

Результат QRT-ПЛР мишей C57BL/6, які харчувались дієтою з низьким вмістом (0,04%) кальцію, показав підвищену кількість мРНК CYP24A1 в правій товстій кишці. Однак у порівнянні з чоловіками, які харчуються з низьким вмістом кальцію, кількість мРНК синтезуючого вітамін D Cyp27b1 було збільшено виключно в правій товстій кишці самок; це супроводжувалось збільшеною кількістю 1,25 (OH) 2D3, виміряною за допомогою імунологічного аналізу, та наростаючим апоптозом, визначеним активністю каспази 3/7. Ефектів низького вмісту кальцію в лівій товстій кишці не спостерігалося.

Важливість дерегульованого катаболізму 1,25 (OH) 2D3 в CRC, як можливої ​​причини стійкості до вітаміну D, була проаналізована у зразках тканин товстої кишки у 111 пацієнтів за допомогою QRT-PCR та імуногістохімії. Експресія CYP24A1 у зразках нормальної та доброякісної тканини була дуже низькою. Однак ми виявили надмірну експресію CYP24A1 приблизно у 70% усіх обстежених аденокарцином. Це супроводжувалось збільшенням кількості мРНК маркера проліферації Ki-67. Крім того, ми підтверджуємо існування трьох варіантів сплайсингу у цих пацієнтів з КРР шляхом секвенування продуктів ПЛР. Функціональна відповідність цих варіантів повинна бути вивчена далі.

Підводячи підсумок, рівні CYP24A1 у тканинах кишкової пухлини пацієнтів вищі і корелюють із збільшенням проліферації. Це може призвести до місцевого зниження рівня 1,25 (ОН) 2D3 та стійкості до вітаміну D у цих пацієнтів. В результаті втрачається захист 1,25 (OH) 2D3 від пухлини. Це підкреслює важливість вітаміну D у хіміопрофілактиці, оскільки він, ймовірно, буде найефективнішим до розвитку КПР. Адекватне споживання кальцію може запобігти цьому сценарію, хоча жіночі статеві гормони можуть бути в змозі компенсувати негативні наслідки недоїдання кальцію як такої як метаболізм. Це пояснювало б, чому захворюваність на КПР у жінок нижча, ніж у чоловіків того ж віку.

1,25 (OH) 2D3 - плейотропний гормон, який впливає не тільки на здоров'я скелета та гомеостаз кальцію/фосфату, але має антипроліферативні, продиференціюючі та імуномодулюючі функції.

Отже, 1,25 (OH) 2D3 було запропоновано як потенційний засіб для терапії та профілактики раку. Численні спостережні дослідження показали чіткий зв'язок між низьким вмістом вітаміну D і споживання кальцію та вищим ризиком розвитку раку прямої кишки (КРР).

Ця дисертація мала на меті на першому етапі довести, чи модулює кальцій i) в їжі місцеві рівні 1,25 (OH) 2D3 у колоноцитах, і ii) полегшує протипухлинні дії гормону вітаміну D. На другому етапі ми оцінили рівні ферменту CYP24A1, що катаболізується, 1,25 (OH) 2D3, головного фактора, що контролює збагачення 1,25 (OH) 2D3 у слизовій оболонці товстої кишки хворих на CRC.

Результат QRT-ПЛР від мишей C57BL/6, які годувались дієтою з низьким вмістом (0,04%) кальцію, показав підвищений рівень мРНК Cyp24a1 в правій товстій кишці. Однак рівень мРНК вітаміну D, що синтезує Cyp27b1, підвищувався виключно у правій товстій кишці самок; це супроводжувалося підвищеним рівнем 1,25 (OH) 2D3, виміряним за допомогою імунологічного аналізу, та збільшенням апоптозу, оціненим за активністю каспази 3/7, порівняно з мишами-самцями, які отримували дієту з низьким вмістом кальцію. В лівій товстій кишці не спостерігається ефекту низького вмісту кальцію в їжі. Значення дерегульованого катаболізму 1,25 (OH) 2D3 в CRC як можливої ​​причини стійкості до вітаміну D аналізували за допомогою QRT-PCR та імуногістохімії тканин 111 пацієнтів. Експресія CYP24A1 була дуже низькою в нормальних та доброякісних тканинах. Однак у 70% всіх досліджених аденокарцином ми виявили надмірну експресію CYP24A1. Це супроводжувалось підвищенням рівня мРНК маркера проліферації Ki-67. Крім того, ми підтвердили існування трьох варіантів сплайсингу за допомогою ПЛР-секвенування продукту у цих пацієнтів з КРР. Потрібно додатково розглянути функціональну відповідність цих варіантів.

Підводячи підсумок, рівні CYP24A1 вищі в тканині пухлини товстої кишки пацієнтів і корелюють із збільшенням проліферації. Це може призвести до місцевого зниження рівня 1,25 (ОН) 2D3 та до стійкості до вітаміну D у цих пацієнтів. В результаті втрачається захист 1,25 (OH) 2D3 від пухлини. Це підкреслює важливість вітаміну D у хіміопрофілактиці, оскільки він є, мабуть, найефективнішим до розробки КПР. Цей сценарій може запобігти достатнє споживання кальцію, тоді як жіночі статеві гормони можуть бути здатні компенсувати негативні наслідки недоїдання кальцію на метаболізм вітаміну D. Сам це. Це буде поясненням того, чому частота ХРН у жінок у віці, що дорівнює, менш поширена, ніж у чоловіків.