Авторадіографія - біологія
Як жарко занадто жарко для життя глибоко під дном океану?
Антибіотики від бактерій
Міграція клітин: нещодавно виявлена функція відомого білка
Молекулярний компас для вирівнювання клітин
Від чого листя старіє восени
Демократичність грифа-цесарки
Середовище Екембо: Люди також жили на відкритих ландшафтах
| Генетика | Сільське, лісове та тваринництво
Сорт пшениці був створений шляхом схрещування дикорослих трав
Як жарко занадто жарко для життя глибоко під дном океану?
Авторадіографія
| Ця стаття або наступний розділ недостатньо забезпечені підтверджуючими документами (наприклад, окремими доказами). Тому ці дані, можливо, незабаром будуть видалені. Будь ласка, допоможіть Вікіпедії, дослідивши інформацію та додавши вагомі докази. Детальніше можна отримати на сторінці обговорення або в історії версій. Нарешті, видаліть цей попереджувальний знак. |
Авторадіографія або Рентгенографія (часта абревіатура AURA) стосується візуалізації хімічного компонента радіоактивними ізотопами, спочатку шляхом чорніння фотоплівки, тепер все частіше за допомогою детектора випромінювання. Отриманий запис є Авторадіограма зателефонував.
Програми
Протягом трьох десятиліть авторадиографія була невід’ємною частиною аналізу послідовності ДНК Сангера. Однак з останніх років 20 століття для аналізу послідовності дедалі частіше використовуються флуоресцентні замість радіоактивно мічених нуклеотидів ДНК.
Авторадіографія також використовується у виробництві рекомбінантних білків, аналізі ферментативних реакцій або ідентифікації ферментних субстратів.
Він також застосовується у фармакокінетиці для проведення досліджень вивільнення абсорбції розподілу метаболізму (екскреція метаболізму) (LADME).
виконання
Спільним для всіх застосувань авторадіографії є необхідність контрабанди радіоактивних ізотопів у молекули, що підлягають аналізу. Через часту появу відповідних стабільних ізотопів у біомолекулах та їх відносно низьку небезпеку часто використовуються радіоізотопи 14 C (вуглець), 35 S (сірка), 32 P (фосфор) та 3 H (тритій).
Штам бактерій, трансформований експресійною плазмідою, обробляють живильним середовищем, яке містить радіоактивно мічену амінокислоту 35 S-метіонін. 35 S-метіонін вбудовується в рекомбінантний білок, який кодується на плазміді. Бактеріальний екстракт відокремлюють SDS-PAGE, гель висушують і наносять плівку. Після того, як плівка «піддається» дії бета-променів, випромінюваних ізотопами, положення рекомбінантного білка видно на розвиненій плівці.
2-й приклад - аналіз ферментної активності
АТФаза, фермент, який розщеплює нуклеотид АТФ, інкубується з радіоактивно міченою 32 Р-АТФ. Суміш відокремлюють через різний час методом тонкошарової хроматографії, хроматографічну пластину сушать і поміщають на плівку. Потемніння плівки 32 Р-фосфатом відображає активність ферменту.