АВТОРИЗАЦІЯ НА НЕПРАВИЛЬНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ - PDF Завантажити безкоштовно

UNIVERSITE DES SCIENCES ET TECHNOLOGIES DE LILLE 59653 VILLENEUVE D ASCQ TEL: 03 28 76 73 90 АВТОРИЗАЦІЯ НАПРАВНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ У галузі природничих наук 2008 Автор: FROIDEVAUX Rénato Викладач Університету науки і технологій Лілля I (64-й розділ) 1

безкоштовно

UNIVERSITE DES SCIENCES ET TECHNOLOGIES DE LILLE 59653 VILLENEUVE D ASCQ TEL: 03 28 76 73 90 АВТОРИЗАЦІЯ НАПРАВНИХ ДОСЛІДЖЕНЬ У галузі природничих наук 2008 Викладач FROIDEVAUX Rénato в Університеті науки і технологій Лілля I (64-й розділ) 2

I. ЖИТТЯ 3

1998-2001: Докторська дисертація з ферментативної інженерії, біоконверсії та мікробіології, виконана в рамках угоди MENRT під керівництвом пр. Д. ГІЛОШОН у Лабораторії технологій природних речовин. Тема: "Впровадження свинячого пепсину в двофазній системі розчинників для отримання опіоїдних пептидів з бичачого гемоглобіну" I.3. Наукова кар'єра 1998-2001 рр. Науковий керівник кафедри біологічної інженерії ІУТ "А" м. Лілль. Жовтень 2001 р. Викладач нормального класу 1-го та 2-го рівнів в УФР біології Університету наук і технологій Лілля. Лабораторія технологій природних речовин, директор: проф. Д. ГІЛОШОН липень 2004 р. Викладач нормального класу 3-го рівня в УФР біології Університету науки і технологій Лілля. 5

II. АДМІНІСТРАТИВНА ДІЯЛЬНІСТЬ ТА КОЛЕКТИВНА ВІДПОВІДАЛЬНІСТЬ 6

II.1. На рівні викладання З 2001 р. Менеджер викладання 1-го курсу (Bac + 1) IUP Якість та навколишнє середовище промислових виробництв (Відповідний пр. А. ЛЕПРЕТР). В рамках реформи університетських ліцензій-магістрів в 2005-2006 рр. Запровадження третього курсу ліцензії IUP QEPI з ліцензіями на біохімію та хімію. З 2006 р. Педагогічний керівник на 3 рік ліцензії на курс IUP QEPI Університету науки і технологій Лілля. В рамках реформи університетських ліцензій-магістрів у 2005-2006 рр. Участь у впровадженні професійного магістра з гігієни, безпеки, якості та навколишнього середовища (HSQE) курсу IUP QEPI. II.2. У лабораторії ProBioGEM відповідає за технічне обслуговування хроматографічного обладнання високоефективної рідинної хроматографії з зворотною фазою (PI HPLC). З 2001 року участь у навчанні студентів-слухачів на зворотній фазі високоефективної рідинної хроматографії. Відповідає за утилізацію хімічних відходів до Університетського відділу відходів. 7

III. ПЕДАГОГІЧНА КАДРОВА ДІЯЛЬНІСТЬ 8

Я розпочав свою викладацьку діяльність як ініціатор моніторингу вищої освіти на кафедрі біологічної інженерії в IUT “A” м. Лілль I (1998-2001). У 2001 році я був прийнятий на посаду викладача в UFR з біології в Ліллі I на навчання IUP з якості та навколишнього середовища для промислових виробництв під керівництвом професора А. ЛЕПРЕТРЕ. Характером мого викладання, а також відповідного навчання є: - курси біохімії та хімії харчових продуктів на 1-му курсі IUP QEPI (рік L3); - курси в ЄС "Впровадження протеаз у мікроводних середовищах" на 2-му курсі магістра досліджень у галузі біотехнології та біології рослин (відповідно пр. Дюльстера) в Університеті науки і техніки Лілля; - спрямована робота з біохімії на 1-му курсі IUP QEPI (рік L3); - практичні роботи з біохімії та хімії харчових продуктів на 1-му курсі IUP QEPI (рік L3); - практичні роботи з біохімії на 2-му курсі професійного магістра з клітинної та молекулярної біології (відповідно пані А. ШОТТЕ) з Університету наук та технологій Лілля. 9

IV. ДОСЛІДЖЕННЯ ДІЯЛЬНІСТЬ Вивчення селективності ферментативного протеолізу та сепарації для отримання пептидів з біологічною активністю 12

IV.1. Наукова довідка 13

Пошук системи органічних розчинників, здатних розчиняти їх під час гідролізу нерозчиненим пепсином, дозволив проектувати відкритий реактор для безперервного приготування двох опіоїдних пептидів у двофазній системі вода/спирт. Наступний розділ стосується бібліографічних оглядів демонстрації та виділення активних пептидів з ферментативного гідролізу бичачого гемоглобіну, які дають змогу зрозуміти роль гемоглобіну як потенційного джерела багатьох активних пептидів, а потім - еволюційних сучасних досліджень методів вибірково отримувати пептиди з біологічною активністю з харчових білків. 15

IV.2. Бібліографічні нагадування 16

IV.2.1.1. Сімейство кіоторфінів Назва “кіоторфіни” походить від їх дії на вивільнення мет-енцефаліну, опіоїдного пептиду. Послідовність Розташування Походження Ферментативна активність (и) Посилання YR Кіоторфін α 140-141 Бичачий мозок Не виділено in vitro - Знеболюючий H. Takagi et al. (1979) -Антигонадотропні орти та ін. (1978) TSK α 137-139 Бичачий гіпофіз Не виділений in vitro TSKY α 137-140 Мозок сибірської білки (Пепсин типу b Неокіоторфін (1-4) Citellus undulatus) в сплячці в серцевих волокнах (у жаб) a -Цитотоксичний аа Blishchenko та ін. (1996) b Zhao and Piot (1998a) TSKYR Неокіоторфін α 137-141 Бичачий мозок a Не ізольований in vitro -Аналгічний a -Викликає збудження стану гібридизації b-Регулює залежний від Ca ++/K + потенціал у серцевих волокнах (у жаб) ba Takagi et al. (1982) b Васковський та ін. (1990)

IV.2.1.2. Посилюючі пептиди брадикініни Ці пептиди називаються так, оскільки вони дозволяють хініну максимізувати свою ефективність, специфічно зв'язуючись з рецепторами хініну, стимулюючи його вироблення. Послідовність Розташування Походження Ферментна активність (и) Посилання LANVST α 129-134 Бичачий гемоглобін Пепсин - Посилює дію хініну (тест, проведений на клубовій кишці морської свинки) Piot et al. (1992b) IV.2.1.3. Ліпідознижуючий пептид Кажуть, що він знижує ліпіди у зв'язку з подальшим зниженням рівня ліпідів у печінці та травній системі. Послідовність Розташування Походження Ферментна активність (и) Посилання VVYP β 32-35 Бичачий гемоглобін a Кислотна протеаза a -Інгібує адсорбцію жирів у травній системі b -Зароджує активність печінкової ліпази (EC 3.1.1.3) щодо тригліцеридів у мишей aa Кагава та ін. (1996) b Kagawa et al. (1998)

IV.2.1.4. Кровотворні пептиди Ці пептиди відіграють певну роль у кровотворенні, тобто утворенні еритроцитів, що відбувається переважно в червоному мозку кісток. Більшість гемопоетичних пептидів є результатом хімічного гідролізу α-ланцюга гемоглобіну. Послідовність Розташування Походження Ферментна активність (и) Посилання VLSAADKG α 1-8 Червоний кістковий мозок VLSAADKGNVKAA α 1-13 VLSAADKGNVKAAWGK α 1-16 SAADKGNV α 3-10 KVGGHAAEYGAEA α 16-28 VGGHAAEYGAEGA α 17-28 VAGAHAEYGAEGA α 17 -28 VGHAAEYGAEAL α 17-28 VGHAAEYGAEAL α 17-28 VGHAAEYGAEAL 17 22-29 GAEALER α 25-31 EALE α 27-30 LTAEEKAAVTA β 2-12 LTAEEKAAVT β 2-11 LTAEEKAAV β 2-10 GKVKVDEVGGRLG β-22 -31 ARNFGKFF β 115-122 Не виділено in vitro -Відновлення кровотворної функції мишей, яких піддавали опроміненню або лікували 5-фторурацилом Іванов та співавт. (1992) LPGALSE KLHVDPE α 76-82 β 94-100 Бичачий гемоглобін α Протеаза V8 із золотистого стафілокока α -Відновлення функції кровотворення у мишей, що зазнали опромінення або оброблені 5-фторурацилом b a Vercaigne-Marko et al. (2000) b Іванов та співавт. (1997)

Антимікробні пептиди (продовження і закінчення) Послідовність Місце походження Активність ферменту (ів) Рекомендації FPTTKTYFPH PTTKTYFPHF α 36-45 з α 37-46 C Бичачий гемоглобін VTLASHLPSDFTPAVHASLDKFLANVSTVLTSKYR α 107-141 б VTLASVASLASLDSTAN & alpha; 107-141 б VTPLASHVASLPSDLα33L & alpha; 107-141 б VTLVASVASLPSDLα33L & alpha; 107-141 б VTLVASLASLPSDLα 133-141 137-141 б TSKYR & alpha; & beta; б ARNFGKFFTPVLQADFQKVVAGVANALAHRYH 114-145 121-145 гр FTPVLQADFQKVVAGVANALAHRYH & beta; & beta; QADFQKVVAGVANALAHRYH гр 126-145 140-145 б з MLTAEEKAAVTAFWGKVKVDEVGGEALGRL LAHRYH β β β 1-13 1-30 гр MLTAEEKAAVTAF c Пепсин - Антимікробний препарат (бактерії Micrococcus, Luteus A270, Salmonella enteritidis, Listeria innocua, Eschericha coli) a Froidevaux et al. (2001) b Nedjar- Arroume et al. (2006) c Nedjar- Arroume et al. (2008) FLSFPTTKTYFPHFDLSHGSAQVKGHGAK α 33-61 Boophilus microplus кліща кишечник Не виділений in vitro-Антимікробний (грампозитивні бактерії M. luteus, S. epidermidis; гриби C. albicans, A. nidulans, S. cerevisiae) Fogaça et al. (1999)

IV.2.1.6. Коронороконстрикторні пептиди Ці пептиди спричинять облітерацію коронарних артерій серцевого м’яза. Серед цих трьох пептидів жоден не виділений від гідролізу, ферментативного чи хімічного, бичачого гемоглобіну in vitro. Послідовність Розташування Походження Ферментна активність (и) Посилання VVYPW β 32-36 Гіпоталамус великої рогатої худоби Не виділено in vitro -Коронароконстриктор Barkhudaryan et al. (1992) VLSAADKGNVKAAWGKVGGHA VAGVANALAHRYH α 1-21 β 133-145 Бичий гіпоталамус Не виділено in vitro -Coronaro-constrictor Barkhudaryan et al. (1993) IV.2.1.7. Пептидний стимулятор росту бактерій Його назва пов’язана з його активністю, тобто стимуляцією росту бактерій. Послідовність Розташування Походження Ферментна активність (и) Посилання STADA β 48-52 Бичачий гемоглобін Пепсин - Стимулює ріст грамнегативних бактерій Zhao et al. (1996)

Геморфіни (продовження) Послідовність Розташування Походження Ферментна активність (и) Посилання LVVYPWTQR (LVV-геморфін-6) β 31-39 Гіпофіз людини (in vivo) a Не виділено in vitro -Зв'язування зі специфічним опіатним рецептором a-Інгібування електричні скорочення клубової кишки морської свинки a-Інгібування ферменту, відповідального за перетворення ангіотензину I в ангіотензин II ba ba Glämsta et al. (1991) b Lantz et al. (1991) VVYPWTQR (VV-геморфін-6) β 32-39 Гіпоталамус великої рогатої худоби (in vivo) a Не виділений in vitro -Зв'язування на специфічному опіатному рецепторі b-коронароконстриктор c c Barkhudaryan et al. (1992) a Галоян (1997) b Ніберг та ін. (1997) YPWTQR (геморфін-6) β 34-39 Гіпофіз людини (in vivo) a Не ізольовано in vitro - Зв'язування зі специфічним опіатним рецептором b - Інгібування електричних скорочень клубової кишки морської свинки a - Інгібування ферменту, відповідального за перетворення ангіотензину I в ангіотензин II ca Glämsta et al. (1991) c Lantz et al. (1991) b Nyberg та співавт. (1997) LVVYPWTQ (LVV-геморфін-5) β 31-38 Мозок великої рогатої худоби (in vivo) a Пепсин (in vitro) b-Інгібування електричних скорочень клубової кишки морської свинки b-Інгібування ферменту, відповідального за перетворення з ангіотензину I до ангіотензину II ба Карелін та ін. (1994) b Чжао і Піот (1997)

IV.2.1.9. Інша діяльність Послідовність Розташування Походження Фермент Активність (и) Посилання FLSFPTTKTYFPHF α 33-46 (1) Свинячий гіпоталамус Не виділено in vitro - Вивільнення кортикотропіну Schally et al. (1978) FLSFPTTKTYFPHFDLSHGSAQV? FLSFPTTKTYFPHFDLSH? FLSFPTTK? α 33-55? (1) α 33-50? (1) α 33-40? (1) Мозочок людини Не виділено in vitro - маркер хвороби Альцгеймера Slemmon et al. (1994) "?" позначає відсутність знань про амінокислотний залишок (и) у С-кінцевому положенні активного пептиду (1) ці пептиди включають частину послідовності α 33-61 антимікробного пептиду, виділеного в кишечнику B. microplus кліща, але їх діяльність антимікробними препаратами ще не визнана.

Чжао, К. та Піот, Дж. М. (1998b). Утворення неокіоторфіну та кількісна еволюція після гідролізу людського гемоглобіну катепсином D. Пептиди 19, 759-766. Zioudrou, C., Streaty, R.A. та Klee, W.A. (1979). Опіоїдні пептиди, отримані з харчових білків. Екзорфіни. Дж. Біол. Хім. 10, 2446-2449 36

IV.3. Короткий зміст проведеної роботи 37