Біохімічні ознаки порушення функції кобаламіну впливають на гематологічні

• предметів
• реферат
• Передумови:
• Методи:
• Результати:
• Висновок:
• Головна
• Результати
• Демографія та харчування
• Статус кобаламіну та фолатів для немовлят
• Гематологічні показники у немовлят
• обговорення
• Висновок
• Методи
• Вивчіть популяцію та дизайн
• Забір крові та біохімічний аналіз
• Статистичний аналіз
• Звіт про фінансову підтримку
• Розкриття інформації

предметів

реферат

Передумови:

Хоча дефіцит заліза є найпоширенішою причиною анемії у немовлят, дефіцит кобаламіну в першу чергу характеризується затримкою розвитку, а типова макроцитарна анемія обмежується важким і тривалим дефіцитом кобаламіну в цій віковій групі. Гематологічні параметри оцінювали у 4-місячних немовлят з біохімічними ознаками порушення функції кобаламіну, які брали участь у рандомізованому контрольованому дослідженні кобаламіну через 6 тижнів.

Методи:

Сто дев'яносто сім немовлят були випадковим чином обрані для внутрішньом'язової ін'єкції 400 мкл. г кобаламіну або відсутність втручання через 6 тижнів. Гематологічні параметри та статус кобаламіну та фолатів визначали при включенні та 4 місяці.

Результати:

Добавки кобаламіну покращили всі маркери порушеної функції кобаламіну, але не мали впливу на кількість гематологічних клітин через 4 місяці (Р> 0,18). Ознаки еритропоезу з обмеженим вмістом заліза спостерігались через 6 тижнів та 4 місяці. Найсильнішими предикторами низького рівня заліза були чоловіча стать на 4 місяці та високий відсоток приросту ваги від народження.

Висновок:

У немовлят з біохімічними ознаками порушення функції кобаламіну добавки не покращують кількість гематологічних клітин. Зміни параметрів еритроцитів, як видається, в першу чергу пов'язані зі статусом заліза у цій віковій групі.

Дитячий вік - це період, який характеризується швидким зростанням з підвищеною потребою в декількох мікроелементах та подальшим ризиком дефіциту поживних речовин (1). Дефіцит заліза та кобаламіну спостерігається у немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні (1, 2). Хоча дефіцит заліза є найпоширенішою причиною анемії у немовлят (3), дефіцит кобаламіну в основному характеризується затримкою розвитку у цій віковій групі (2, 4). Як повідомляється, у немовлят з граничним дефіцитом кобаламіну нормальні гематологічні показники (5, 6), а панцитопенія та макроцитарна анемія в основному спостерігаються при важкій та тривалій недостатності кобаламіну (2).

Оцінка харчування у немовлят може бути важкою через великі фізіологічні зміни в перші кілька місяців життя, що ускладнює інтерпретацію загальних лабораторних параметрів (2, 7). Сироватковий кобаламін значно зменшується в перші кілька тижнів і залишається низьким протягом перших 6 місяців, тоді як фолієва кислота в сироватці збільшується і залишається високою на першому році життя (8). Ці зміни супроводжуються збільшенням метаболічних маркерів гомоцистеїну (tHcy) та метилмалонової кислоти (8). Добавки кобаламіну змінюють усі маркери порушеного статусу кобаламіну в напрямку до профілю, який спостерігається у дітей старшого віку, багатих на кобаламін, що свідчить про те, що високі рівні ТГК і метилмалонової кислоти, про які повідомляється у значної частини немовлят, які перебувають на грудному вигодовуванні, не відображають незрілого метаболізму, але досить мало кобаламіну Кобаламінзалежні реакції повністю підтримуються (9).

Швидкість синтезу гемоглобіну та вироблення еритроцитів різко зменшується в перші дні після народження і досягає мінімуму на другому тижні життя. Через пригнічений еритропоез та скорочену тривалість життя еритроцитів плода (60–70 днів) рівень гемоглобіну (Hb) та кількість еритроцитів досягають найнижчих значень після народження

Через 2 місяці після народження (10, 11). Розмір еритроцитів, що визначається середнім об'ємом клітин (MCV), зменшується і є найменшим через 6 місяців, після чого поступово збільшується (10). Хоча нормальні параметри еритроцитів, такі як рівні Hb та MCV, відображають середні значення популяції еритроцитів із середньою тривалістю життя 120 днів, вміст ретикулоцитарного гемоглобіну (CHr) забезпечує оцінку еритропоезу в реальному часі за попередні 24-48 років (12). Ця перевага робить CHr корисним у часи швидких фізіологічних змін, і припускають, що CHr є найкращим предиктором дефіциту заліза у немовлят і перевершує традиційні параметри заліза, такі як феритин у сироватці крові та насиченість трансферину (7).

Раніше ми проводили рандомізоване контрольоване дослідження втручання кобаламіну з немовлятами, які перебувають на грудному вигодовуванні у віці 6 тижнів, з біохімічними ознаками порушення функції кобаламіну (9). У цій статті ми повідомляємо про вплив добавок кобаламіну на гематологічні показники у немовлят у віці 4 місяців. Метою цього дослідження було дослідити, чи пов'язаний метаболічний профіль, який вказує на порушення функції кобаламіну, з виробленням гематологічних клітинних ліній у перші місяці життя.

Результати

Демографія та харчування

До складу досліджуваної групи входило 107 здорових немовлят у віці 6 тижнів, 56 хлопчиків (52%), які народились на момент народження (середній термін вагітності 39, 9 (SD 1, 3) тижнів) і мали відповідну віку вагу (середній термін вагітності 3, 578). SD 506) g). Не було суттєвих відмінностей між групами кобаламіну та контрольної групи на основі демографічних показників немовлят та матері при включенні та спостереженні (Р> 0,05), а дані для загальної групи знаходяться в Таблиця 1 перерахована . Були використані два різні типи сумішей, обогачені залізом (0,7-0,8 мг на 100 мл приготованої суміші) та кобаламіном (0,13-0,2 мкг на 100 мл приготованої суміші). Використовували різні типи каш, усі вони були збагачені залізом (4, 8-11, 1 мг на 100 мг порошку). Жодна дитина не отримувала препаратів заліза.

Середній відсоток приросту ваги від народження становив 39% (SD 14%) через 6 тижнів та 95% (SD 26%) через 4 місяці. Кореляція Спірмена корелювала відсоток приросту ваги через 6 тижнів (r = –0, 44, P 0, 06).

Середній материнський вік становив 31,5 (SD 4,8) року, і 63 із 104 матерів були багатонародженими із середнім числом дітей (1,4 (діапазон: 1-4)). 38 із 104 матерів повідомляли про прийом препаратів заліза щодня протягом коротших або довших періодів під час вагітності. Дві матері були вегетаріанцями, а інші повідомили про всеїдну дієту, хоча дев'ять матерів сказали, що рідко або ніколи не їли м'яса (n = 6) або риби (n = 3).

Статус кобаламіну та фолатів для немовлят

Опубліковано детальний опис стану кобаламіну та фолієвої кислоти (9). Середній рівень кобаламіну в сироватці крові через 6 тижнів становив 170 (134–255) пмоль/л, а середній рівень tHcy у плазмі крові становив 7,59 (6, 21–9, 28) мкмоль/л; Істотних відмінностей у рівнях вітамінів та метаболітів між кобаламіном та контрольними групами не спостерігалось. Через 4 місяці у групи кобаламіну середній рівень кобаламіну в сироватці крові був на 75% вищий, ніж у контрольної групи, і їх середній рівень tHcy був знижений на 39%, але залишався незмінним у контролі, що свідчить про метаболічну відповідь на кобаламін Додаток вказує.

Гематологічні показники у немовлят

Зв'язок доза-ефект між відсотком приросту ваги від народження до 4 місяців з ( a ) вміст ретикулоцитарного гемоглобіну (CHr) та ( ) середній об’єм клітин (MCV) через 4 місяці за узагальненими адитивними моделями. Криві доза-реакція показані у вигляді суцільних ліній з 95% довірчими інтервалами у вигляді пунктирних ліній.

• Завантажте слайд PowerPoint

Через 6 тижнів ретикулоцитоз був оберненим до рівня Hb (r = -0,62, P0,06)).

Зв'язок доза-ефект між ( a ) Рівень гемоглобіну (Hb), ( ) середній об’єм клітин (MCV) та ( c ) Вміст ретикулоцитарного гемоглобіну (CHr) для кількості ретикулоцитів 6 тижнів відповідно до узагальнених адитивних моделей. Криві доза-реакція показані у вигляді суцільних ліній з 95% довірчими інтервалами у вигляді пунктирних ліній.

• Завантажте слайд PowerPoint

обговорення

У немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні з біохімічним профілем, що вказує на порушення функції кобаламіну, добавки кобаламіну мали сильний вплив на метаболічні маркери стану кобаламіну через 6 тижнів (9), але не впливали на гематологічні параметри після 4 місяці. Високий приріст ваги після пологів та чоловіча стать були основними детермінантами гематологічних показників і були пов’язані з нижчим статусом заліза. Ретикулоцитоз асоціювався з низьким рівнем MCV та CHr як через 6 тижнів, так і через 4 місяці, що вказує на існування еритропоезу, обмеженого залізом, протягом перших кількох місяців життя у немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні.

Формальні обмеження проекту дослідження включали відсутність сліпих дослідників та матерів щодо ін'єкції кобаламіну та відсутність ін'єкції плацебо у контрольній групі. Однак ми не вважаємо ці фактори важливими для гематологічного результату у немовлят через 4 місяці.

Мікробіологічні тести використовувались для визначення як фолату сироватки крові, так і кобаламіну. В останні кілька років конкурентні тести на люмінесценцію на зв'язування стають все більш популярними, але мікробіологічний тест все ще вважається золотим стандартом для фолієвої кислоти в сироватці крові (13). У той час як мікробіологічний тест визначає біологічно активний кобаламін, тести люмінесценції з конкурентним зв'язуванням також включають функціонально неактивні аналоги кобаламіну. Недавні дослідження показують, що конкурентнозв'язувальні тести на люмінесценцію можуть показати поширену дисфункцію, особливо коли повідомляються про хибно-нормальні значення дефіциту кобаламіну (14).

У цих маленьких немовлят кількість ретикулоцитів була обернено корельована з рівнем Hb і асоціювалась із низькими показниками MCV та CHr у залізообмеженому еритропоезі (26). На відміну від дорослих, у яких низький рівень Hb через дефіцит заліза зазвичай пов'язаний із нормальним або зниженим рівнем еритроцитів (27), високий рівень еритроцитів спостерігався у немовлят віком від 6 до 48 місяців із залізодефіцитною анемією (28). Ретикулоцитоз, який спостерігався у цій віковій групі, був більш вираженим при легкій та важкій анемії, що пов'язано з тим, що важкий дефіцит заліза пов'язаний з дизеритропоезом, що може зменшити кількість вижилих еритроцитів (28).

Висновок

У немовлят з біохімічними ознаками порушення функції кобаламіну добавки кобаламіну мали помітний вплив на внутрішньоклітинні метаболічні маркери стану кобаламіну через 6 тижнів, але не впливали на гематологічні показники через 4 місяці. У цих немовлят, які переважно перебувають на грудному вигодовуванні, високий відсоток приросту ваги та чоловіча стать були основними детермінантами гематологічних показників і були пов’язані з нижчим статусом заліза через 4 місяці. Потрібні подальші дослідження стану мікроелементів у молодих дітей, переважно на грудному вигодовуванні.

Методи

Вивчіть популяцію та дизайн

У період з грудня 2004 р. По квітень 2006 р. 107 здорових 6-тижневих немовлят, включаючи три пари близнюків, та їх 104 матері були прийняті на службу до місцевої служби охорони здоров’я у Бергені, Норвегія, та були залучені до дослідження кобаламіну. Опубліковано детальний опис методів та результатів дослідження (9). Гематологічні дані були доступні для 107 немовлят через 6 тижнів та 102 немовлят через 4 місяці, і ці діти були включені в цей аналіз.

Через 6 тижнів та 4 місяці було заповнено анкету щодо харчування немовлят та матерів, добавок вітамінів, параметрів росту, співвідношення та споживання тютюну серед матері. Оскільки всі різні типи сумішей та каш, що використовуються, містили залізо, молочні суміші для немовлят визначали як виключно на грудному вигодовуванні, а не на грудному вигодовуванні, що включало комбіноване вигодовування та годування сумішшю, годування сумішшю окремо, і те, і інше в поєднанні з твердою їжею.

Немовлятам блокували рандомізовані внутрішньом'язові ін'єкції на 400 мкл. g Гідроксикобаламін (депо вітаміну В12; Nycomed Pharma, Asker, Норвегія) (n = 54, група кобаламіну) або не призначений для лікування (n = 53, контрольна група). Співробітники лабораторії, відповідальні за взяття та аналіз крові, були сліпими для розподілу груп.

Етичне схвалення протоколу було надано регіональним комітетом з питань етики медичних досліджень, а матері дали інформовану інформовану згоду. Це дослідження зареєстровано в ClinicalTrials.gov за номером NCT00479479.

Забір крові та біохімічний аналіз

Зразки крові отримували через 6 тижнів і 4 місяці шляхом антекубітальної венепункції та збирали у пробірки для ЕДТА (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ). Гематологічні параметри (Hb, MCV, еритроцити, ширина розподілу еритроцитів, CHr, лейкоцити та тромбоцити) аналізували протягом 4 годин за допомогою автоматизованого гематологічного аналізатора (ADVIA 120; Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY). Індекси ретикулоцитів (ретикулоцити та CHr) були доступні для субпопуляції досліджуваної групи (n = 62 із 107 протягом 6 тижнів, n = 72 із 102 протягом 4 місяців та n = 58 із 102 парних даних протягом 6 тижнів та 4 місяців). .

Зразки крові, використані для отримання плазми ЕДТА, поміщали в крижану воду і плазму відокремлювали протягом 4 годин. Рівні tHcy та метилмалонової кислоти в плазмі досліджували за допомогою методу газової хроматографії-мас-спектрометрії, заснованого на дериватизації метилхлороформату (29). Сироватку отримували шляхом збору крові в пробірки для вакуунації без добавки (Бектон Дікінсон). Сироватковий кобаламін визначали за допомогою мікробіологічного аналізу Lactobacillus leichmannii (30), а фолат сироватки крові - за допомогою мікробіологічного аналізу Lactobacillus casei (31).

Статистичний аналіз

Результати представлені як середній та міжквартильний діапазон, а також середнє значення та SD. Медіани порівнювали з тестом Уілкоксона з підписами та У-критерієм Манна-Уітні та середніми значеннями за тестом Стьюдента. Різниця в категоріальних змінних була перевірена за допомогою тесту 2.

Кореляція Спірмена була використана для оцінки взаємозв'язку між відсотком приросту ваги та вагою при народженні та взаємозв'язку між гематологічними показниками через 6 тижнів та 4 місяці. Було використано кілька моделей лінійної регресії для оцінки взаємозв'язку гематологічних показників дитини (Hb, MCV та CHr) через 4 місяці із втручанням кобаламіну, статтю, процентним збільшенням ваги від народження до 4 місяців, харчуванням немовлят та використанням препаратів заліза у матері від 6 тижнів до 4 Місяці

Взаємозв'язок доза-реакція рівнів Hb, MCV та CHr при кількості ретикулоцитів 6 тижнів та відсоткове збільшення маси CHr та MCV через 4 місяці були графічно представлені узагальненими адитивними моделями.

Узагальнені адитивні моделі були розраховані за допомогою програмного пакету mgcv (версія 1.4-1) у R (Die R-Stiftung für Statistisches Rechnen, версія 2.8.1; Відень, Австрія), а для статистичного пакету SPSS (версія 18) що використовує решту статистичних оцінок. Значення Р з обох сторін

---