Біологічне дослідження харчової алергії та непереносимості у дітей - PDF
Біологічне дослідження харчової алергії та непереносимості у дітей Ph.Biol. Romy GADISSEUR 13/10/2011, Fleurus
Епідеміологія алергії Алергічна астма = 1 хронічне захворювання у дітей. Харчова алергія = 7% дітей. +/- 30% алергія. Вартість для суспільства +++. Алергія х 2 за останні 15 років у розвинених країнах ! Причина? Вестернізований спосіб життя. Гігієнічна теорія, асептизація Подовження фізіологічного профілю Th2, пов'язане з підвищеним ризиком IgE-залежної сенсибілізації. Інфекції шлунково-кишкового тракту => Модифікована імунна відповідь, спрямована на алергени навколишнього середовища: розвиток алергії вживання антибіотиків. Ширший асортимент харчових продуктів (ківі, кунжут.). Харчові продукти харчової промисловості (масковані, модифіковані продукти харчування). Малорухливий спосіб життя (гігрометрія ++ і температура ++) & Вплив побутових алергенів >> вплив нових алергенів (утримання, кондиціонер, домашні тварини). Дитяче пасивне куріння. Забруднення повітря +++. Нові алергени (латекс)
. Мову. 1. Харчова алергія? 2. Харчова гіперчутливість? 3. Непереносимість їжі? 4. Толерантність до їжі?
Визначення відповідно до нових Керівних принципів NIAID 1. Харчова алергія? Побічна реакція, зумовлена специфічною імунною реакцією, яка виникає після відтворення певної їжі відтворюваним способом. Деякі люди мають здатність розвивати сенсибілізацію (про що свідчить наявність специфічних IgE) до харчового алергену, не проявляючи клінічних симптомів при впливі на їжу. Однак харчова алергія вимагає крім ознак і клінічних ознак! 2. Харчова гіперчутливість? Хвиля: Іноді використовується для опису харчової алергії або харчової непереносимості або будь-якого іншого типу реакції після прийому їжі.
Визначення відповідно до нових Керівних принципів NIAID 3. Непереносимість харчових продуктів Побічна реакція, спричинена неімунною реакцією, яка виникає після впливу певної їжі та відтворюється. 4. Толерантність до їжі Ми говоримо про толерантність, коли людина виліковується від харчової алергії, тобто якщо він більше не проявляє симптомів при прийомі їжі, природним шляхом або після десенсибілізації. Толерантність може бути короткою або тривалою. Механізм настання толерантності ще не з’ясований. Толерантність і нетерпимість: ніяких стосунків! Можна говорити про харчові реакції як на алергію, так і на непереносимість. Примітки: Неімунологічні реакції або реакції непереносимості їжі включають порушення обміну речовин, токсичні реакції та інші. Реакції іноді можуть бути дуже чутливими до реакцій, що виникають під час алергічної імунологічної реакції.
Алергія та симптоми Різна шкіра (кропив'янка, ангіоневротичний набряк, висип, атопічний дерматит), дихальна та очна (астма, ангіоневротичний набряк гортані, рино-кон'юнктивіт), травна (діарея, запор, біль у животі, блювота, регургітація, порушення всмоктування). Алергічна реакція може призвести до анафілактичного шоку. Залежно від віку: атопічний дерматит = скоростиглий, харчова алергія у немовлят, 80% клінічних картин у віці від 0 до 1 року; Частота його зменшується з віком і досягає 4% після досягнення 15-річного віку. Більш важкий при синдромі множинної харчової алергії і починається дуже рано. Найчастіше інкримінованими алергенами є молоко, яйця та пшениця. синдром блідості/млявості/гіпотонії: Особлива форма вираження алергії, що спостерігається у маленьких дітей у контексті харчової алергії на молоко, яйця та рибу. Частота анафілактичного шоку зростає з віком. Сприяючі фактори: Підвищення або виявлення харчової алергії: фізичні вправи у разі анафілаксії пшениці, спричиненої зусиллями, прийом нестероїдних протизапальних препаратів, прийом алкоголю, бета-блокаторів та інгібіторів ферменту.
Харчова алергія Діти 0-4 років Вважається, що 90% харчових алергій відповідають 7 категоріям продуктів харчування: молоко, яйця, арахіс, горіхи, пшениця, риба, молюски (і соя в США). Частота алергій на рослинні алергени зростає з віком, разом із набуттям сенсибілізації до пилку. Шипіння - Ніс - Очі - Вуха Яйця Коров’яче молоко Соя Пшениця Рибні кліщі Кошаче волосся Пилок берези Яйця Коров’яче молоко Соя Пшениця Арахіс Горіхи Висип Кліщі Кошаче волосся Тарган Жиркові спазми Яйця Коров’яче молоко Соєві боби Пшениця Анафілаксия Яйця Арахіс Соя Пшениця
Харчові алергії Діти від 4 до 16 років Кішкові кліщі Кішка Собака Інші тварини Тарган Шипіння - Ніс - Очі Зовнішні трави, деревна та трав'яниста пилок Яйця Коров'яче молоко Арахіс Горіхи Анафілаксия Пшеничне соєві боби Висип Яйця Коров'яче молоко Пшеничне соєве боби Арахісові горіхи Кліщі Кліщі котячі Таргани Рецидив Коров’яче молоко Арахіс Кліщі Пшениця Шерсть котів Соя Болі в животі Яйця Коров’яче молоко Соя Пшениця
Первинна профілактика харчової алергії Європейські, французькі рекомендації: Відсутність дієти під час вагітності. Грудне вигодовування (без дієти у матері) протягом 4-6 місяців, якщо це неможливо: великий гідролізат казеїну або часткова сироватка. Формули на основі соєвих білків не рекомендуються, навіть якщо діти перебувають у групі ризику. Ніхто не сумнівається в користі грудного вигодовування для новонароджених та маленьких немовлят з точки зору харчування, розвитку та зменшення вірусних інфекцій у перші місяці життя. Щодо алергії, грудне вигодовування відіграє активну профілактичну роль. Але годування груддю більше не слід розглядати як основний інструмент первинної профілактики, заснованої виключно на уникненні алергенів. Наукові суспільства визнають, що грудне вигодовування затримує початок атопічної екземи та має захисний ефект від алергії на коров’яче молоко.
Первинна профілактика харчової алергії Європейські та французькі рекомендації: Введення твердих харчових алергенів відповідно до різних генетичних та епігенетичних факторів: травна флора, імунні клітини, тип і кількість алергенів, рН шлунка. Введення занадто рано чи пізно: шкідливо для набуття такої толерантності до алергену та сприятиме розвитку алергії. Диверсифікація: 17 століття 24 століття, з продуктами, багатими залізом (яйце, м’ясо) та довголанцюговими поліненасиченими жирними кислотами (яйце, жирна риба); прогресивна клейковина від 4 до 7 місяців. Затримка введення твердої їжі> 6 місяців не зменшить ризик алергії. Відкладене введення твердої їжі збільшує ризик алергії. Основна профілактика алергії полягала б у придбанні толерантності до алергену.
Графік діагностики алергії. Характеристика та позначення IgE Стандартизація алергенних екстрактів Панелі рекомбінантних алергенів, що імітують алергенні екстракти ImmunoCAP ISAC (Phadia/VBC Genomics) Провокаційні тести (SPT) RAST 1 клоновані алергени Перший алерген мікрочип 1880 1967 1988-91 1995-99 2000 2008 Тести IN-VIVO Тести IN-VITRO ANAMNESE CLINIQUE Вирішений компонент - діагностика
Алергологічна оцінка Клінічна історія Опис симптомів, постпрандіальний характер, вивчення дієти, сімейної та особистої історії атопії. Тести in vivo: Можна проводити дуже рано, з перших місяців життя! Дуже добре переноситься Уникайте будь-якою ціною затримки діагностики та початку лікування! Уникайте загострення демонстрацій. Тест in vitro: Визначення специфічних сумішей IgE алергенних екстрактів Алергенні екстракти Рекомбінантні або очищені природні білки Мультиплексні методи
Тести алергологічної оцінки in vivo Тести in vivo: шкірні тести Епідермальна пункція через краплю алергену (комерційний екстракт), що наноситься на шкіру пацієнта (передпліччя, спина). Читання через 15 хвилин. Вважається позитивним, коли папула становить 3 мм і більше. Інтерпретація при одночасному лікуванні антигістамінними препаратами ! Реалістичні шкірні тести (від уколу до уколу) так само з натуральною їжею! Тести на усне випробування Золотий стандарт = подвійний сліпий плацебо-контрольований прийом їжі Встановлює діагноз шляхом відтворення алергічних проявів. Дозволяє контролювати харчову алергію шляхом визначення реактогенного порогу та дозволяє контролювати розвиток толерантності з часом. Це повинно проводитись в лікарняних умовах командою, яка пройшла підготовку до цього виду обстеження. діагностика.
Гіперчутливість: класифікація Гелла та Кумбса (I) Гіперчутливість 1 типу (негайна H., реагінічна або атопічна алергія): Гуморальний імунітет = Алергія. Ø Опосередкований специфічним алергеном IgE (IgE залежним). Ø Спадкова схильність. Різні клінічні прояви (дерматит, кон’юнктивіт, астма, пилковий риніт, розлади травлення, кропив’янка, анафілактичний шок). Ø З’являються через кілька хвилин. IgE, зафіксовані на тканинних тучних клітинах і на базофілах крові, реагують з Ag (алергеном), викликаючи таким чином дегрануляцію цих клітин (вивільнення гістаміну та інших медіаторів).
Рекомбінанти: Діагностика на основі джерела алергену SD Діагностика на основі джерела алергену SD Extrakt von Birkenpollen Діагностика на основі компонентів алергену CRD rbet v 1 rbet v 2 rbet v 4
Номенклатура алергенів згідно з IUIS (Міжнародним союзом імунологічних товариств) t: дерево f: їжа g: трава i: комаха w: пшениця c: лікування d: пиловий кліщ m: волога e: епітелій p: паразит k: (професійні алергени ) Емпірична номенклатура Таксон роду t3: Betula verucosa Bet v 1,2,4,6,7 g6: Phleum pratense Phl p 1, 5, 7, 12 d1: Дерматофаг. птеронії. Der p 1, 2, 3, 10, e1: Felis domesticus Fel d 1, 2, 3, f13: Arachis hypogaea Ara h 1, 2, 3, 8, "Рекомбінантна номенклатура" (IUIS) Номер, пов'язаний із порядком очищення білка
Приклад: Arachis Hypogea Ara h 1: Білок для зберігання (віцилін) Ara h 9: nsltp основний алерген Стійкий до нагрівання та травлення. Ара h 2: Зберігання білка (конглютин) Важкі реакції >> системні реакції! + часті, сенсибілізуючий потенціал ++, стійкість ++ до травлення. Ara h 8: Профілін Алергенність: Ara h 3: Зберігання білків (гліцинін) Перехресні реакції між багатьма фруктами Ara h 2 в 100 разів більше алергену та овочам. потужний, ніж Ara h 1 незначний алерген, рідкісна сенсибілізація. Koppelman SJ et al., Clin Exp Allergy 2004,34: 583 Ara h 8: PR-10 Ara h 2 має високу стабільність CCD (MUXF3) протеолітичних основних арахісових алергенів у пацієнтів з алергією на пилок берези Лемана. K et al, Biochem J, Cross-reactive 2006: 395-463 Вуглеводні детермінанти Чутливий Після спекання та арахісу теплом до перетравлення. Рідко алергенність Ara h асоційованого 2 помножується на симптоми. 3 Maleki SJ et al, J Allergy Clin Present Immunol, у 2003 р. більшість рослин.
Перевага рекомбінантних алергенів Арахіс (f13) Арахіс (f13): Neg Арахіс (f13): Pos Ara h 2: Neg Арахіс (f13): Pos Ara h 2: Pos Малий ризик важких реакцій Ризик важкої реакції? Як дослідити? Рекомендації Дуже високий ризик важкої реакції Тест: Ara h 1 (f422) Ara h 3 (f424) Ara h 9 (f427) Ara h 8 (f352) CCD (Ro214) Ризик
Клінічні випадки Перевага рекомбінантних алергенів (1) 1. 2 роки: Проконсультуватися щодо атопічної екземи +++, епізоду еритеми. f13 (арахіс) = 1,2 куа/л. SPT +: арахіс, фундук, береза, трави. SPT -: соя. Екзема, риніт, шлунково-кишковий біль та еритема після прийому горіхів. Які ризики? Береза?
Клінічні випадки Перевага рекомбінантних алергенів (1) Арахіс (f13) = 1,2 куа/л Ara h 2 (f423) = 0,68 куа/л Арахіс (f13): Pos Ara h 2: Pos Дуже високий ризик важкої реакції Тести: Ara h 1100 куа/л. IgEs +: береза, яблуко, груша, волоський горіх, фундук, абрикос, а нещодавно селера та кріп. Атопія, полісенсибілізація, оральний алергічний синдром (ОАС) і нещодавно прогресує до ускладнень дихання. Які ризики? А як щодо березової обізнаності? І недавня еволюція алергії?
Клінічні випадки Інтерес до рекомбінантних алергенів (2) Арахіс (f13)> 100 куа/л Ара г 2 (f423) Алергія на яєчний білок Шкірні проби: суттєво позитивна реакція на яєчний білок. Загальна кількість IgE = 23,7 ка/л (поріг> 17,5 ку/л). Позитивний питомий IgE (> 0,10 куа/л): Яєчний білок (f1) = 3,70 куа/л. Як ця алергія буде розвиватися з часом? Стійкість проти роздільної здатності овомукоїду (ngal d 1) = 3,53 куа/л. Ø Постійна алергія з часом, уникання сирих і варених яєць.
Яєчна алергія Користь рекомбінантних алергенів Овомукоїд = 3,53 куа/л.
, 3 роки: Історія випадків множинної алергії Інтерес до мультиплексів 6 місяців: Початок атопічного дерматиту, шлунково-кишкових розладів. Дозування IgE: Діти на коров’ячому молоці та дієті для уникнення яєць Поліпшення симптомів 9 місяців: Екзема ++, риніт 16 місяців: Багаторічний риніт, закладеність носа, кашель 20 місяців: Оральний алергічний синдром (яблуко) 2 роки: Ангіоневротичний набряк => Подальше дослідження
ImmunoCAP ISAC VBC Genomics (експерт у галузі мікрочипів) та Phadia (експерт у галузі діагностики алергії in vitro), комерціалізований у 2008 р. Harwanegg C et al, Expert Rev Mol Diagn 2004 Мініатюрна платформа імунологічного аналізу для вимірювання IgE, специфічного для> 40 різних алергенних джерел за один крок. Заснована на технології рекомбінантних алергенів та очищених природних білків, призначена для фахівців-алергологів. 103 рекомбінантні або очищені природні алергени, іммобілізовані на твердому носії. Дозволяє проводити CRD легко і недорого. Інтерес до педіатрії: потрібно 20 мкл сироватки.
Алерген-триплет після реакції флуоресценції Молекула алергену Імуно твердофазний AllergenChip (ISAC) Помічені флуоресценцією вторинні антитіла IgE до IgE IgE людини (у сироватці крові) 4 місця реакції
Імуно твердофазний алергенний чіп (ISAC)
Дата друку: 19.10.2010 ID/MR #: Стать: M CIN MEDIA INF ORMATION Лікар, що замовляє: Адреса: Dr. SEG HAY E MC ІНФОРМАЦІЯ ПРО ЗРАЗОК ІНФОРМАЦІЯ ПРО Хворих 2. Алергенні компоненти, класифіковані за білковими групами 2.1 Рослинне походження Основні специфічні компоненти Ідентифікатор зразка: 0L27924_3 Ідентифікатор пацієнта: VANDERPOELEN Marty Kiwi nact d 1 Концерн цистеїнової протеази Позитивні шкірні тести на багато фруктів та овочів, пилку та латексу.
Ківі, соя Pollens Profilins PR10
, 8 років: Історія Випадки множинної алергії Перевага мультиплексів Атопічний дерматит при грудному вигодовуванні. 1 рік: блювота після прийому персика. заборонено на персик/абрикос. 7,5 років: біль у животі, блювота після будь-якого прийому їжі та запор. 8 років: IgE загально = 337 ку/л, специфічний IgE для сумішей +++. Гастроскопія виключає еозинофільний езофагіт. Алергологічна оцінка за допомогою аналізу крові та конкретної дози IgE ". Безліч позитивних властивостей для алергенних екстрактів, а потім для рекомбінантних алергенів.