Дослідницька лабораторія - PDF Завантажити безкоштовно

Народно-Демократична Республіка Алжир Міністерство вищої освіти та наукових досліджень УНІВЕРСИТЕТ ПРО БЕКР БЕЛЬКАЙД ТЛЕМЦЕН Факультет природничих і біологічних наук, наук про Землю та Всесвіт Науково-дослідна лабораторія Фізіологія, фізіопатологія та біохімія харчування РОБОТА Професор кафедри біології, представлена: M elle AYAD Amina З метою здобуття наукового ступеня доктора фізиологічних та біохімічних методів харчування Вплив гіпержирної дієти, збагаченої оливковою та лляною олією, на ожирілого щура Вістар Голова: Випробувач: Випробувач: Випробувач: Випробувач: Промоутер: Університет професора Нассіми Мохтари Tlemcen, Algeria BOUANANE Samira MCA University of Tlemcen, Algeria SLIMANI Miloud Professor University of SAIDA, Algeria AOUES Abdelkader Professor University of Oran, Algeria AIT YAHIA Dalila Professor University of Oran, Algeria AIT YAHIA Dalila Professor Oran, Algeria MERZOUK Hafida, Алжир Енн Університетський рік: 2013-2014

ПОСВЯЧУЄМО За допомогою Бога Всемогутнього Милостивого і Милостивого я зміг виконати цю роботу, яку присвячую: Моїй дорогій матері Як свідчення моєї глибокої вдячності та моєї незаперечної вдячності за всі жертви, якими вона мені подобається, усі довіру, яку вона дарує мені, і всю любов, якою вона мене оточує. Моєму дорогому батькові, висловивши вдячність, глибоку любов і пристрасть, за його впевненість, його моральну та матеріальну підтримку та за його нескінченну любов. Моїй сестрі Амель, моїм братам Ісмаїлу та Абдеррахмане та моєму дядькові Ахмеду. Всім викладачам, які сприяли моєму навчанню. Всім, хто тим чи іншим чином сприяв розвитку цієї роботи. 3

"Нехай ваше м'ясо стане вашим єдиним лікарським засобом!" Гіппократ 4

ПУБЛІКАЦІЇ ТА КОМУНІКАЦІЇ Робота, представлена в цій докторській дисертації, була предметом міжнародних наукових публікацій і була представлена в повідомленнях на міжнародних конгресах. Наукові публікації AYAD Amina, MERZOUK Hafida, MERZOUK Sid Ahmed, NARCE Michel (2013). Окислювач/антиоксидантний статус крові у перегодованих щурів: порівняльний вплив дієт, багатих олією на соняшникові та олівеліновані суміші. Biomed Environment Sci, 26 (8): 390-393. АЯД Аміна, МЕРЗОУК Хафіда, БАБА ХАМЕД Яміна, МЕРЗОУК Сід Ахмед, ГРЕСТІ Жозеф, НАРЦ Мішель (2013). Сприятливий вплив дієтичних оливкових та лляних олій на ліпіди сироватки та тканин та окислювально-відновний стан у старіючих ожирілих щурів. Журнал природних продуктів і рослинних ресурсів, 3 (2): 61-71. Наукові комунікації 1-й Міжнародний конгрес Алжирського товариства харчування. 05-06 грудня 2012 року, Оран, Алжир. Аміна АЯД, Хафіда МЕРЗУК. Сприятливий вплив PUFA/MUFA на окислювальний стрес у ожирілих щурів Wistar. 1-й міжнародний семінар з якості продуктів харчування та харчування. 08-09 грудня 2009 р., Тлемсен, Алжир. Аміна АЯД, Тарік АТТАР, Нурія МЕДЖАТІ, Яхія ХАРЕК. Оцінка рівня селену у вибірці діабетичної популяції Тлемсена. 5

ЗМІСТ ВСТУП 18 СУЧАСНИЙ СТАН ТЕМИ 25 I. Вплив дієти з високим вмістом жирів на обмін речовин та баланс окислювачів/антиоксидантів II. Вплив різних жирних кислот на обмін речовин та баланс окислювачів/антиоксидантів 26 42 III. Вплив старіння на обмін речовин та баланс окислювачів/антиоксидантів 50 МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ 60 I. Експериментальний протокол 61 I.1. Тварини та дієта 61 I.2. Жертви та зразки крові 61 I.3. Збір органів 63 II. Біохімічні аналізи 63 II.1. Визначення вмісту глюкози 63 II.2. Визначення загальних білків 64 II.3. Дозування інсуліну 64 II.4. Визначення лептину 64 II.5. Визначення адипонектину 65 II.6. Визначення показників ліпідів на рівні сироватки, ліпопротеїнів та органів 65 II.6.1. Поділ ліпопротеїдів 65 II.6.2. Визначення вмісту холестерину та тригліцеридів 66 II.6.3. Вилучення ліпідів із сироватки та органів та визначення складу жирних кислот II.7. Визначення активності лецитину холестерину ацилтрансферази (LCAT, EC 2.3.1.43) 66 67 6

ДИСКУСІЯ 108 ВИСНОВОК 131 БІБЛІОГРАФІЧНА ЛІТЕРАТУРА 135 ДОДАТКИ 160 9

ТО: контрольні щури оливки TOL: щури контрольні оливка/льон Трег: регуляторний Т-лімфоцит ТЕС: постпрандіальний термогенез TX: тромбоксан Vit C: вітамін C Vit E: вітамін E VLDL: ліпопротеїн дуже низької щільності VLDL-C: холестерин ліпопротеїдів дуже низька щільність α -msh: α-меланоцитостимулюючий гормон 8-епі-PGF2α: 8-епі-простагландин F2α 5-HPEPE: 5-гідропероксиеікозапентаенова кислота 5-HPETE: 5-гідропероксиеікозатетраєнова кислота 13

Рисунок 26: Діяльність ферментів ліпопротеїнової ліпази в органах різних партій 96 щурів Рисунок 27: Активність гормоночутливого ферменту ліпази (LHS) жирової тканини 97 різних партій щурів Рисунок 28: Активність лецитин-холестерин-ацил-трансферазна фермент (LCAT) 99 плазми з різних партій щурів Рисунок 29: Вміст сироватки вітаміну С та еритроцитів глутатіон та активність ферменту каталази 100 л еритроцитів у різних партіях щурів Рисунок 30: Маркери окисного стану плазма в різних партіях щурів 101 Рисунок 31: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу печінки у різних групах 103 щурів Рисунок 32: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу м’язів у різних партіях 104 щурів Рисунок 33: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу жирової тканини в 106 різних партіях щурів Рисунок 34: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу кишечника в різних 107 партіях щурів 15

Таблиця A 13: Активність ферменту лецитин-холестерину ацилтрансферази (LCAT) у плазмі різних партій щурів Таблиця A 14: Вміст сироватки вітаміну С та еритроцитів глутатіону та активність ферменту каталази еритроцитів у різних партіях щурів Таблиця A 15: Маркери окисного стану плазми в різних партіях щурів 175 173 174 Таблиця A 16: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу печінки у різних партіях щурів Таблиця A 17: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу м'язів у різних партіях щурів Таблиця A 18: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу жирової тканини в різних партіях щурів Таблиця A 19: Маркери окислювального/антиоксидантного статусу кишечника у різних партіях щурів 176 177 178 179 17

каталаза) у контрольних щурів із ожирінням та віком. Це дослідження дозволить нам краще охарактеризувати вплив їстівних олій на здоров’я відповідно до віку. 24

ПОТОЧНИЙ СТАТ ТЕМИ 25

Рисунок 1: Вплив на енергетичний баланс та збільшення ваги [BERGOUIGNAN, 2008] 27

Рисунок 2: Можливий вплив харчових ліпідів на ліпіди після їжі та результати метаболізму [LAUGERETTE et al., 2011] 28

Рисунок 3: Спрощена схема взаємозв’язків периферії та центральної нервової системи для регуляції харчової поведінки [BECK, 2003] Тканини: AP: область постреми; ARC: арочне ядро; HL: бічний гіпоталамус; НДМ: дорсомедіальне ядро; NPV: паравентрикулярне ядро; НТС: ядро одиночного тракту; НВМ: вентромедіальне ядро; ТА: жирова тканина; ТД: травний тракт; Пептиди: Apo A IV: аполіпопротеїн A IV; CCK: холецистокінін; GLP: глюкагоноподібні пептиди; NT: нейротензин; PYY: YY пептид. 30

Малюнок 4: Еволюція популяцій клітин імунної системи в жировій тканині під час ожиріння [KALUPAHANA et al., 2012] 32

Малюнок 5: Жирова тканина у осіб із ожирінням [LUGOGO et al., 2011] 33

Малюнок 6: Потенційні ділянки та механізми, що перешкоджають регуляції енергетичного балансу, що призводить до ожиріння [MYERS et al., 2012] 35

Рисунок 7: Фізіологія лептинової резистентності [ST-PIERRE and TREMBLAY, 2012] 36

Рисунок 8: Вплив дієти на окислювальний метаболізм [CODONER-FRANCH FRANCH et al., 2011] 40

Рисунок 9: Огляд наслідків ожиріння та інсулінорезистентності, пов'язаних з резистентністю до інсуліну, на відповідні органи та системи організму [RAY and CLEARY, 2012] 41

Рисунок 10: Контроль ліпідного та вуглеводного обміну за допомогою ПНЖК сімейства n-3 [POUDYAL et al., 2011] 48

Малюнок 11: Метаболічні шляхи ПНЖК сімейства n-3 n і n-6 [POUDYAL et al., 2011] 49

Рисунок 12: Вільний кисень та азотисті радикали як рушійна сила старіння та нейродегенеративних захворювань [KERN та BEHL, 2009] 53

Рисунок 13: Основні фактори та дійові особи в розвитку окисного стресу, а також потенційні негативні результати для здоров'я людини [GHANOTAKIS and GIARDI, 2011] 55

Малюнок 14: Оксидативний стрес та патології людини [СЕДЕЛЬНІКОВА та ін., 2010] 56

Рисунок 15: Зв'язок між патологіями, пов'язаними зі старінням [CAMPISI et al., 2011] 59

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ 60

Таблиця 2: Склад дієт, споживаних щурами Склад (% від маси) 62 Дієта T TO TOL C CO COL Білки 19 19 19 21 21 21 Вуглеводи 58 58 58 31 31 31 Жир 3,5 3,5 3,5 30 30 30 Соняшникова олія 5 0 0 5 0 2,5 Оливкова олія 0 5 2,5 0 5 0 Лляна олія 0 0 2,5 0 0 0 Клітковина 8 8 8 4 4 4 Волога 5 5 5 3 3 3 Мінерали 1 1 1 1 1 1 Вітаміни 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 Склад (% енергія) Білки 20 20 20 16 16 16 Вуглеводи 60 60 60 24 24 24 Ліпіди 20 20 20 60 60 60 Енергія (Ккал/100 г) Жирні кислоти: 386 386 386 523 523 523 AGS 29 22 20 44 39,5 34 MUFA 21 30 28 28 33 31 C18: 2n-6 44 46 34 27 26.5 23 C18: 3n-3 3 3 15 1 1 12 C20: 4n-6 1 1 1 0 0 0 n-9/n-3 7 7 1.87 28 33 2.58 Склад дієти визначається в лабораторії природних продуктів, факультет СНВТУ, Тлемсенський університет. Композиція жирних кислот виробляється методом ВЕРХ у лабораторії ліпідів UPRES Факультету наук Габріеля Бургундського університету, Діжон, Франція. Т: режим контролю; ДО: контролювати дієту, збагачену оливковою олією; TOL: контрольна дієта, збагачена оливковою/лляною олією; С: дієта в їдальні; CO: дієта в їдальні, збагачена оливковою олією; КОЛ: дієта в їдальні, збагачена оливковою/лляною олією.

IV. Статистичний аналіз Результати представлені як середнє значення ± стандартна помилка. Після дисперсійного аналізу порівняння середніх показників між трьома групами контрольних щурів та між трьома групами ожирілих щурів проводиться за допомогою однобічного тесту ANOVA. Цей аналіз завершується тестом Тукі з метою класифікації та порівняння засобів у парах. Засоби, позначені різними буквами (a, b, c, d), суттєво відрізняються (P