Фактор некрозу пухлини ФНО-альфа - Синево

Інформованийii загальне та рекомендації щодо визначення ФНО-α

TNF (фактор некрозу пухлини) - це запальний цитокін, назва якого походить від його здатності руйнувати пухлинні клітини та індукувати геморагічний некроз у трансплантованих мишам пухлинах. .

TNF-α (казектин) та TNF-β (лімфотоксин) спочатку описували як цитотоксичні фактори, що виробляються макрофагами та лімфоцитами, відповідно; Пізніше було встановлено, що TNF-α та TNF-β - це два білки, які виявляють гомологію до 34% амінокислотних послідовностей 3; 5. Обидва медіатори діють на клітини-мішені через однакові рецептори і тому мають схожі, але не однакові біологічні ефекти.

Ген TNF-α знаходиться в хромосомі 6. В умовах денатурації TNF-α є неглікозильованим білком 17 кДа. Біологічно активною формою TNF-α є тример. На додаток до цієї розчинної форми існує мембранно-зв’язана форма (28 кДа), розташована на поверхні клітин, що продукують TNF-α, і яка служить пулом для розчинної форми, що утворюється в результаті протеолітичного розщеплення 3 .

TNF-α продукується не тільки макрофагами та моноцитами, але також лімфоцитами, тучними клітинами, нейтрофілами, кератиноцитами, астроцитами, мікроглією, гладком'язовими клітинами та деякими клітинними лініями пухлини 5. Велика кількість ФНП виділяється при контакті макрофагів, CD4 + Т-лімфоцитів та клітин природних кілерів (NK) з ліпополісахаридами, продуктами бактерій та інтерлейкіном 1 3 .

TNF-α діє безпосередньо через два різні поверхневі рецептори, звані TNFR I і TNFR II, що мають різну молекулярну вагу 3; 4; 5. Ці рецептори можна ідентифікувати на всіх типах клітин, крім еритроцитів. Частини цих рецепторів розщеплюються протеазами і досягають позаклітинного середовища, утворюючи розчинні рецептори; вони діють як ендогенні інгібітори TNF-α і, таким чином, регулюють рівень позаклітинного TNF-α 4 .

Зв'язування TNF-α з рецептором призводить до конформаційних змін у структурі рецепторів, що призводить до каскадної активації транскрипції інших білків, що беруть участь у проліферації клітин, запальній реакції та клітинному апоптозі. TNF-α може мати місцеву паракринну дію (місцеве збільшення концентрації TNF може спричинити основні ознаки запалення: почервоніння, біль, нагрівання та набряк) або може діяти віддалено, як ендокринні гормони 5. Завдяки присутності своїх рецепторів у більшості тканин TNF-α чинить широкий спектр біологічних ефектів:

цитолітичний та цитостатичний вплив на клітини пухлини;
хемотаксична дія на нейтрофіли 3;
підвищує проникність ендотеліальних клітин в області із запаленням; вони не тільки викликають накопичення імунних клітин, але й впливають на процес згортання;
активізує різні обмінні процеси в м’язових клітинах і адипоцитах, забезпечуючи енергію, необхідну для запальної реакції 1;
в макрофагах стимулює фагоцитоз і вироблення простагландину Е2;
інсулінорезистентність зростає в інших тканинах;
активує остеокласти, стимулюючи тим самим резорбцію кісток;
є фактором росту фібробластів і стимулює синтез колагенази;
посилює проліферацію Т-лімфоцитів після стимуляції інтерлейкіном 2 3;
викликає анорексію та лихоманку, діючи як ендогенний піроген 1;
відповідає за синдром кахексії, пов'язаний зі злоякісними захворюваннями та більшістю паразитарних інвазій 5 .

Визначення сироваткового TNF-α є маркером системної запальної реакції (SIRS), пов’язаної з сепсисом, травмою та серцевою недостатністю. Деякі дослідження показали зв'язок концентрації TNF-α у лікворі зі ступенем активності при розсіяному склерозі; з іншого боку, визначення TNF-α може бути корисним для диференціації бактеріального менінгіту від інших причин менінгіту 1 .

Дослідження на тваринах показали, що TNF-α бере участь у патогенезі ревматоїдного артриту та запальних захворювань кишечника завдяки своєму прозапальному ефекту, активуючи ендотеліальні клітини та індукуючи хемотаксис нейтрофілів. З цієї причини лікування цих станів також включає інгібітори TNF-α: або моноклональні антитіла до TNF-α (інфліксімаб, адалімубаб), або злиті білки рецепторів антитіл, відповідно TNFRII-IgG1 (етанерцепт) 5 .

Рівні TNF-α можуть застосовуватися при діагностиці імунних розладів та при моніторингу лікування, лише у взаємозв'язку з додатковими клінічними та параклінічними даними 2 .

Навчання пацієнта - натщесерце (на голодний шлунок) або після їжі 2 .

Зібраний зразок - венозна кров 2 .

Збиральний контейнер - пилосос без антикоагулянта, з/без розділювального гелю 2 .

Кількість зібраного - мінімум 0,5 мл ser 2 .

Причини відхилення доказів - інтенсивно гемолізований, жовтяничний, ліпемічний або бактеріально забруднений зразок; зразки, які не надійшли до лабораторії замороженими 2 .

Необхідна обробка після збору врожаю - сироватку відокремлюють центрифугуванням якомога швидше після повного утворення сиру, і зразок негайно заморожують при -20 ° C; зразки, зібрані поза лабораторними пунктами, транспортуються до контейнера, призначеного для заморожених зразків 2 .

Стабільність зразка - сироватка стабільна протягом 1 місяця при -20 ° C; не розморожувати/не заморожувати 2 .

Метод - імунохімічний метод з детектуванням хемілюмінесценції (CLIA) 2 .

Довідкові значення 1 - 2 .

Інтерпретація результатів

Підвищений рівень TNF-α реєструється при сепсисі, травмах, аутоімунних та хронічних запальних захворюваннях (ревматоїдний артрит, анкілозуючий спондиліт, хвороба Крона, псоріаз), інфекційних захворюваннях та відторгненні трансплантата 2 .