ІНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ, ФІЗІОЛОГІЇ І ЗАХИСТУ РОСЛИН За допомогою рукопису С

ІНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ, ФІЗІОЛОГІЇ ТА ЗАХИСТ РОСЛИН Як рукопис C.Z.U. 633.854.78: 631.523 (043.2) НЕЧІФОР ВІКТОРІЯ ДІЯ ГІБЕРЕЛІНУ НА МІКРОСПОРОГЕНЕЗ СОЛНЕЧНИКА (HELIANTHUS ANNUUS L.) 162.01. ОВОЧНА ГЕНЕТИКА Докторська дисертація з біологічних наук Науковий керівник DUCA Марія, доктор біологічних наук, професор університету, академік Автор НЕЧІФОР Вікторія КІШІНЮ, 2018

фізіології

4.2.1. Біоінформатика, характерна для генів CycD3, PCNA1, HIS1-3, H1.3. 73 4.2.2. Аналіз результатів вираження. 79 4.3. Вивчення експресії генів, що бере участь у сегрегації хромосом MND1, AHP2, ASK1, DYAD. 83 4.3.1. Біоінформатика, характерна для генів. 84 4.3.2. Аналіз результатів вираження. 89 4.4. Оцінка рівня експресії генів з функціями утворення та активності клітинних мембран. 93 4.4.1. Біоінформатика, характерна для генів EXPA1, GSL12. 94 4.4.2. Аналіз результатів вираження. 96 4.5. Висновки у розділі 4. 101 ЗАГАЛЬНІ ВИСНОВКИ ТА РЕКОМЕНДАЦІЇ. 103 БІБЛІОГРАФІЯ. 105 ДОДАТКИ. 127 Додаток 1. Акт про впровадження наукових результатів у навчанні. 127 Додаток 2. Акт про впровадження наукових результатів для вдосконалення. 128 ЗВІТ ПРО ВІДПОВІДАЛЬНІСТЬ. 129 РЕЗЮМЕ АВТОРА. 130 4

СПИСОК СКОРОЧЕНЬ ABA абсцизова кислота AG3 гіберелінова кислота AIA - індоліл оцтова кислота AJ жасмонова кислота AS саліцилова кислота ASC цитоплазматична андростерильність ASI індукована андростерильність BLAST Основний інструмент пошуку місцевих вирівнювань BR брасіностероїд CDK циклінозалежні кінази CMP Secene PCylcate Dester SE Essen poll з тегами) ET етилен Зміна складок FC IGFPP Інститут генетики, фізіології та захисту рослин MO Оптична мікроскопія NCBI Національний центр біотехнологічної інформації NT - Пари основ нуклеотидів Pb PCNA - Проліферуючий антиген ядерних клітин PCR Полімеразна ланцюгова реакція RE ендоплазматичний ретикулум SM чоловіча стерильність TAE Трис-ацетат-EDTA TBE Трис-борат-EDTA УФ ультрафіолетове світло 8

гаплоїдні ядра, що утворюють тетради з мікроспорами. (Малюнок 3.6, г). Плазмалема кожної клітини стінки стає все більш видовженою, так що вона простягається всередину ложа стовбура, залишаючись периферійною. Ближче до кінця фази тетради ці клітини неправильної форми плазмодієвого вигляду з інтенсивно поліплоїзованими ядрами відокремлені одна від одної на своїх радіальних поверхнях, тоді як середній шар тонкий і вироджений. Після перетравлення стінки чаші в мікроспорангію пиляків із родючих квітів розміром більше 3,5 мм спостерігались добре контуровані, інтенсивно забарвлені мікроспори (рис. 3.6, д). Рис. 3.6. Пилкові стовбурові клітини на різних стадіях мікроспорогенезу. Примітка: I родючі рослини, II рослини з ASI; a, f лептотен; б, г пахітен; в, ч ділення; d, i тетрада; e, j мікроспори x1600 (c, f); x640 (a, b, d, e, g, h, i, j) Постмейотичний розвиток мікроспор: їх індивідуалізація та вивільнення з тетради, відкладення первинного екзину, утворення еквівуляцій еволюціонують відповідно до виду, виділяючи поступовий, синхронізований розпад тканини шпалери. Рис. 3. 7. Стрічкові клітини в різні фази мікроспорогенезу Примітка: I родючі рослини; II рослини з АСІ; а, і профаза I; б, f підрозділи; c, g тетрада; d, h стадія мікроспори. Шкала 15 = мкм. 57

Пошук за ключовим словом виділив локус: ACO58770.1, який кодує послідовність білка з 68 амінокислотами, визначену як A4-подібний білок, частково [Helianthus annuus]. BLASTX послідовності транскриптів, що вивчалася з експансином А4-подібним білком [Helianthus annuus], вказує на дуже низький ступінь подібності (оцінка: 72,4/72,4, охоплення: 25%, значення E: 7e-22, ідентичність: 66%) (Рисунок 4,20, Б). A B Рис. 4.20. Аналіз послідовності CCFT9238.b1_K05.ab1. через програми BLASTN (A) та TBLASTX (B). База даних HELIAGENE [295] представляє стенограми гіпотетичного соняшнику, функціонально віднесеного до експансинів, з різним ступенем експресії в різних органах, але їх послідовність генів не виявляє схожості із стенограмою, вивченою в цій роботі. 4.4.2. Аналіз результатів експресії Аналіз експресії гена GSL12 у соняшнику, який бере участь у біосинтезі калюсу, показав статистично значуще збільшення (р