Медулограма або цитологічне дослідження кісткового мозку Medlife

Цитологічне дослідження медулярного аспірату разом з медулярною біопсією є основним дослідженням гематологічного діагнозу. Медулограма проводиться, коли клінічні дані, гемолейкограма, морфологічне дослідження мазка крові або інші лабораторні дослідження дозволяють припустити можливість первинного або вторинного гематологічного захворювання та морфологічного аналізу кісткового мозку. може підтримати діагноз.

Мікроскопічне дослідження спочатку проводиться на величину 10x/20x для:

-оцінка якості мазка (наявність бурчання, якість забарвлення, наявність артефактів),

-оцінка клітинності (співвідношення жирових клітин)

- наявність мегакаріоцитів, мієломатозних клітин, тучних клітин

-наявність остеобластів/остеокластів, груп пухлинних клітин (кластерів)

-наявність клітин Гоше, Німана-Піка, гістіоцитів з включеннями "сині, як море", гранульоми.

-визначені зони дроблення медулярних бурчання (області “центральний”), Райони проміжний з багатою клітинною структурою, в якій медулярні клітини виглядають ізольованими або згрупованими в гемопоетичні острови (зберігаючи певною мірою архітектурну структуру кісткового мозку) та райони периферійні, з меншою кількістю клітин (шляхом розведення). У педіатричних випадках кістковий мозок виглядає як рівномірна дисперсія клітин.

Подальше дослідження мазка з метою 100x з зануренням проводиться приблизно на 300-500 інтактних клітин, з проміжних областей [1]

Цитологічне дослідження медулярного аспірату включає:

Оцінка клітинності: оцінка об'єму медулярних клітин порівняно з іншими складовими клітинами кісткового мозку (наприклад, жировими клітинами). Золотим стандартом для оцінки клітинності є біопсія кісткового мозку. У медулярному аспіраті медулярна клітинність розріджується периферичною кров’ю, що аспірується одночасно з медулярним соком, завжди нижча в порівнянні з клітинністю, зазначеною біопсією у того ж пацієнта.
Співвідношення G/E: співвідношення між клітинами мієлоїдної (G) та еритроїдної (E) серії; розраховується для оцінки відносної клітинності двох основних клітинних ліній.Зазвичай основне співвідношення становить від 2: 1 до 4: 1. Низьке співвідношення G/E може означати гіпоплазію гранулоцитарного ряду або гіперплазію еритроцитарного ряду.
Оцінка гемопоетичного ряду з морфологічної та зрілої точки зору, з метою повідомлення про напівкількісний результат;
Ідентифікація аномальних клітин (лейкозних або пухлинних клітин)
Виділення аномальних макрофагів при ліпідозі: клітина Гоше, клітина Німана-Піка, гістіоцити з включеннями "синього як море"

Додаткові тести можуть бути проведені з медулярного аспірату, які разом із цитологічним дослідженням підвищують точність гематологічного діагнозу [4]:

імунофенотипування
Генетичний аналіз хромосом
Тест FISH (Флуоресценція in-situ гібридизація)
Інші генетичні та молекулярно-біологічні тести (мутація JAK2, BCR-ABL та ін.)

Оцінка гемопоетичного ряду з морфологічної та зрілої точки зору з метою напівкількісного звітування є найбільш послідовною частиною морфологічного дослідження:

Оцінка еритропоезу (серія еритроцитів)

Попередниками еритроцитів є: проерітробласт (пронормобласт), базофільний еритробласт (нормобласт), поліхроматофільний еритробласт (нормобласт) та оксифільний еритробласт (нормобласт).
Зниження грануло-еритробластичного співвідношення (G/E), яке зазвичай становить 2/1 - 4/1, виявляється при гіперплазії еритроїдів (збільшена кількість медулярних попередників еритроїдів), яка супроводжує різні типи анемії (залізодефіцитна анемія, мегалобластна анемія, сидеробластична анемія, таласемія). Співвідношення може бути відзначене низьким і навіть зворотним при регенеративних анеміях (постгеморагічних/гемолітичних). Підвищений коефіцієнт G/E вказує або на гіперплазію гранулоцитарного ряду, або на еритробластопенію.
Перевага поліхроматофільних форм (

50%) та оксифільність (> 30%) свідчать про нормальне дозрівання червоної серії. Збільшення відсотка базофільних еритробластів (> 5-20%) свідчить про дефіцит гемоглобінізації (від залізодефіцитної анемії, важких мегалобластичних анемій).

Проерітробласт - це велика кругла клітина, діаметром 15-20 мкм. Ядро займає майже всю клітину.Хроматин розташовується в тонкому ретикулярному візерунку, але має більш інтенсивний колір, ніж мієлобластний хроматин. Ядерця є, але їх важко спостерігати. Цитоплазма базофільна, більш інтенсивна, ніж цитоплазма мієлобласту.
Базофільний еритробласт менший за проерітробласт, з ядром, яке займає менше цитоплазми, хроматиновий малюнок починає організовуватися в блоки, цитоплазма темно-синя.
Поліхроматофільний еритробласт менший за попередній, з ядром, організованим у явні блоки хроматину, і цитоплазма стає сірою або сіро-рожевою через вміст синтезованого гемоглобіну.
Оксифільний еритробласт трохи більший за зрілий еритроцит. Ядро невелике, пікнотичне. Цитоплазма червонувата, як і зрілий еритроцит.

Оцінка гранулопоезу (мієлоїдний або гранулоцитарний ряд)

Попередниками гранулоцитів є: мієлобласт, промієлоцит, нейтрофільний/еозинофільний/базофільний мієлоцит та метамієлоцит, поряд із зрілими несегментованими та сегментованими нейтрофільними/еозинофільними/базофільними формами. Мієлоїдні клітини є переважним елементом у кістковому мозку, причому зрілі клітини є найбільш численними.

Оцінка мегакаріопоезу (мегакаріоцитарний ряд)

Попередниками мегакаріоцитів є: мегакаріобласт, промегакаріоцити (10% - 15% від загальної кількості), нетромбоцитогенні мегакаріоцити (60-70%) та тромбоцитогенні мегакаріоцити (10-20%). Мегакаріоцити - це дуже великі клітини (30-150 мкм), поліплоїдні (8N, 16N, 32N та ін.). Промегакаріоцити мають інтенсивно базофільну цитоплазму (збільшена кількість рибосом), а ядро є незбуленим, з молодим виглядом. Нетромбоцитогенні мегакаріоцити мають рубіново-червону цитоплазму за рахунок грануляцій, а ядро неправильне, із змінною кількістю часточок. Тромбоцитогенні мегакаріоцити мають цитоплазму з квазігрупованими гранулами в майбутніх тромбоцитах, мають тромбоцити, прилеглі до їх периферії, а ядро менше і щільніше. Мегакаріоцити, як правило, є найменш поширеним типом клітин у кістковому мозку

Інші клітинні елементи норма, виявлена при аспірації спинного мозку:

моноцити морфологічно ідентичні таким у периферичній крові. Промоноцити мають більш ніжний хроматин, видимі ядерця та кілька грануляцій у базофільній цитоплазмі.

Макрофаги (гістіоцити) походить від моноцитів, але більше 20 - 30 мкм у діаметрі. Ядро овальне з ніжним хроматиновим малюнком і з одним або двома маленькими ядерцями. Цитоплазма є синьо-сірою або безбарвною і часто містить фагоцитарні клітини, клітинний детрит і вакуолі.

лімфоцити подібні до периферійних, мінливі за кількістю, залежно від ступеня забруднення матеріалу, що досліджується периферичною кров’ю.

плазмоцити вони мають змінний розмір, як правило, діаметром від 12 до 16 мкм, круглі або овальні, з невеликим, круглим стрижнем, розміщеним ексцентрично. Хроматин конденсується і розташовується блоками. Цитоплазма темно-синя з чіткою парануклеарною ділянкою, подібна аурі .

щогла легко впізнати за вмістом темно-синіх гранул, які займають всю цитоплазму, що покриває ядро. Коли видно, ядро має структуру везикулярного хроматину.

Остеокласти та остеобласти - це клітинні елементи, які рідко з’являються в медулярному аспіраті. Вони частіше зустрічаються у дітей або людей з гіперпаратиреозом або певними пухлинами (остеобластична реакція).

Остеокласти - це великі клітини діаметром понад 100 мкм. Їх можна сплутати з мегакаріоцитами, але вони багатоядерні, з дрібним хроматиновим малюнком і видимими ядерцями.

Цитоплазма змінюється від слабо базофільної до інтенсивно ацидофільної через вміст ацидофільних гранул.

Остеобласти - це овальні клітини діаметром близько 30 мкм. Вони часто трапляються групами. Ядро часто ексцентричне, з рівномірно розподіленим хроматином та 1-3 ядерцями. Цитоплазма блідо-блакитна з чітко вираженою центросомно-чистою ділянкою, відокремленою від ядра (відрізняється від прозорої парануклеарної ділянки плазматичної клітини).

Медулограма може бути рекомендована для:

Дослідження цитопенії (лейкопенія, тромбоцитопенія, біцитопенія або панцитопенія) для підтвердження/спростування лейкемії, мієлодиспластичного синдрому, аплазії гіпо/спинного мозку, агранулоцитозу
Негемолітична анемія, яка не була діагностована як залізодефіцитна анемія через дефіцит вітаміну В12 або фолієвої кислоти, або таласемія, вимагає дослідження медулярної клітинності.

Ідентифікація, постановка та моніторинг гострого лейкозу
Діагностика та моніторинг мієлодиспластичних синдромів
Діагностика накопичення: хвороба Гоше, хвороба Німана-Піка, синдром гістіоцитів "синього моря"
Дослідження моноклональної гаммопатії для діагностики множинної мієломи або хвороби Вальденстрема.
Діагностика та стадія злоякісних захворювань, метастазованих у кістковий мозок.
Оцінка запасів заліза в кістковому мозку (гемосидерин)

У таблиці нижче містяться конкретні рекомендації щодо цитологічного дослідження аспірату спинного мозку та гістологічного дослідження біопсії спинного мозку [3]

+ обов'язкове обстеження

(+) факультативний іспит

Ø обстеження не призначено

Зміни параметрів гемолейкограми/Діагностичні припущення

Напр. Цитологічний при аспірації спинного мозку

Гістологічне дослідження біопсії спинного мозку