P184 Харчовий перехід, мікробіота та погіршення здоров’я харчових білків шляхом
Клінічне харчування та метаболізм
Додати до Менділі

Вступ та мета дослідження
Кишкова мікробіота відіграє важливу роль у здоров’ї, і її структура залежить, зокрема, від раціону. Харчовий перехід останніх десятиліть у розвинених країнах полягав у збільшенні споживання продуктів, багатих білками та ліпідами, точніше тваринного походження. За підрахунками, щодня в товсту кишку, де мікробіота найбільш щільна, надходить від 12 до 18 г білка. Все більш очевидно, що частина введеного в організм білка надходить до товстої кишки неперетравленою. Однак здатність мікробіоти катаболізувати білки тваринного або рослинного походження невідома. Ця робота зацікавлена в деградації харчових білків або в медичних цілях штами кишкової мікробіоти людини.
Матеріал і методи
Вибрано 8 штамів бактерій, що є представниками філогенетичного різноманіття мікробіоти та чисельно домінуючими у здорових особин. Розроблено нове анаеробне поживне середовище з обмеженим вмістом глюкози (5 г/л) та пептидів. Білки сироватки, сої або глютену додають стерильними (20 г/л). Культури інкубують при 37 ° С в атмосфері N2/CO2 у пробірках Хунгейта, що дозволяє безпосередньо вимірювати ріст бактерій при 600 нм. Деградація соєвих та сироваткових білків визначається кількісно шляхом аналізу спектрів поглинання за допомогою Nanodrop. Концентрацію глюкози та глютену вимірюють за допомогою ферментативного набору та ІФА (Libios та Biodemal, відповідно). Мікробна колонізація білкових субстратів спостерігається макроскопічно та за допомогою світлової мікроскопії.
Результати та статистичний аналіз
Розроблене середовище виявилося загальним, воно дозволяє вимірювати ріст видів бактерій у присутності білків, коли вони використовують їх як джерело енергії. Ми продемонстрували кінетику росту та деградації білків, яка залежить від виду.
Blautia coccoides та Ruminococcus lactaris з Phylum Firmicutes деградували сою після 96 год культури, тоді як представники Phylum Bacteroidetes (B. vulgatus та B. caccae) менше метаболізували цей субстрат.
З 60 годин культури глютен повністю розчиняється Bifidobacterium longum, а також видами кластеру IV Clostridium, Clostridium leptum та протизапальними видами Faecalibacterium prausnitzii.
Нарешті, за наших культурних умов штами мікробіоти кишечника демонструють повне споживання глюкози лише тоді, коли вони також розкладають клейковину або сою. Це представляло б нову міксотрофну здатність, одночасне використання цукру та білка для виробництва енергії.
Висновок
Нам вдалося продемонструвати здатність домінантних штамів мікробіоти метаболізувати природні харчові білки. In vitro потенціали різняться залежно від штамів, що свідчить про те, що природа та кількість білків, що досягають товстої кишки, можуть модулювати in vivo мікробний баланс, вирішити або створити дисбіоз.
За винятком B. longum, ці результати являють собою перший опис деградації клейковини видами кишкової мікробіоти людини, без можливості встановити зв'язок із целіакією. Для визначення функціональної ролі цього мікробного протеолізу необхідно визначити механізми та продукти, що виникають в результаті цих деградацій. Для цього використання мишачих моделей, які отримують їжу з однаковими білковими та ліпідними композиціями, але з різною засвоюваністю, дасть змогу зрозуміти in vivo участь мікробіоти в деконструкції їжі та виміряти вплив на здоров’я тварин.
Список літератури (0)
Процитовано (0)
Рекомендовані статті (6)
Вивчення фізико-хімічного та бактеріологічного впливу щотижневої збірки автомата BAXA ® Exacta-Mix 2400 на виготовлення мішків для парентерального харчування
Сумки для парентерального харчування виготовляються на машині BAXA ® Exacta-Mix 2400. Його збір перевіряється протягом 48 годин. З метою оптимізації часу та витрат тестували щотижневу збірку.
Збір проводився в перший день. Десять однакових мішків для парентерального харчування різного обсягу та складу виготовляли щодня. Макроскопічне дослідження було проведене на 0 день, 7 день та 14 день. Були проведені фізико-хімічні перевірки (електролітні аналізи за допомогою атомно-абсорбційної спектрофотометрії, вимірювання осмоляльності). Мікробіологічний контроль включав тест на стерильність мембранної фільтрації (Steritest ®) та перевірку робочого середовища з контактним агаром.
Було виявлено, що всі суміші є стабільними. Зчитування 12 Steritest ® при H24, H48, D7 і D14 не показало бактеріального чи грибкового забруднення. На 4 та 7 день на контактних агарах мікроорганізмів не виявлено. Порівняння даних, що спостерігаються за кожним фізико-хімічним параметром кожної кишені, не показало істотної різниці порівняно з виробленням d0 за тестом Вількоксона.
Автоматизована закрита система наповнення BAXA ® Exacta-Mix 2400 значно покращує якість виробництва та безпеку. Таким чином, результати перевірок цього дослідження дозволили перевірити щотижневу збірку PLC, що призвело до оптимізації часу (щонайменше 80 годин/рік) та економії роботи (близько 40 000 €/рік).
Домішки для парентерального харчування виготовляються з автоматизованою сумішшю BAXA ® Exacta-Mix 2400. Проведено валідацію 48-годинного складання. Для оптимізації часу та витрат тестували щотижневу збірку.
Збірка була проведена в перший день. Десять однакових парентеральних харчових домішок (різного обсягу та складу) виробляли щодня. Макроскопічне дослідження було проведено в D0, D7 і D14. Виконано фізико-хімічний контроль (визначення електролітів за допомогою атомно-абсорбційної спектрофотометрії, вимірювання осмоляльностей). Мікробіологічні тести включали тест на стерильність мембранної фільтрації (Steritest ®) та моніторинг довкілля агару.
Всі суміші вважалися стабільними. У 12 Steritest ® (H24, H48, D7 і D14) не виявлено бактеріального чи грибкового забруднення. Жодного мікроорганізму не виявлено на агарі для підрахунку пластин при D4 та D7. Що стосується фізико-хімічних показників кожної домішки батьківського харчування, то істотної різниці (тест Вілкоксона) з першим днем не виявлено.
Автоматизована система наповнення BAXA ® Exacta-Mix 2400 покращує якість та безпеку виробництва. Згідно з цими результатами щотижнева збірка перевіряється і дозволяє економити час (80 годин/рік) та витрати (40000 євро на витратні матеріали/рік).