Преаналітики. Інструкції щодо поводження з матеріалами зразків у ветеринарній практиці
Інструкції перед аналізом щодо поводження із зразками у ветеринарній практиці
Клінічна хімія Сироваткові пробірки білі з гранулами (Сарштедт), жовті з гелем (БД), гематологічні ЕДТА пробірки червоні (Сарштедт) або фіолетові (БД) гепаринові пробірки оранжевий (Сарштедт) або зелений (БД) аналіз згортання цитрусові пробірки зелений (Сарштедт) або синій (BD) Спеціальні пробірки ЕРТА апротинінові пробірки рожеві (визначення АКТГ) Глюкоза та лактат Натрію фтористі натрію жовті (Sarstedt) або сірі (BD) наклейки із штрих-кодом міцно натискають, щоб вони добре прилипали і не відривалися під час транспортування або машинної обробки. 7-й
Забір крові у собак і котів Забір крові у собак і котів у кооперативних тварин проводиться у vena cephalica antebrachii dexter (для правшів), яка розташована над і дещо посередніше на поверхні передпліччя. Права передня кінцівка закріплена і витягнута ззаду помічником так, щоб вена була затягнута. Це полегшує пошук і запобігає скочуванню вени. У неспокійних тварин кров також може бути взята з бічної підшкірної вени (собака) або медіальної вени (кішка) над щиколоткою на задній кінцівці. Щоб підтягнути вену, кінцівку розтягують і вена перевантажується в западині коліна (собака) або в середині висоти на внутрішній стороні стегна (кішка). Забір крові з головної вени 10
Яремна вена, яремна вена, також підходить для взяття крові. Голову або морду тримає вгору і фіксує асистент, а той, хто бере кров, затримує ліву руку яремну вену на рівні грудного входу. У випадку з густошерстими або неспокійними тваринами, місце проколу слід поголити та ретельно продезінфікувати перед тим, як встановити постійний катетер. Забір крові з яремної вени Забір крові з головної вени з метеликом і конусом моноветти 11
КРОВ Антикоагулянт Забір крові у маленьких домашніх тварин Швидкість кровотоку має вирішальне значення для отримання достатньої кількості крові. Тому доцільно використовувати канюлі з великим просвітом (20 Г) та відповідні посудини для збору. У кроликів і тхорів, як у собак і котів, кров можна збирати за допомогою ЕДТА та пробірок сироватки нормального розміру; у морських свинок та шиншил рекомендується використовувати невеликі судини для зразків із закрученими кришками або одноразові судини з капілярною дією (наприклад, Multivette, Microvette, Sarstedt) . Мікроканюли У випадку малих вен, нові типи мікроканул (мікроканюля, Сарштедт) особливо придатні для підтримки достатнього виведення крові. Оскільки канюлі не мають конуса, кров може оптимально стікати, навіть якщо артеріальний тиск низький. Рифлена ручка забезпечує безпечне наведення канюлі. Ми рекомендуємо використовувати мікроканюлю з великим просвітом 21 G (зелена). 12-й
Метод вибору крові у кроликів, морських свинок, шиншил і тхорів на практиці - з бічної підшкірної вени, але можливі й інші місця проколу. Місця проколу у дрібних ссавців Види Місця проколу Кролик V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, A./V. auricularis lateralis 1 (лише невелика кількість), вухо 2 морська свинка V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, подушечки 2 Chinchilla V. jugularis, V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, V. caudali, V. sublingualis 2, подушечка 2, вухо 2, тхір, скунс яремної вени, латеральна вена сафени 1, антебрахіальна вена 1, кулька 2, вухо 2 Дегу яремна вена, латеральна вена сафени 1, під’язикова вена, головна вена antebrachii, кулька хом'яка V. sublingualis 2, вена saphena lateralis, цефаліка вени, кулька 2 миша, щур V. лицьова 2, V. sublingualis, V. saphena lateralis, V. cephalica antebrachii, V. caudalis, кулька 2 1 підходять для венозних катетерів 2 капають невеликі кількості безпосередньо з місця пункції 13
Для диференціального аналізу крові рекомендується підготувати та відправити два мазки крові відразу після забору. Достатній обсяг вибірки часто важко отримати у птахів та плазунів. Кількості, зазначені в специфікації послуг, представляють мінімальні кількості для відповідних випробувань, але стосуються лише дослідження окремих параметрів. Допустимі зразки Зразки крові від птахів і рептилій Зразки крові птахів і рептилій дуже сприйнятливі до гемолізу та розпаду клітин. ЕДТА має гемолітичну дію на кров рептилій. Тому гепарин літію найкраще підходить як антикоагулянт (гепаринова літієва кров для аналізу крові та визначення вмісту свинцю, гепаринова літієва плазма для клініко-хімічних показників та серологічних тестів). Птах до 1% маси тіла Папуги хвилясті папуги (40 г маси тіла) максимум 0,4 мл кокатіля (100 г маси тіла) максимум 1,0 мл великий папуга (400 г маси тіла) максимум 4,0 мл плазуни до 0,5% маси тіла, тобто максимум 0,5 мл на 100 г маси тіла. 16
Забір крові у птахів У птахів кров береться або з вени крила, або з правої яремної вени. Техніка взяття крові з вени крила Помічник фіксує птицю в положенні лежачи на спині, і екзаменатор витягує одне крило в бік однією рукою. Після зволоження ліктьової області ліктьова вена, що проходить під прямим кутом до сухожиль, стає видимою і може бути заблокована великим пальцем руки, що тримає крило. Вена проколюється другою рукою. Кров забирається шляхом аспірації за допомогою прикріпленого шприца. Після видалення канюлі область проколу злегка стискають тампоном, змоченим хлоридом заліза. Забір крові з вени крила амазонки Як правило, пацієнта поміщають назад у клітку з прикріпленим тампоном. Паличка, прилипла до шкіри через згортання крові, згодом відпадає. 17-й
Забір крові у коней У коней венозну кров зазвичай беруть з однієї з двох яремних вен (зовнішньої яремної вени). Проведення вени проводиться при переході від середньої до верхньої третини шиї, оскільки омохіоїдний м’яз розташований захисно між поверхневою яремною веною і глибшою загальною сонною артерією, що зменшує ризик артеріальної пункції. Вени досліджують на предмет закладеності, відтоку крові, збільшення окружності або ознак запалення або попереднього пошкодження. Як правило, достатньо поверхневої дезінфекції волосся та шкіри. У випадку з дуже довгим і густим хутром (наприклад, шетландські поні, ісландці), може бути корисним стригти волосся, щоб краще візуалізувати вену та продезінфікувати місце проколу. Крім того, кров також може бути взята з головної вени, підшкірної вени (особливо у лошат) або поверхневої епігастральної вени. Забір крові з яремної вени 20
Забір крові з верблюдів Кров також береться з яремної вени верблюдів. На відміну від більшості домашніх тварин, яремна вена та сонна артерія верблюдів Нового Світу проходять разом по найдовшій частині шиї, а омохіоїдним м’язом їх відділяє лише три-чотири сантиметри перед нижньощелепним кутом. Отже, випадкова пункція артерії може призвести до великого утворення гематоми. Оскільки верблюди можуть активно штовхати рухливі м’язи шиї перед веною, через проникнення м’язів можливі дуже високі показники СК (> 10000 Од/л). Через цінну якість шерсті, гоління точки забору крові протипоказано верблюдам. Оскільки вени дуже швидко руйнуються, зазвичай не вдається взяти кров за допомогою вакуумної системи. Щоб не забруднити хутро кров’ю, рекомендується відбір крові шляхом аспірації (наприклад, S-Monovette, Sarstedt). Забір крові з альпаки 21
КРОВ Антикоагулянти Забір крові у великої рогатої худоби, овець та кіз Зовнішня яремну вену також зазвичай використовують для забору крові у великої рогатої худоби, овець та кіз. До нього легко дістатись і чітко проявляти себе, коли його запруджують. У великої рогатої худоби кров також може братися з серединної хвостової вени на нижній стороні хвоста. Забір крові з хвостової вени Забір крові з яремної вени 22
КРОВІ Антикоагулянт Приготування мазка крові Після витирання першої краплі крові з добре перемішаної пробірки капіляром або піпеткою на кінець предметного стекла, потім помістіть друге предметне скло перед місцем нанесення і злегка відсуньте його назад Кров рівномірно розподіляється по краю предметного стекла в 45 - Дотримуйтесь кута і ведіть швидко і рівномірно на протилежну вузьку сторону. Кров забирається за край, а не штовхається! Ідеально підходить мазок, який становить приблизно 2/3 довжини поверхні предметного стекла, залишає край вільним з обох сторін і закінчується прозорим прапором. Дайте мазку повністю висохнути. Позначте предметне скло на краю килима олівцем або етикеткою зі штрих-кодом (наклейте на вузьку сторону точки кріплення; не на прапорі).
правильно неправильний номер штрих-коду номер штрих-коду номер штрих-коду номер штрих-коду номер штрих-коду номер штрих-коду номер штрих-коду номер штрих-коду ідеально занадто короткий занадто довгий немає прапора OT жирний занадто вузький занадто широкий нерівномірний 27
Недостатнє обертання трубки ЕДТА після видалення і, отже, недостатнє змішування крові з ЕДТА, доданою як антикоагулянт, також призводить до утворення згустків (див. Також послідовність забору крові, с. 9). відбувається (підвищена в’язкість крові). Щоб розрізнити спонтанну аглютинацію та утворення рулонів, корисно 3 рази промити кров такою ж кількістю сольового розчину. Якщо аглютинація зберігається, імунна гемолітична анемія вважається доведеною. Аглютинація еритроцитів Мимовільну аглютинацію еритроцитів слід диференціювати від преаналітичної коагуляції крові. Це може свідчити про імунну гемолітичну анемію, при якій наявність аутоаглютинів (IgG та IgM) може призвести до макроскопічно видимого скупчення еритроцитів. Існує можливість плутанини з так званим утворенням валків, що є випадковою знахідкою, особливо у коней і котів, або в контексті гострого запалення, спонтанної аглютинації при імуногемолітичній анемії (собака) 33
Аналізи сечі У зразках сечі не повинно бути зовнішнього забруднення, щоб хмарність або зміни кольору можна було оцінити без артефактів. За винятком мікробіологічних досліджень, всі обстеження проводяться з використанням власної сечі. За необхідності пробу необхідно розділити та направити як стабілізовану, так і природну сечу для отримання значущих результатів. Для транспортування потрібні гвинтові судна. Цистоцентез Найбільш підходящим методом збору сечі у собак та котів є цистоцентез. Якщо все зробити правильно, це безпечна і проста процедура. Залежно від особистого досвіду та технічного оснащення практики, цистоцентез можна проводити за допомогою ультразвуку або сліпого. Для проколу потрібні канюля (22 г, чорна) та шприц (10 мл). Залежно від стану шерсті, місце проколу голять, а шкіру дезінфікують або шерсть розлучають після нанесення спирту. Асептична підготовка місця проколу не потрібна. 34
Якщо це можливо, сечовий міхур проколюється під сонографічним контролем. Якщо сечовий міхур достатньо наповнений і пальпується, цистоцентез також можна безпечно проводити без ультразвукового приладу і виконувати собаці в положенні стоячи або в положенні лежачи на спині або в боці. У котів проколювати найлегше в бічному положенні. Сечовий міхур фіксується однією рукою, інша рука вводить канюлю з прикріпленим шприцом у вентральну до вентролатеральної області сечового міхура і аспірує його. Катетеризація У коней та великої рогатої худоби застосовують сечовий катетер, якщо не вдається зібрати самовільно виділену сечу. У випадку з дрібними тваринами для перевірки прохідності уретри в першу чергу слід використовувати сечовий катетер, інакше переважні недоліки цього методу видалення (травма слизової оболонки, ризик занесення мікробів). Ультразвукове керівництво цистоцентезом 35
Отримання переваг та недоліків Лабораторні обстеження мимовільно безпосереднє збирання - нестерильний ген статусу сечі 1 (наприклад, із забрудненням осадом сечі 1 уретра ковша, передпліччя, клініко-хімічна або судинна) дослідження піхви та навколишнього середовища (наприклад, UP/C), 2 з непридатного для імунологічних досліджень мікробіологічного сміттєвого ящика (наприклад, ККК) 1,2 (катор, обстеження перлинного сміття) катетер сечовий міхур - низький рівень забруднення - стан сечі1 катетер небезпека осаду сечі1 пошкодження уретри/клініко-хімічний та сечовий міхур (забруднення імунологічні дослідження 1,2 крові) мікробіологічне дослідження 2 мікроби виштовхуються в сечовий міхур ззовні цисто-черезшкірний чистий сечовий міхур мікробіологічне дослідження 2 центральна пункція будь-якого забруднення з усіма іншими дослідженнями (див. вище) кров сечового міхура 1 = рідна сеча (стерильна, без покриття пробка ) 2 = стабілізована сеча (спеціальна пробірка з борною кислотою) Залежно від бажаних обстежень За необхідності розділіть сечу та відправте як природну, так і стабілізовану сечу. 37
Збір слід проводити перед початком антибіотикотерапії. Якщо зразки неможливо направити безпосередньо в лабораторію, зразки можуть зберігатися в холодильнику протягом 1-2 днів для проведення культурних бактеріологічних досліджень. Це також стосується зразків молока та сечі в пробірках із доданим стабілізатором. Мікробіологічний досліджуваний матеріал Правильний відбір зразка має важливе значення для результату бактеріологічного дослідження. Для досягнення високого рівня інформативної цінності матеріал потрібно отримувати та відправляти таким чином, щоб спочатку наявні патогени залишалися здатними до розмноження або могли бути виявлені під час транспортування. Анаероби та особливо чутливі бактерії, такі як B. β-гемолітичні стрептококи або Haemophilus spp., Не слід зберігати, а негайно доставити до лабораторії. Також слід якомога швидше досліджувати стерильний матеріал зразків (посів крові, синовію та ін.), Оскільки в разі зараження найменша зміна кількості мікробів або спектру мікробів може призвести до фальсифікованого результату. 38
Для мікробіологічної обробки та оцінки обстежуваного матеріалу, на додаток до підтвердження особи, абсолютно необхідна наступна інформація: Важливий час/дата попереднього звіту Походження обстежуваного матеріалу (наприклад, мазок із шийки матки, плевральна пункція) Порядок обстеження та запитання (наприклад, виявлення патогенних мікробів та/або спеціальних Мікроби) Мазки Виймаючи тампон, переконайтеся, що він не контактує з нестерильними предметами або бактеріально колонізованими слизовими оболонками тощо. Мазки з ділянок, фізіологічно заселених бактеріями (шкіра/ротова порожнина/ніс), призначаються лише для конкретних питань. У разі мазків з носа необхідно забезпечити якнайглибше видалення після очищення носового дзеркала. Для найкращих результатів обстеження мазок необхідно перенести на транспортне середовище відразу після видалення. Попередній діагноз/клінічна інформація (наприклад, початок хвороби, клінічні симптоми, перебування за кордоном) Попереднє лікування антибіотиками Деталі попереднього обстеження, напр. B. MRSA вже виявлено. Густий тампон тонкий тампон 39
Вагінальна цитологія Цитологічна картина вагінального мазка у суки дозволяє визначити стан циклу та надає інформацію про патологічні процеси. Для цього, якщо це можливо під контролем дзеркала, отримують мазок з черепного, дорсального або бічного піхвового склепіння, розкочують на предметне стекло, а зразок потім сушать на повітрі. Через крихкість клітин мазки, які не були прожилковими, не можуть бути оцінені. Техніка розколювання вагінального мазка 45
ДОСТАВКА Доставка/транспортування зразків Після маркування пробірок та заповнення тестової форми зразки упаковуються для транспортування. SYNLAB.vet забезпечує необхідні матеріали переважно безкоштовно. Упаковка повинна мати достатній захисний ефект від неминучих транспортних навантажень, що виникають під час транспортування (зокрема, вона не повинна розриватися або лопатися) і не повинна спричиняти будь-яких порушень в процесі обробки. Отже, у випадку перевезення поштою та національними кур'єрськими службами завжди повинна використовуватися багатокомпонентна упаковка, яка складається з власне контейнера для зразків, захисного або транспортного гільзи та зовнішньої упаковки. Якщо направляється рідкий матеріал, між первинною та вторинною посудиною необхідно покласти абсорбуючий шар (абсорбуючу прокладку). Транспортна упаковка складається з 3 компонентів: 1.) сама пробірка для зразків (первинна посудина) 2.) вторинна посудина, що не пропускає герметичність Замість картонної коробки також може бути використаний PE-конверт для доставки. На етикетці звільненого зразка матеріалу (див. Нижче) вказано звільнений ветеринарний медичний зразок. Речовини категорії В повинні бути марковані маркуванням небезпечних вантажів ООН 3373. 3.) зовнішня упаковка 48