Профіль ALEX (дослідник алергії) - IgE - Синево

Загальна інформація

профіль

IgE-опосередкована алергія та in vitro алергологічні тести

Поширеність IgE-опосередкованих алергічних захворювань різко зростає як у розвинутих, так і в країнах, що розвиваються. Багато дітей страждають від важкої харчової алергії та анафілаксії, а значна частина підлітків та молодих людей, які страждають на астму та алергічний риніт, знизила ефективність у повсякденній діяльності. З цих причин управління пацієнтами з алергічними станами потребує вдосконалення 1 .

Іншою проблемою, пов’язаною з використанням екстрактів алергенів, є глікопротеїди, що містяться в екстрактах, які можуть взаємодіяти з IgE у сироватці крові пацієнтів, що призводить до хибнопозитивних результатів при визначенні алерген-специфічних IgE. Глікани, що виробляються рослинами та комахами, що характеризуються наявністю епітопів фукози та/або ксилози, називали перехресно реактивними вуглеводними детермінантами (ПЗЗ). Відсоток пацієнтів, сенсибілізованих до ПЗЗ рослин/комах, оцінювався у 23%. Ці пацієнти з анти-CCD IgE демонструють перехресну реактивність на всі рослини, що містять CCD-епітопи, що призводить до великої кількості позитивних результатів при визначенні специфічних IgE, заснованих головним чином на екстрактах алергенів, імітуючи існування множинної сенсибілізації. З іншого боку, повідомляється, що антитіла проти CCD мають низьку клінічну значимість. Отже, дуже важливо зменшити перешкоди, які надає CCD 1 тестування на алергію in vitro; .

Характеристика тесту ALEX

ALEX - це засіб діагностики in vitro для алергічної сенсибілізації, за допомогою якого одночасно можна визначити розширений профіль специфічного IgE проти 282 алергенів (152 екстракти цілих алергенів та 125 молекулярних компонентів). Цей тест охоплює переважну більшість алергенів для інгаляцій, їжі, латексу та перетинчастокрилих. Використовується технологія "макрочипів", при якій алергени розподіляються у вигляді плям на нітроцелюлозній мембрані, що міститься в чіпі. Тест визначає кількісний Специфічний IgE націлений як на екстракти алергенів, так і на відповідні молекулярні компоненти (специфічна та перехресна реактивність). Поєднання екстрактів алергену з молекулярними компонентами в тому самому тесті дозволяє охарактеризувати сенсибілізацію IgE, визначаючи, чи є це «справжньою» реакцією чи перехресною реакцією. Застосування інгібіторів ПЗС на першій фазі інкубації зменшує перешкоди, які чинить ПЗС, збільшуючи специфічність тесту. Крім того, визначають також загальний IgE 5; 6 .

Згідно з недавнім дослідженням, ALEX має хорошу кореляцію з тестом ImmunoCAP ISAC, найбільш широко використовуваним тестом "мікрочипів" у молекулярній алергології 5 .

Рекомендації щодо проведення тесту ALEX - діагностика алергічних захворювань, разом з анамнестичними даними та клінічним обстеженням.

Використовуючи молекулярні алергенні компоненти, тест дає важливу інформацію про:

  • вказівка ​​на специфічну імунотерапію, зокрема при респіраторній алергії та алергії, спричиненій отрутами комах;
  • ризик важких алергічних реакцій на їжу (наприклад, білки Ara h 1,2,3 або 6 зберігання дають важкі алергічні реакції на анафілактичний шок, тоді як білки Ara h 8 і PR-10 не беруть участі у серйозних реакціях, обидві групи білків дають позитивні результати при тестуванні з екстрактами арахісу);
  • перехресна реактивність (перехресна реактивність).

Цей тест особливо корисний для полісенсибілізованих пацієнтів та хворих на синдром алергії на ротову порожнину 5; 6 .

Навчання пацієнта - à jeun (натщесерце) або після їжі (після їжі) 6 .

Зібраний зразок - венозна кров 6 .

Збиральний контейнер Вакутейнер без антикоагулянта з/без розділювального гелю 6 .

Необхідна обробка після збору врожаю - відокремити сироватку центрифугуванням 6 .

Обсяг вибірки - мінімум 1 мл ser 6 .

Причини відхилення спробувати - гемолізована сироватка 6 .

Стабільність зразка - виділена сироватка стабільна протягом 7 днів при 2-8 ° C; 6 місяців при - 20 ° C 6 .

Метод - Мультиплексний ІФА.

Тверда фаза представлена ​​нітроцелюлозною мембраною, в якій розподіляються алергени (див. Таблицю нижче зі списком використовуваних алергенів) і яка міститься в чіпі. На першій фазі мембрана інкубується з розведеною сироваткою пацієнта, використовуваний розчинник містить інгібітор ПЗС. Після 2-годинної інкубації чіпси ретельно промивають, а потім на наступному етапі їх інкубують протягом 30 хвилин із міченою лужною фосфатазою людською антитілом до IgE. Після нового етапу промивання додають ферментативний субстрат. Після висихання мембран інтенсивність кольору, отримана для кожного плями алергену, буде вимірюватися цифровою камерою. Отримані значення для конкретних IgE будуть надані за допомогою програмного забезпечення, призначеного для тестування макрочипів. Також визначається загальний рівень IgE 6 .

Звітування про результати для конкретного IgE

Звіт, випущений лабораторією для пацієнта, міститиме:

  • всі групи випробовуваних алергенів, типи алергенів (екстракти або молекулярні компоненти) та окремі специфічні значення IgE (виражені в кОА/л);
  • загальний рівень IgE (виражений у кВА/л);
  • короткий зміст виявлених сенсибілізацій, у яких групи алергенів позначені кольором, що відповідає найвищому визначеному класу сенсибілізації 6 .