Рурський університет, Бохум Проф

Рурський університет, Бохум мед. Ульріх Міттелькьоттер Місце роботи: Катарінен - лікарня Унна Відділення загальної та вісцеральної хірургії Роль кінцевих кіназ c-jun N (JNK1 та JNK2) у моделі низьких доз DSS коліту Інавгураційна дисертація на здобуття ступеня доктора медицини на високому медичному факультеті в Рурі Університет Бохума презентувала Елізабет Фрік з Орська/Оренбург 2009

Декан: проф. Г. Мур Доповідач: проф. Д-р У. Міттелькьоттер Співреферент: проф. A. Tannapfel День усного іспиту: 3 грудня 2009 р

Присвячується моїй родині з вдячністю

3.1.1 Оцінка DAI: JNK1 -/- проти JNK1 +/+. 33 3.1.2 Оцінка DAI: JNK2 -/- проти JNK2 +/+. 34 3.2 Оцінка пошкодження крипти (CDS) - гістологічна оцінка. 35 3.2.1 Оцінка CDS: JNK1 -/- проти JNK1 +/+. 35 3.2.2 Оцінка CDS: JNK2 -/- проти JNK2 +/+. 36 3.2.3 Резюме. 38 3.3 Оцінки імунофлюоресценції. 39 3.3.1 Вираз CD8 у Віллі: JNK2. 39 3.3.2 Вираз CD4 у Віллі: JNK2. 41 4 Обговорення. 43 4.1 Інгібування JNK та інших MAPK у терапії IBD. 43 4.2 DSS-коліт як тваринна модель. 44 4.3 Підсумок власних результатів. 45 4.4 Аналіз власних результатів на тлі сучасних досліджень. 47 4.5 Резюме. 50 5 Бібліографія. 52 Подяка CV 2

Список абревіатур Рис Рисунок AK Антитіла AS Амінокислота ATP аденозинтрифосфат Bcl-1 B-клітинний лейкоз/лімфома 1 або приблизно CARD каспаза домен рекрутування CD кластер диференціації CDS Crypt Damage Score CED запальний захворювання кишечника CU виразковий коліт CY2 карбоціанін CY3 Індокарбоціаніновий день DAI Індекс активності захворювання DAPI 4, 6-діаміно-2-феніліндол дигідрохлорид DMD-пімелінова кислота D-глю-мезо-діаміно-пімелінова кислота ДНК дезоксирибонуклеїнова кислота DSS декстран натрію сульфат ELK1 транскрипційний фактор ERK позаклітинний сигнал регулюється кіназа та ін та інші грами GALT кишечник асоційована лімфоїдна тканина G-CSF гранулоцитарний фактор стимулювання колонії GM-CSF гранулоцит-макрофаг колонієстимулюючий фактор GVO генетично модифіковані організми ВІН гематоксилін/еозин HLA людський лейкоцит антиген ICAM-1 молекула міжклітинної адгезії IEZ IFN інтерферон епітеліт епітеліт ЕФЕГЛ ІФН. Ig імуноглобулін II інтерлейкін IMAC інтерстинальні макрофаги iv внутрішньовенне введення JIP JNK-взаємодіючий білок JNK c-jun NH2 кінцева кіназа kda Kilodalton ko нокаут l літр LBP LPS-зв’язуючий білок LPS ліпополісахарид LRR багатий лейцином повтори М моляр (моль/л)

MAPK мітоген активована протеїнкіназа MC Хвороба Крона MCP-1 моноцит хемо атрактант білок 1 MHC основний комплекс гістосумісності хв хв. Хв. Млн. MIP1 макрофаг запальний білок мл мілілітр NBD нуклеотид зв'язуючий домен NF-kB ядерний фактор-kb NK клітини природні клітини-кілери NOD Нуклеотидно-зв'язуючий і домен олігомеризації PBS фосфатно-сольовий сольовий розчин, фосфатний буфер ПЛР ланцюгова реакція полімерази PP Бляшки Пеєра PRR рецептори розпізнавання патогенів РНК рибонуклеїнова кислота RT кімнатна температура SAPK активована стресом білкова кіназа SCID важка комбінована імунна недостатність SEM Стандартна помилка середнього перетворювача сигналу та активатора STAT-3 транскрипції TGF-бета трансформуючий фактор росту бета Th 1/2 клітини T-допоміжні клітини TJ щільне з'єднання TLR митоподібний рецептор TNBS тринітробензол сульфокислота TNF фактор некрозу пухлини U одиниць за ніч у порівнянні з vwf фактора Willeband WT дикого типу, наприклад наприклад µ мікро 4

Список таблиць Таблиця 1: Огляд деяких моделей коліту на тваринах. 21 Таблиця 2: Розрахунок клінічного балу за параметрами втрати ваги, якості стільця та крові в калі (змінено від Cooper et al., 1993). 25 Таблиця 3: Гістологічний показник пошкодження слизової (змінено за Egger, 1997). 28 Таблиця 4: Первинні антитіла. 31 Таблиця 5: Вторинні антитіла. 31 5

Список рисунків Рисунок 1: Класична структура каскаду активованих мітогеном протеїнкіназ (MAPK) [22]. 15 Рисунок 2: Молекулярна структура СППР. 20 Рисунок 3: Фотографії кишечника. 26 Рисунок 4: Індекс активності захворювання: JNK1 -/- проти JNK1 +/+. 34 Рисунок 5: Індекс активності захворювання: JNK2 -/- проти JNK2 +/+. 35 Рисунок 6: Оцінка показника пошкодження крипти: JNK1 -/- проти JNK1 +/+. 36 Рисунок 7: Оцінка показника пошкодження крипти: JNK2 -/- проти JNK2 +/+. 37 Рисунок 8: Репрезентативні зображення ВІН з дистальної кишки. 38 Рисунок 9: Експресія CD8 у ворсинках дистальної кишки (JNK2). 40 Рисунок 10: Зображення IF для експресії CD8 у JNK2 в дистальній кишці. 40 Рисунок 11: Експресія CD4 у ворсинках дистальної кишки (JNK2). 41 Рисунок 12: IF-зображення для експресії CD4 у JNK2 в дистальній кишці. 42 6

Послідовно переключені каскади етапів фосфорилювання, які посилюють реакцію за допомогою прогресування передачі (посилення сигналу). Серед великої групи протеїнкіназ останнім часом особливого значення набуває сімейство так званих мітоген-активованих протеїнкіназ (MAPK) [59, 66]. Сюди входять N-кінцева кіназа c-jun (JNK) та кіназа p38. Рисунок 1: Класична структура каскаду активованих мітогеном протеїнкіназ (MAPK) [22]. JNK активується за допомогою MKK4 та MKK7. Ці MAPKK, у свою чергу, активуються різними MAPKinase-кіназа-кіназами (MAPKKK), які в свою чергу стимулюються такими стимулами, як фактори росту та стресу. 15-й