SDS електрофорез біологія лексика; Форум з біології
білуфі
плазун
Привіт!
Я маю написати звіт про свій електрофорез SDS, і він повинен включати коротку теоретичну частину. Зараз я щось написав, але не впевнений, чи можете ви зробити це так. Хтось має досвід і може про нього прочитати?
Електрофорез SDS - це метод поділу білків, який базується на їх різних молярних масах.
SDS означає додецилсульфат натрію (додецилсульфат натрію) і є аніонною молекулою детергенту з великою неполярною та малою полярною групою.
У випадку з білком неполярний накип вказує всередину, а полярну область назовні. SDS зв'язується з білком так, що білки у зразку заряджені негативно через ремоделювання. Потім SDS-білкові комплекси мігрують до позитивного полюса в електричному полі.
Електрофорез відбувається у поліакриламідному гелі. Тут містяться пори, завдяки яким відбувається поділ білків. Більші білки спочатку повинні розсовувати пори, щоб дифузувати через гель. Це займає більше часу, так що відбувається поділ розміру частинок.
Після поділу білки можна фарбувати синім кумасі прямо в гелі.
Буду вдячний за конструктивну критику,
Модератор
білуфі
плазун
Так, добре. Тож річ про "формування" насправді дурна. "Зовнішнє" насправді було пов'язане з "негативно зарядженим".
Але тоді я це зміню.
Чи є "коефіцієнт заряду" фіксованим терміном?
Краще так:
У випадку з білком неполярна область спрямована всередину, полярна - назовні. Денатурація білків і SDS зв'язується з ними, так що білки у зразку заряджені негативно однаковою мірою.
Модератор
білуфі
плазун
Торстен 1978
плазун
Я мав би пояснення на тему "формування", "денатурація" та "співвідношення маса/заряд", що, на мою думку, є цілком зрозумілим. Я міг би резюмувати це своїми словами, але я вважаю пояснення в книзі Фрідріха Лотцпейха "Біоаналітик" дуже добрим. Тому на даний момент все це як цитата:
"SDS є аніонним миючим засобом і настільки ефективно покриває внутрішній заряд білків, що міцели з постійним негативним зарядом на одиницю маси створюються приблизно з 1,4 г SDS на г білка. Під час підготовки зразків зразки нагріваються до 95 ° C з надлишком SDS нагріваються, а третинні та вторинні структури розчиняються розщепленням водневих зв’язків та розтягуванням молекул. Сіркові містки між цистеїнами розщеплюються додаванням відновлюючого тіолового з'єднання, наприклад ß-меркаптоетанолу або дитиотрейтолу. Розтягнуті амінокислотні ланцюги, завантажені SDS, утворюють еліпсоїди. "