A5 - Характеристика активності пептидів та олігосахаридів у молоці в перерахунку на

менеджер проекту
Професор доктор Г. Ерхардт, проф. Д-р К. Кунц

пептидів

Співробітник
Лікар. С. Кунц, П. Д. Д-р С. Рудлофф, д-р В. Вейманн,

Характеристика активності пептидів
Білки, що містяться в молоці (αS1-казеїн (CSN1S1), αS2-казеїн (CSN1S2), β-казеїн (CSN2) та κ-казеїн (CSN3), α-лактальбумін (LAA) та β-лактоглобулін (LGB)) показують різні генетичні варіанти, які впливають на відповідні амінокислотні послідовності, а отже, і на пептиди, що є результатом розщеплення. Залежно від варіанту молочного білка можуть виникати інші або, можливо, нові біоактивні пептиди, антигіпертензивний ефект яких слід перевіряти. Зразки молока від порід, що трапляються в Німеччині, спочатку характеризуватимуться ізоелектричним фокусуванням у поліморфних білкових системах. Далі різні варіанти молочного білка аналізуються в silico для виявлення біологічно активних пептидів, також беручи до уваги існуючу базу даних з деякими дуже рідкісними варіантами у порід великої рогатої худоби, яким загрожує зникнення (див. Рисунок 1). Для того, щоб перевірити біологічну ефективність ідентифікованих пептидів, вони потім тестуються в різних системах in vitro.

Лекції
Ерхардт, Г. (2004): Генетичні варіанти молока - значення для розведення тварин та харчування людини. Університетська конференція факультету 09 JLU Giessen 10 грудня 2004 р.
Каролі, А., Ерхардт, Г. (2005): Варіанти молочного білка для розведення тварин та харчування людей.
13-й Конґресо Інтернаціонале Делла Fe.Me.S.P.Rum, 01.09.-03.09.2005, Валенцано, Барі, Італія.
Ерхардт, Г. (2005): Значення білків молока для розведення тварин та харчування людей. Колоквіум "Молекулярно-генетичні та фізіологічні характеристики у скотарстві", 23.03.2005, Даммерсторф.

Мережа MEU та зовнішня співпраця
Використання «платформи методів MEU Стабільні ізотопи та клітинна біологія»;
Співпраця з робочою групою професора Єжи Дзюби з кафедри харчової хімії/Ольштинський університет сільського господарства та технологій (Польща)

Співпраця між Інститутом розведення тварин та генетики домашніх тварин та проф. Мейзель, Інститут хімії та технології молока Федерального дослідницького центру харчування та харчових продуктів (BfEL)

Вихідною речовиною для досліджень було молозиво від корів різних порід. Це були німецький голштинський червоний голштейн (A), німецький голштинський чорний голштейн (B), Джерсі (C) та німецький Fleckvieh (D).

Щоб виділити олігосахариди з молока різних порід корів, молоко спочатку знежирили, відокремили від білків і видалили лактозу (гель-фільтрація). Залишилася фракція представляла фракцію олігосахаридів і була додатково охарактеризована після фракціонування в системі аніонообмінної хроматографії з імпульсною амперометричною детекцією (HPAEC-PAD). На малюнку 2 показані HPAEC-PAD хроматограми олігосахаридних фракцій різних рас.

За допомогою так званого мікрочипу Proteoplex (MERCK) визначали панель із 12 цитокінів як реакцію на 6-годинну інкубацію з олігосахаридами коров’ячого молока в концентрації 10 мг/мл. Для того, щоб виявити можливі клітинні мішені індукованих олігосахаридами ефектів, рівень експресії цільових білків, таких як NF-κB, визначали за допомогою кількісної RT-PCR та активації клітинних протеїнкіназ за допомогою так званого ProteomeProfiler (R&D).
Вивчаючи експресію цитокінів, ми змогли показати, що перш за все секреція гранулоцитарно-моноцитарного колонієстимулюючого фактора (GM-CSF) та секреція інтерлейкіну-8 були значно підвищені. Ця підвищена секреція була пов’язана із збільшенням експресії NF-κB та активацією протеїнкіназ p38 та PKB у всіх випадках.
На тлі того, що секреція IL-8 є процесом, який залежить від NF-κB, і це як через експресію GM-CSF, так і через активацію протеїнкіназ, спрямованих на неактивний комплекс NF-κB, це, мабуть, має місце можливий механізм продемонстрованого ефекту олігосахаридів коров'ячого молока.

Мережа MEU та зовнішня співпраця
Використання "функціональної платформи MEU Стабільні ізотопи та клітинна біологія" для функціональних досліджень.

Лекції
Kunz C (2004): Генетичні варіанти молока - значення для розведення тварин та харчування людини. Університетська конференція факультету 09 JLU Giessen

Кунц С (2006)
Олігосахариди в людському та бичачому молоці - потенційні переваги для здоров'я.
Зустріч «Міжнародна молочна федерація», Брюссель

Кунц С (2006)
Молоко це робить? - З раннього дитинства харчування та хвороби в літньому віці.
Університетська конференція кафедри 09