Глікований гемоглобін (Hb A1c) - Синево
Загальна інформація та рекомендації для визначення HbA1c
Визначення рівня глюкози в крові дозволяє оцінити поточний стан метаболізму вуглеводів у хворих на цукровий діабет на момент взяття крові. Навпаки, визначення глікованого гемоглобіну дає ретроспективну оцінку глікемічного статусу, незалежно від добового ритму, дієти та інших минущих коливань концентрації глюкози в крові; 2; 4; 5 .
Важливість глікованого гемоглобіну або HbA1c як маркера контролю глікемії у хворих на цукровий діабет було підкреслено результатами двох великих досліджень - DCCT (Diabetes Control and Complications Trial) та UKPDS (United Kingdom Prospective Diabetes Study). Вони переконливо продемонстрували сприятливий вплив інтенсивного контролю глікемії як на метаболічні параметри (глікемія та HbA1c), так і на довгострокові ускладнення (мікро- та макросудинні) діабету I або II типу та встановили специфічні терапевтичні цілі на основі HbA1c 8 .
Термін "глікований гемоглобін" (GHb) описує різноманітні сполуки, що мають спільне глікування гемоглобіну - реакцію неферментативного приєднання глюкози або інших гексоз до молекули гемоглобіну. Глікація може відбуватися у кількох амінокислотних залишках у структурі гемоглобіну і відбувається у дві стадії (див. Рис. 1):
-конденсація глюкози з вільною аміногрупою гемоглобіну породжує основу Шиффа (нестійкий альдимін);
-Явище перегрупування Амадорі призводить до стабільного кетоаміну (у випадку глюкози, фруктозаміну).
Рис. 1 Глікація гемоглобіну
(Адаптовано від Helmut R. Henrichs, HbA1c - глікований гемоглобін та цукровий діабет)
Спочатку термін "глікозильований гемоглобін" широко використовувався, але враховуючи те, що реакції глікування хімічно відрізняються від реакцій глікозилювання, Спільна комісія з біохімічної номенклатури IUPAC-IUB (JBCN) рекомендувала цей термін " глікований гемоглобін »для опису згаданих вище сполук 5 .
HbA1 позначає загальну кількість глікованого гемоглобіну і відрізняє його від нормального, неглікованого гемоглобіну А. Існує кілька типів HbA1; HbA1c, названий таким чином, оскільки він становив третій окремий пік А1 при хроматографічному розділенні, виявився найважливішою фракцією глікованого гемоглобіну (75-80%). Згідно з визначенням IFCC (Міжнародної федерації клінічної хімії), HbA1c являє собою незворотний глікований гемоглобін в одному або обох аміно-кінцевих валінах β-ланцюгів (див. Рис. 2) 4; 5 .
(Адаптовано з Гаррі Джона, IFCC, Досягнення глобальної стандартизації HbA1c: Ще немає)
Рівень HbA1c у крові корелює як з періодом напіввиведення гемоглобіну, так і із середнім рівнем глюкози в крові протягом усього життя. Таким чином, збільшення HbA1c пропорційне середньому рівню глюкози в крові (середній рівень глюкози в крові) протягом останніх 2-3 місяців перед тестуванням (що відповідає середній тривалості життя еритроцитів) 2; 5; 6 .
Нещодавнє дослідження (2006-2008 рр.), Спонсороване найбільшими міжнародними діабетичними організаціями, більш точно визначило математичну залежність між HbA1c та оціненою середньою глюкозою (eAG). На основі аналізу лінійної регресії цей взаємозв'язок визначається рівнянням:
Таким чином, можна встановити для кожного значення HbA1c відповідну середню глікемію (eAG) 5:
| A1c | EAG | |
| % | мг/дл | ммоль/л |
| 6 | 126 | 7 |
| 6.5 | 140 | 7.8 |
| 7 | 154 | 8.6 |
| 7.5 | 169 | 9.4 |
| 8 | 183 | 10.1 |
| 8.5 | 197 | 10.9 |
| 9 | 212 | 11.8 |
| 9.5 | 226 | 12.6 |
| 10 | 240 | 13.4 |
| 11 | 269 | 14.9 |
| 12 | 298 | 16.5 |
Визначення HbA1c є тестом для оцінки та довгострокового моніторингу рівня глікемії у хворих на цукровий діабет. Він також має прогностичну роль з точки зору ризику ускладнень діабету: кетоацидоз, нефропатія, ретинопатія. Може оцінити найбільш ефективний терапевтичний підхід: пероральні антидіабетики, інсулін, трансплантація β-клітин. З цих причин HbA1c слід регулярно проводити у всіх хворих на цукровий діабет як під час діагностики, так і в рамках постійного моніторингу 1; 2; 5; 6 .
Більшість асоціацій рекомендують 6,5% або 7% HbA1c як терапевтична мішень для хворих на цукровий діабет. Частота тестування на HbA1c залежить від типу діабету та стабільності контролю глікемії:
- через 3-4 місяці для пацієнтів із діабетом I типу, які перебувають на звичайному лікуванні;
- через 1-2 місяці для пацієнтів з діабетом І типу, які перебувають на стадії інтенсивного лікування;
- через 6 місяців для пацієнтів з діабетом II типу зі стабільним глікемічним контролем;
- кожні 1-2 місяці для вагітних з цукровим діабетом;
- кожні 1-2 місяці для пацієнтів з гестаційним діабетом 1; 2 .
Хоча з 1994 року ADA (Американська діабетична асоціація) встановила конкретні терапевтичні цілі для HbA1c, велика варіативність між результатами, отриманими різними методами, спочатку обмежувала їх правильне використання клініцистами. Для того, щоб результати HbA1c були порівнянними з результатами досліджень DCCT/UKPDS і, отже, для досягнення їх стандартизації, у 1996 р. Була запроваджена NGSP (Національна програма стандартизації глікогемоглобіну). Через мережу довідкових лабораторій NGSP сертифікує методи HbA1c різних виробників як простежувані до DCCT. Для забезпечення стабільності результатів NGSP рекомендує виробникам щорічно сертифікувати свої методи 8 .
Донедавна використання тесту HbA1c для діагностики діабету не рекомендувалось, головним чином через відсутність стандартизації результатів. Однак у 2010 році ADA рекомендував включення HbA1c у діагностичні критерії діабету при граничному значенні 6,5% (Тест повинен проводитись за стандартизованим методом DCCT та NGSP). При встановленні цього рішення були враховані переваги HbA1c перед глюкозою в крові:
- Умови голодування не потрібні;
- Більш висока аналітична стабільність;
- Інтраіндивідуальні біологічні варіації ↓ порівняно з глікемією;
- Варіації ↓ в умовах стресу та інтеркурентних захворювань.
З іншого боку, є деякі недоліки HbA1c:
- Вища вартість;
- Відсутність тестування в деяких країнах/регіонах;
- Відсутність кореляції HbA1c із середнім показником глюкози в крові у деяких людей;
- HbA1c не є актуальним у пацієнтів з аномальним обміном еритроцитів (гемолітична анемія, залізодефіцитна анемія); У цих ситуаціях діагноз діабету повинен грунтуватися виключно на рівні глюкози в крові.
ADA також рекомендував пацієнтам із значеннями HbA1c в межах 5,7-6,4% бути включеними до категорії осіб із високим ризиком діабету, поряд із тими, у кого порушена глюкоза натще (IFG) або порушена толерантність до глюкози (IGT) .
Навчання пацієнта - Не потрібні умови "голодування" (натщесерце) 7 .
Зібраний зразок - кров прийде 7 .
Збиральний контейнер - пилосос з EDTA K3 7 .
Кількість зібраного - стільки, скільки дозволяє вакуум 7 .
Перевірка стійкості - 7 днів при 2-8 ° C 7 .
Метод - монотурбідиметричний (стандартизований DCCT: Випробування діабету та ускладнень та сертифікований NGSP: Національна програма стандартизації гликогемоглобіну) Через високу специфічність антитіл проти HbA1c для 4-амінокислотної послідовності на N-кінці глікованого β-ланцюга, аналіз ні показано втручання в роботу більшості патологічних гемоглобінів, карбамільованого гемоглобіну, виявленого у хворих на уремію, та ацетильованого гемоглобіну, що утворюється при терапії аспірином. Таким чином, тест вимірює "справжній" HbA1c, згідно з визначенням IFCC. Визначення HbA1c у цільній гемолізованій крові базується на реакції турбідиметричного гальмування:
- на першому етапі HbA1c у зразку реагує з антитілами проти HbA1c і приводить до розчинних комплексів антиген-антитіло;
- на другій стадії додають полігаптени, які реагують із надлишком анти-HbA1c, утворюючи комплекси антитіло-полігаптен, які будуть визначатися імунотурбідиметрично.
Загальну концентрацію гемоглобіну визначають в окремому каналі. У гемолізованій пробі крові виділений гемоглобін перетворюється на похідне із характерним спектром поглинання, який буде вимірюватися біхроматично; розрахунок HbA1c у відсотках проводиться за протоколом DCCT/NGSP з використанням формули корекції:
% HbA1c = (HbA1c/Hb) x 91,5 + 2,15 7 .
У центральній лабораторії Synevo виявлення глікованого гемоглобіну (Hb A1c) проводиться методом ВЕРХ (високоефективний аналіз рідкої хроматографії).
Довідкові значення та інтерпретація результатів
Інтерпретація результатів згідно ADA:
- підвищений ризик розвитку діабету: 5,7-6,4%
Терапевтична мета у хворих на цукровий діабет: 1 .
• Підвищення рівня Hb A1c свідчить про наявність гіперглікемії протягом останніх 2-3 місяців;
• Значення підвищені у людей з погано контрольованим або вперше діагностованим діабетом;
• Рівень Hb A1c може зрости до 20% у разі поганого контролю глікемії;
• Зниження рівня HbA1c відбувається поступово протягом декількох місяців, оскільки еритроцити з нормальним глікованим гемоглобіном замінюють ті, що мають підвищений рівень 2; 6 .
• Збільшення результату у безсимптомного пацієнта слід повторити для підтвердження діагнозу ЦД 1 .
Межа виявлення - HbA1c: 0,2 г/дл (0,124 ммоль/л)
Інтерпретація результатів
• підвищення рівня Hb A1c свідчить про наявність гіперглікемії протягом останніх 2-3 місяців;
• значення підвищені у людей з погано контрольованим або вперше діагностованим діабетом;
• діабет належним чином контролюється, коли значення нижче 7% отримують 6;
• рівень Hb A1c може зрости до 20% у разі недостатнього контролю рівня глікемії;
• зниження HbA1c відбувається поступово, протягом декількох місяців, оскільки еритроцити з нормальним глікованим гемоглобіном замінюють ті, що мають підвищений рівень 2 .
Підвищений результат у безсимптомного пацієнта слід повторити для підтвердження діагнозу ЦД 1 .
Межі та перешкоди
На додаток до діабету збільшення HbA1c може також відбуватися в таких ситуаціях: залізодефіцитна анемія, постспленектомія, поліцитемія (через деяке продовження тривалості життя еритроцитів).
Зниження вагітності, хронічна крововтрата, посттрансфузія та гемолітична анемія (через зменшення тривалості життя еритроцитів і, як наслідок, зменшення експозиції глюкози) 2; 6 .
збільшується: аспірин, атенолол, бета-блокатор, гемфіброзил, гідрохлоротіазид, індапамід, ловастатин, нікардипін, пропранолол 3 .
зменшується: дефероксаміл, дилтізем, еналаприл, гліпізид, інсулін, лізиноприл, метформін, правастатин, раміприл, верапаміл 3 .
• Аналітичні втручання: у дуже рідкісних випадках у пацієнтів з моноклональними гамапатіями, особливо IgM (хвороба Вальденстрема), отримані результати можуть бути безрезультатними 7 .
1. Американська діабетична асоціація. Стандарти медичної допомоги при цукровому діабеті. У Diabetes Care, том 34, додаток 1, січень 2011 р.
2. Френсіс Фішбах. Хімія. У посібнику з лабораторних та діагностичних випробувань. Lippincott Williams & Wilkins, США, 8-е видання, 2009, 355-359.
3. Френсіс Фішбах. Вплив наркотиків на лабораторні дослідження. У посібнику з лабораторних та діагностичних випробувань. Ліппінкотт Вільямс і Вілкінс, США, 8-е видання, 2009, 1242.
4. Гаррі Джон, IFCC. Досягнення глобальної стандартизації HbA1c: Ще немає.
5. Гельмут Р. Генріхс. HbA1c-Глікований гемоглобін та цукровий діабет, 1-е видання, Бремен: UNI-MED, 2009.
6. Жак Валах. Ендокринні розлади. В інтерпретації діагностичних тестів. Видавництво медичних наук, Бухарест, 7-е видання, 2006; 804 806.
7. Синевська лабораторія. Конкретні посилання на робочу технологію, що використовується 2011 р. Тип посилання: Каталог.
8. Ренді Р. Літтл, Курт Л. Рольфінг, Девід Б. Сакс, Керівний комітет Національної програми стандартизації глікогемоглобіну (NGSP). Стан вимірювання гемоглобіну A1c та цілі поліпшення: від хаосу до порядку поліпшення допомоги при цукровому діабеті. У клінічній хімії, 57: 2, 205-214, 2011.