Хвороба Крона, Інновації Ресвератрол бета-каротин

Чи буде лікування хвороби Крона мікрочастинками, що містять ресвератрол або бета-каротин? Це шлях, який досліджується в цій дисертації доктора фармацевтики Кенхи Бенхайма.

Що таке хвороба Крона ?

Хвороба Крона (CD) - це аутоімунне захворювання. Це хронічне запальне захворювання кишечника (ВЗК), яке може призвести до тривалої втрати функції кишечника. Як і будь-яке аутоімунне захворювання, його походження є багатофакторним, що частково може пояснити невдачу певних методів лікування. Характеризується чергуванням фаз: фази рецидивів (характеризуються гострою діареєю) та фази ремісії змінної тривалості з часом. Ця патологія являє собою справжню проблему охорони здоров’я, оскільки CD, ніж значний фізіологічний вплив, впливає на якість життя пацієнта.

Аутоімунні захворювання прогресують

За останні п'ятдесят років захворюваність на аутоімунні захворювання (СНІД) зросла більш ніж удвічі. Щороку у Франції реєструється понад 4000 нових випадків. Частота CD постійно зростає, особливо в промислово розвинених країнах, де страждає 1 людина на 1000, а пік спостерігається у 20 років. Сьогодні хвороба вражає 1 мільйон людей у всьому світі.

Які сучасні методи лікування хвороби Крона ?

В даний час не існує лікування, здатного вилікувати аутоімунну патологію.

Після діагностики CD пацієнту призначають ліки.

Протизапальні препарати (аміносаліцилати та кортикостероїди) залишаються засобами першої лінії для заспокоєння запалення під час нападу.
Для цілеспрямованого впливу на запальну реакцію зазвичай використовують імуномодулятори, а також TNF-альфа. Імуномодулятори допомагають підтримувати ремісію після лікування аміносаліцилатами або кортикостероїдами.
Анти-TNF альфа-засоби - новіші методи лікування, що мають підтримуючу роль.
У разі кишкової інфекції або ускладнень (свищів, абсцесів) можуть бути призначені антибіотики. Для завершення лікування можуть знадобитися протидіарейні та знеболюючі засоби.

Всі ці методи лікування мають обмеження, здебільшого непереносимість активних інгредієнтів та стійкість до лікування, що призводить до довготривалого відмови лікування.

Аміносаліцилати, включаючи: азульфідин â (сульфасалазин), пентаза â (месалазин або месаламін) часто викликають багато побічних ефектів: нудоту, блювоту та головний біль.

Пероральні кортикостероїди із системним ефектом, такі як Преднізон - або Предізолон - мають обмежене тривале застосування, оскільки в більшості випадків вони спричиняють помітні побічні ефекти: збільшення ваги, вугрі, порушення крові. Настрій, безсоння, остеопороз.

Найчастіше призначаються імуномодулюючі препарати, такі як Імуран â (азатіоприн), Пурінетол â (6-меркаптопурин) або Ревматрекс â (метотрексат), можуть, у разі невідповідної дози, зменшити стійкість до інфекцій, крім нудоти, блювоти та діареї.

Обіцянки ресвератролу та бета-каротину

Тому ці звичайні методи лікування мають довгострокові недоліки. Звідси інтерес до розгляду інноваційної протизапальної стратегії лікування хвороби Крона.

Ця робота була проведена на фармацевтичному факультеті Марселя в Галенській лабораторії під керівництвом професора Піцерелла у партнерстві з д-ром РОБІНОМ з Інституту радикальної хімії Сен-Жером. Метою проекту є ефективний контроль запалення, характерного для CD, одночасно обмежуючи несприятливі наслідки лікування.

Раніше були відібрані дві молекули через їх сильну протизапальну та антиоксидантну силу: ресвератрол та бета-каротин.
Через їх фізико-хімічну нестабільність основною проблемою залишається головним чином забезпечення їх стабільності в організмі і, отже, хороша біодоступність після всмоктування всередину. Для подолання цього недоліку було розглянуто методику мікрокапсуляції: вона полягає в інкапсулюванні активного початку всередині намистини з метою захисту та поліпшення його вивільнення in situ.

Ресвератрол

Ресвератрол залишається одним з найпотужніших антиоксидантів, здатним стимулювати вироблення "сиртуїнів", відомих як білок довголіття (1). У 95% випадків ресвератрол запобігає перекисному окисленню ліпідів порівняно з 65% для вітаміну Е та 37% для вітаміну С (2).

У 1939 р. Доктор Такаока вперше витягнув фрагмент резорцину з морозника Veratrum album L.var grandiflorum. Він також був ідентифікований в 1963 році в корені споришу японського (Fallopia japonica), одному з найбагатших джерел відомого ресвератролу (2,96-3,77 г/кг).

В цілому ця молекула міститься в рослинах, головним чином у зернах та шкірці винограду, а також у ожині та арахісі. Його секреція індукується стресом навколишнього середовища, або, можливо, патогеном (наприклад, атакою грибка навколишнього середовища або ботритисом у лоз). Але майже тридцять років, у 1992 році, знадобилося, щоб успішно ідентифікувати його у шкірці винограду, а отже, і у вині. Тривалість мацерації шкірок у соку для вина визначає концентрацію ресвератролу. Це явище пояснює різницю у вмісті між білими винами, винами розе та червоними винами, червоними винами, що мають вищу концентрацію ресвератролу.

Бета каротин

Бета-каротин належить до сімейства каротиноїдів помаранчевого кольору, яке в основному міститься в:

Овочі жовто-оранжеві та зелені;
Плоди;
Темно-зелені листові овочі;
Морква; канталупи; ямс; папайя; манго; шпинат та капуста (5).

У поєднанні з дієтою, багатою каротиноїдами (рослинні пігменти, бета-каротин може захищати ліпіди від автоокислення вільних радикалів в результаті реакцій з пероксильними радикалами.

Він також є головним попередником (провітаміном) вітаміну А. Однак перетворення у вітамін А відбувається лише в тому випадку, коли це потрібно організму, і він повинен надходити з їжею, оскільки він не синтезується організмом (3). Ось чому поліпшення стабільності та розчинності бета-каротину можна досягти за допомогою мікрокапсуляції (4).

Нановектори, як вони працюють ?

2000-ті ознаменували початок ери нанотехнологій, застосовуваних для охорони здоров’я. Таким чином, регулярно збільшується кількість ліків у формі наночастинок, затверджених американськими та європейськими регуляторними органами.
Діаметр мікрочастинок становить від 1 до 1000 м м і складається з двох частин:

Серце або ядро, що включає активні інгредієнти (ресвератрол, куркумін, бета-каротин);
Оболонка або конверт, що захищає серцевину від зовнішнього середовища (6).

Нановектори завдяки своїй наноскопічній збірці можуть проникати в клітини в сто разів більше. Опинившись у цих клітинах, нановектори, через їх дуже малий розмір, матимуть дуже велику обмінну поверхню. Інкапсуляція малих молекул активних інгредієнтів у векторах цікава, оскільки вектор захищає активну молекулу під час циркуляції в крові. Він також захищає здорові тканини та покращує ефективність лікування, розводячи активну молекулу лише на місці, яке підлягає лікуванню.

Нановектори, перевірена техніка

Синтез нановекторів у лабораторії для лікування запальних захворювань кишечника не є чимось новим. Дійсно, було проведено значну кількість досліджень. Серед них новий терапевтичний підхід проти запальних захворювань кишечника був розроблений групою дослідників з Університету Еморі в Атланті на чолі з д-ром Дідьє Мерліном та д-ром Гійомом Дамассо у співпраці з лабораторією доктора Нірен Мурті з Georgia Tech в Атланті (7).

Ця робота полягала в розробці наночастинок, що дозволяють лікувати хронічні запальні захворювання кишечника (ВЗК).

Хвороба Крона характеризується під час нападів значним збільшенням TNF-альфа (фактора некрозу пухлини) в зонах запалення, що робить ці фактори головним чином відповідальними за клінічні ознаки. На сьогоднішній день основне лікування полягає у пригніченні продукції цієї молекули високими дозами протизапальних кортикостероїдів або внутрішньовенним (IV) введенням антитіл проти TNF-альфа. Кожне з цих методів лікування має безліч пов’язаних з ними шкідливих побічних ефектів. Команда докторів Мерлін та Дамассо зосередилася на розробці наночастинок, званих TKN (наночастинки тіокеталу), що дозволяють векторизувати молекули siRNA *, таким чином блокуючи вироблення запального фактора, характерного для CD, TNF альфа.

Особливо цікавим є процес вивільнення діючої речовини в організм. Справді, структура цих наночастинок була спеціально розроблена для руйнування активними активними формами кисню (реактивні види кисню), молекулами, дуже агресивними для навколишнього середовища з сильною окисною силою і які сильно виражені в зонах запалення, особливо при ВЗК.

Таким чином, дослідницька група галенської лабораторії в рамках фармацевтичного факультету Марселя, очолювана професором Пічереллем, зосередилася на синтезі нановекторів, що капсулюють молекули з сильною антиоксидантною та протизапальною силою, але мають незначні або відсутність побічних ефектів навіть при високих дозах.

Отже, інноваційним є не використання нановекторів для лікування ВЗК, а інкапсуляція протизапальних активних інгредієнтів із таких рослин, як ресвератрол, уркумін та бета-каротин.

Результати

Це в основному включає доведення того, що нановектори, що містять ресвератрол (RSV) або бета-каротин, мають протизапальну дію в кишечнику після їх викиду в організм.

Тести in vitro проводили з використанням клітин CaCo2, імітуючи клітини ентероцитів в епітелії кишечника (8).

Клітини CaCO2 кишкового епітелію людини використовували для вивчення антиоксидантної дії бета-каротину та RSV.

TNF альфа є стресовим фактором, який знижує концентрацію в присутності антиоксиданта: клітинний прохід інкапсульованих РСВ та бета-каротину полегшується. Окислювальний стрес вимірюється швидкістю вільних радикалів. Він значно знижується у присутності RSV та бета-каротину. Таким чином, здається, що клітинний прохід RSV та бета-каротину збільшується в інкапсульованій формі.

Останній крок

Хвороба Крона залишається важливою проблемою охорони здоров'я. Це аутоімунне захворювання, захворюваність на яке зростає і походження якого є багатофакторним. Сучасні методи лікування залишаються ефективними для зменшення симптомів, але в довгостроковій перспективі мають серйозні недоліки.

Дослідження, проведене в Галенській лабораторії фармацевтичного факультету Марселя, спрямоване на пошук альтернативи для подолання негативних наслідків сучасних методів лікування.

Активні інгредієнти, отримані з рослин, такі як ресвератрол та бета-каротин, інкапсулюються в нановектори, щоб виділятися в організмі та надавати протизапальну дію.

Результати цього дослідження вказують, що нановектори, що містять ресвератрол або бета-каротин, зменшують запалення та окислення в кишечнику, що утворюються під час ВЗК.

Хоча дослідження in vitro показали, що синтезовані нановектори зменшують запалення кишечника, ще слід провести дослідження in vivo на щурах з індукованим запаленням кишечника. Нановектори, синтезовані до цього часу в лабораторії, одночасно інкапсулюють лише одну діючу речовину. Синергія між ресвератролом та бета-каротином у нановекторі повинна бути перевірена для аналізу очікуваного протизапального ефекту. Нарешті, використані нановектори належать до першого покоління нановекторів: вони не мають конкретного націлювання і, отже, не вивільняють активного принципу, який вони включають після всмоктування перорально.

Синтез вектора другого або третього покоління дозволить конкретно націлити кишечник з метою оптимізації лікування.

Фармацевт
Докторант фармацевтичного факультету Екс-Марселя
ОФ. фітотерапія
ОФ. мікроживлення

* міРНК : Мала РНК, що заважає