Інститут f; r Експериментальна біомедицина - функція тромбоцитів на стільці I
Після травм тромбоцити відіграють важливу роль у зупинці кровотечі. Однак на сьогоднішній день є широкі відомості про те, що тромбоцити також відіграють важливу роль при серйозних захворюваннях, які в першу чергу не пов'язані з кровотечею. Ми досліджуємо роль функції тромбоцитів у відповідних захворюваннях, таких як сепсис.
Ми розглянули різні аспекти формування та функціонування тромбоцитів людини.
I) Стандартизована діагностика функції тромбоцитів
Тромбоцити людини дуже чутливі. Необхідно дотримуватись попередньо аналітичних стандартів якості з моменту взяття та переробки крові до необхідних досліджень. Добре відомим методом аналізу функції тромбоцитів є агрегометрія. Однак ця методика вимагає відносно великої кількості крові, тому не підходить людям з дуже низьким рівнем тромбоцитів або маленьким дітям. Проточна цитометрія пропонує альтернативу, яка вимагає мінімальної кількості крові і дозволяє одночасно досліджувати багато аспектів функції тромбоцитів. Це включає обладнання та щільність поверхневих рецепторів, вивільнення внутрішніх (альфа та щільних) гранул та здатність активувати рецептори інтегрину. Ми розробили практичний підхід до діагностики функції тромбоцитів та запропонували алгоритм виявлення основних генетичних змін у спадкових тенденціях кровотечі.
II) Функція тромбоцитів при сепсисі
Сепсис - дуже складна хвороба із системною дисрегуляцією багатьох компонентів, яка часто може бути спровокована бактеріями або грибками. У початковій фазі захворювання кількість тромбоцитів у крові спочатку збільшується (реактивний тромбоцитоз), але значно падає з часом тривалості сепсису. Сильна тромбоцитопенія (дуже мала кількість тромбоцитів у крові) пов’язана з поганим прогнозом. У співпраці з відділенням інтенсивної терапії Медичної клініки І Університетської лікарні ми досліджуємо реактивність тромбоцитів у пацієнтів із сепсисом під час перебігу захворювання і сподіваємось краще охарактеризувати основні зміни тромбоцитів, а отже, також розробити прогностичні та діагностичні маркери.
III) Біогенез тромбоцитів та генна терапія
Тромбоцити в крові виникають із клітин-попередників (гемопоетичних стовбурових клітин) у кістковому мозку. Вони реагують на специфічні фактори росту, такі як тромбопоетин, потім диференціюються в (мегакаріоцити) клітини-попередники і, зрештою, у зрілі клітини крові, такі як мегакаріоцити. В основному вони знаходяться на судинах кісткового мозку, де вони викидають тромбоцити в кров. Оскільки тромбоцити не мають ядра, ви не можете генетично їх модифікувати. Ми розробили протокол, згідно з яким дозволяємо гемопоетичним стовбуровим клітинам у кістковому мозку (так звані CD34-позитивні клітини) диференціюватися в мегакаріоцити в культурі клітин, які потім відрізаються у вигляді зрілих клітин «пропелентами», з яких виникають тромбоцити. Крім того, ми можемо використовувати "індуковані плюрипотентні стовбурові клітини" (клітини iPS), які можна виділити та відрізнити від донора, можливо, з патологічним передісторією. Ці клітини можна модифікувати за допомогою векторів генної терапії, щоб ми могли вивчити вплив на формування тромбоцитів у разі дефіциту або надлишку окремих білків. Врешті-решт, мета полягає в забезпеченні безпечної корекції власних кровотворних стовбурових клітин з метою проведення аутологічної трансплантації стовбурових клітин і, таким чином, для лікування рідкісних вроджених захворювань тромбоцитів та кровотеч.