Назва дисертації

Дипломна робота Назва дипломної роботи Вплив куріння на ліпідний профіль, а також вибрані параметри окисного стресу у здорових дорослих Автор Юлія Пешль Бажаний науковий ступінь Magistra der Naturwissenschaften (Mag.rer.nat) Відень, 2011 Номер дослідження відповідно до навчального листа: A 474 Поле дослідження згідно з навчальним листом: Дипломне дослідження з харчової науки Науковий керівник: о. Ун-т-проф. Лікар. Ібрагім Ельмадфа

Виконання детермінації

Сторінка III Подяка Я хотів би скористатися цією можливістю, щоб подякувати, зокрема, своїм батькам, і моїй матері зокрема. Я присвячую цю роботу їй, щоб від усього серця подякувати їй за безмежну підтримку, терпіння та допомогу під час мого навчання. Особлива подяка також висловлюється пану о. Університету-проф. Лікар. Ібрагіму Ельмадфі за те, що я перебрав тему моєї дипломної роботи та дружню підтримку під час моєї роботи, а також моєму співкерівнику доктору Елізабет Фабіан, котра завжди була поруч із порадами та діями, незважаючи на дорожньо-транспортну пригоду та тривале перебування на реабілітації. Нарешті, я хотів би подякувати моєму найбільшому зразку для наслідування, моєму батькові. Його підтримка зміцнила мене, щоб здійснити мої мрії та досягти своїх цілей.

Вік VI 3.4.1. Метод. 26 3.4.2. Використані матеріали та обладнання. 26 3.4.3. Виконання детермінації. 27 3.4.4. Оцінка. 28 3.5. Визначення окисленого холестерину ЛПНЩ (oxldl). 29 3.5.1. Метод. 29 3.5.2. Використані матеріали та обладнання. 29 3.5.3. Розведення зразків. 30 3.5.4. Виконання детермінації. 30 3.5.5. Оцінка. 30 3.6. Визначення вдосконалених продуктів окисного білка (AOPP). 31 3.6.1. Метод. 31 3.6.2. Використані матеріали та обладнання. 31 3.6.3. Виконання детермінації. 31 3.6.4. Оцінка. 32 3.7. Контроль якості. 32 3.8. Статистична оцінка. 33 4. Результати. 34 4.1. Розподіл за віком та статтю. 34 4.2. Куріння. 37 4.3. Антропометричні параметри. 40 4.3.1. Висота. 42 4.3.2. Вага тіла. 42 4.3.3. ІМТ. 44 4.3.4. Обхват талії. 44 4.3.5. Окружність стегон. 45 4.3.6. Співвідношення Ш/В. 46 4.4. Ліпідний профіль. 47 4.4.1. Загальний холестерин. 47 4.4.2. ЛПВЩ холестерин. 48 4.4.3. Загальний/ЛПВЩ холестерин. 49 4.4.4. Тригліцериди. 49 4.4.5. Холестерин ЛПНЩ. 50 4.4.6. Коефіцієнт ЛПНЩ/ЛПВЩ. 51 4.5. Параметри визначення окисного стресу. 52 4.5.1. Загальна антиоксидантна здатність (TAC). 52 4.5.2. MDA. 53 4.5.3. AOPP. 54 4.5.4. oxldl. 55

Вік VII 5. Обговорення. 57 5.1. Розгляд всього колективу щодо відмінностей між статями. 57 5.1.1. Ліпідний профіль, антропометрія та серцево-судинний ризик. 57 5.1.2. Куріння, окислювальний стрес та серцево-судинний ризик. 60 5.2. Куріння та його вплив на ліпідний профіль, антропометрію та серцево-судинний ризик. 64 6. Висновок. 66 7. Короткий зміст. 69 8. Короткий зміст. 71 9. Бібліографія. i

Сторінка IX Перелік рисунків Рисунок 2-1: Патогенез атеросклеротичних запальних реакцій. 13 Рисунок 2-2: Окислювальний стрес. 18 Рисунок 3-1: Розподіл поведінки куріння. 21 Рисунок 4-1: Різниця між жінками та чоловіками щодо ліпідного профілю та загальної антиоксидантної здатності (*: р 0,85 у жінок та WHR> 1,00 у чоловіків, є абдомінальне ожиріння та, отже, підвищений серцево-судинний ризик ( ELMADFA, 2004). Зменшення вісцерального та підшкірного жиру призводить до зменшення серцево-судинних факторів ризику, а іноді покращує ліпідний профіль, артеріальний тиск, глюкозу в крові, HbA1cs та резистентність до інсуліну (HAUSTEIN, 2004).

Вік 5 За статистикою Австрії, в Австрії 44% чоловіків та 55% жінок мають нормальну вагу. 43% чоловічого населення вважається надмірною вагою, а 12% - навіть ожирінням. У популяції жінок із ожирінням цей відсоток становить 13%. У віковій групі від 60 до 74 років частота надмірної ваги та ожиріння найвища у обох статей (чоловіки: 19%; жінки: 21%). Якщо зараз порівняти результати опитування ІМТ за 2006/07 рр. Зі спеціальними запитаннями щодо охорони здоров’я в 1999 р. Щодо мікропідпису, можна дійти наступного висновку: Значне збільшення кількості людей, що страждають ожирінням, можна спостерігати як для статей, так і для всіх вікових груп. Щодо ступеня недостатньої ваги (ІМТ 200 мг/дл або 5,2 ммоль/л тригліцеридів:> 160 мг/дл або 1,8 ммоль/л холестерину ЛПНЩ:> 130 мг/дл або 3,4 ммоль/l Холестерин ЛПВЩ: ph = 7,4 3.3 Визначення малонового діальдегіду в плазмі 3.3.1 Метод Малондіальдегід є продуктом розпаду перекисного окислення ліпідів. Тому він є важливим методом для визначення окисного пошкодження біомолекул. Концентрацію MDA у плазмі крові визначали в Визначено в ході цієї роботи за допомогою ВЕРХ (WONG et al., 1996).

Сторінка 24 3.3.2. Матеріали та пристрої, що використовуються Таблиця 3-3: Прилади для визначення MDA Колонка: LichroCART 125-4 Lichrosher 100 RP-18,5 мкм, захисна колонка Merck: LichroCART 250-4 Lichrosher 100 RP-18, 10 мкм, Merck LaChrom Merck Hitachi Насос для хроматографічної системи L-7100 Флуоресцентний спектрофотометр F-1050 Інтегратор D-7500 Таблиця 3-4: Реагенти для хімічних речовин, що визначають MDA, що застосовуються до тетраетоксипропану Sigma № T-9889 Етанол Pa Riedel de Haën No 32221 фосфорна кислота 85% Riedel de Хаен №30417 Тіобарбітурова кислота Сигма № Т-5500 Метанол Merck LiChrosolvo №1.06007.2500 Калій Дідрофосфат Фосфат Рідель де Хаен № 04245 Таблиця 3-5: Умови ВЕРХ для визначення MDA Мобільна фаза A: B = 60:40 A: Фосфатний буфер (попередньо розчинити 6,8 г дигідрофосфату калію в 800 мл дистильованої води; відрегулювати рН = 6,8 1 М КОН; залити до 1 л дистильованою водою; фільтр) B: об'єм введення метанолу 20 мкл витрати 1,0 мл/хв Тиск 85 бар Чутливість 20 виявлення Довжина хвилі випромінювання: 563 нм збудження w довжина хвилі: 532 нм, час роботи 5 хвилин

Сторінка 28 Таблиця 3-8: Реагенти Буферний розчин PBS ABTS Стандартний плазмовий міоглобін H 2 O 2 заготовка 410 мкл 400 мкл - - 20 мкл 170 мкл стандарт 410 мкл 400 мкл 10 мкл - 20 мкл 170 мкл проба 400 мкл 400 мкл - 20 мкл 20 мкл 170 мкл Після додавання H 2 O 2 до досліджуваної суміші криву екстинкції вимірюють фотометрично при 734 нм протягом 6 хвилин. Саме стільки часу найвищий стандарт тролоксу може пригнічувати реакцію. 3.4.4. Оцінка Кінцеві точки 5 стандартів та зразки виражаються у відсотках від заготовки. (Пусте значення абс. - стандартне абс.)/Пусте значення абс. = [%] (Пусте значення абс. - зразок абс.)/Пусте значення абс. = [%] Оцінка проводиться шляхом лінійної регресії стандартних рівнів, оскільки існує пряма залежність між% ставками стандартів та їх концентрацією. Антиоксидантна здатність зразка дається у ммолях еквівалентів тролоксу (Trolox-Ä)/л. Таблиця 3-9: Стандартні концентрації для оцінки TAC № Trolox [2,5 мм] Концентрація буфера PBS [мкл] [мкл] [ммоль/л] Стандарт 1 100 400 0,5 Стандарт 2 200 300 1 Стандарт 3 300 200 1,5 стандарт 4 400 100 2,0 стандарт 5 100-2,5

Вік 32 3.6.4. Оцінка Концентрацію AOPP оцінювали за допомогою прямої лінійної стандартної кривої, яка була створена з шести стандартів (концентрація: 0 мкмоль/л 100 мкмоль/л). 3.7. Забезпечення якості Для перевірки якості та точності використовуваних методів для кожного виявлення проводили як внутрішньоаналітичний аналіз (визначення 10 однієї і тієї ж проби), так і внутрішній аналіз (визначення одного і того ж зразка протягом п’яти різних днів). Таблиця 3-12: Коефіцієнти варіації (CV) внутрішнього аналізу та параметрів між аналізами CV внутрішнього аналізу (%) CV аналізу (%) Загальні ліпіди 2,9 4,3 Загальний холестерин 2,1 2,3 HDL холестерин 1,4 4, 3 Тригліцериди 1,6 2,4 MDA 0,4 1,5 TAC 0,3 0,8 AOPP 1,0 1,4 окслд 1,4 3,6

Сторінка 33 3.8. Статистична оцінка Статистична оцінка результатів аналізу проводилася за допомогою статистичного програмного забезпечення SPSS 16.0 для Windows. Тест Колмогорова-Смирнова проводили для перевірки окремих параметрів на нормальний розподіл та однорідність дисперсії. Середнє порівняння нормально розподілених характеристик проводили за допомогою t-критерію для незалежних зразків, тоді як U-критерій Манна-Уїтні використовували для даних, які зазвичай не розподілялись. Аналіз лінійної регресії проводили за Пірсоном.

Сторінка 47 1,2 1 [a] [b] 0,8 співвідношення W/H 0,6 0,4 0,2 0 Жінки Чоловіки Курці Не палять Колишні курці Рисунок 4-6: Порівняння співвідношення W/H між окремими групами а: жінки жінки р 200 мг/дл або> 5,2 ммоль/л. Враховуючи загальну кількість колективу, значення в середньому становило 5,2 ± 1,2 ммоль/л, і, отже, у 51% випробуваних вище рекомендованого контрольного діапазону. Між статями різниць навряд чи було, але підвищення виявлено у 56% курців, 49% некурців та 46% колишніх курців. Також були знайдені суттєво позитивні кореляційні зв’язки (наведено р. 5. Це значення було перевищено лише у 12% випробовуваних, з них 36% - жінки та 64% - чоловіків. Коефіцієнт суттєво відрізнявся між статями (п 160 мг/дл та 1, 8 ммоль/л, що, таким чином, являє собою підвищений серцево-судинний ризик. У порівнянні між статями обстежені чоловіки мали середнє вище значення, ніж жінки-учасниці (р 1,8 ммоль/л становило 10% у жінок, для чоловіків (20%) він був удвічі вищим, що є значною різницею порівняно із середнім показником-

Не вдалося визначити, чи досліджуваний описує себе як курця, колишнього курця чи суворого некурця за 50-м значенням тригліцеридів (табл. 4.4.). Однак ризик був вищим серед колишніх курців (22%) та курців (16%) порівняно з некурящими (8%). Результат цього дослідження показує значну кореляцію між вагою (ГК: r = 0,311, р 130 мг/дл або 3,4 ммоль/л, що було характерно для понад 30% суб'єктів, що брали участь. Значна різниця (р 3, 4 ммоль/л) і пов'язаний з цим підвищений ризик серцево-судинних захворювань був більш вираженим у учасників дослідження у чоловіків. Тільки трохи менше 60% чоловіків та 71% жінок мали привабливого курця, p